内皮细胞cavin-1caveolin-1信号在高糖抑制自噬和促进ldl穿胞中的作用以及机制-role and mechanism of cavein - 1 caveolin - 1 signal in inhibiting autophagy and promoting ldl cell penetration by high glucose.docxVIP

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2018-07-27 发布于上海
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内皮细胞cavin-1caveolin-1信号在高糖抑制自噬和促进ldl穿胞中的作用以及机制-role and mechanism of cavein - 1 caveolin - 1 signal in inhibiting autophagy and promoting ldl cell penetration by high glucose.docx

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内皮细胞cavin-1caveolin-1信号在高糖抑制自噬和促进ldl穿胞中的作用以及机制-role and mechanism of cavein - 1 caveolin - 1 signal in inhibiting autophagy and promoting ldl cell penetration by high glucose

独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日目录主要文缩略词表················································1中文摘要······················································2英文摘要······················································4前言······················································7材料和方法····················································9实验结果······················································17讨论·······················································27全文总结·······················································30综述·······················································35致谢······················································48主要缩略词表（Abbreviation）英文缩写英文全称中文名称LDLlowdensitylipoprotein低密度脂蛋白HUVEChumanumbilicalveinendothelialcell人脐静脉内皮细胞siRNASmallinterferingribonucleicacid小干扰核糖核酸ATG5Autophagy-relatedgene5自噬基因相关蛋白5ATG12Autophagy-relatedgene12自噬基因相关蛋白12LC3A/BLightchain3A/B轻链3A/B3-MA3-methyladenine3-甲基腺嘌呤BABafilomycin巴佛洛霉素CQchloroquine氯喹CO-IPCo-immunoprecipitation免疫共沉淀ASAtherosclerosis动脉粥样硬化PEphosphatidylethanolamine磷脂酰乙醇胺ECEndothelialcells内皮细胞IBimmunoblotting免疫印迹HBSSHanksBalancedSaltSolutionHanks平衡盐溶液LIRLC3-interactingregionLC3结合域CBMcaveolin-1-bindingmotif与Caveolin-1结合的结构域FITCfluoresceinisothiocyanate异硫氰酸荧光素HGHighglucose高糖内皮细胞cavin-1/caveolin-1信号在高糖抑制自噬和促进LDL穿胞中的作用以及机制中文摘要目的小凹（caveolae）是细胞膜上直径50-80nM的细胞膜凹陷，其在内皮细胞表达尤其丰富，被认为在大分子物质转运和信号转导中有着极其关键的作用。在内皮细胞中，caveolin-1是小凹形成的关键性结构蛋白而cavin-1是小凹形成的重要调节蛋白。研究表明高糖处理内皮细胞可以改变内皮细胞的稳态，如增加内皮细胞的通透性，诱导内皮细胞凋亡。自噬作为细胞的看家机制在维持细胞的稳态中有着关键性的作用。有研究表明caveolin-1可以负调控自噬，但是cavin-1在自噬中的作用尚不清楚。本研究的主要目的是研究内皮细胞中cavin-1在自噬中的作用和机制以及cavin-1/caveolin-1在高糖抑制自噬和促进低密度脂蛋白（LDL）穿胞中的作用以及机制。方法（1）在培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）中采用小干扰RNA（siRNA）的方法敲降（knockdown）cav