胚胎停止发育患者绒毛组织中e-cadherin及β-catenin的表达及意义-expression and significance of e - cadherin and β - catenin in chorionic villi of patients with embryonic arrest.docxVIP

胚胎停止发育患者绒毛中E-cadherin及β-catenin的表达及意义妇产科学，秦源坤（研究生），陈虹（导师）【摘要】目的探讨E-钙连素（E-cadherin）及β-连环素（β-catenin）在胚胎停止发育患者绒毛中的表达情况。方法采用免疫组化PV6001／6002Two-StepIHCDetectionReagent二步法分别检测30例胚胎停止发育绒毛及30例同期正常早孕要求行人工流产者绒毛中E-钙连素及β-连环素的积分光密度（IOD）值。结果E-钙连素与β-连环素在正常早孕组及胚胎停止发育组中均有表达，且胚胎停止发育组绒毛滋养细胞中E-钙连素与β-连环素表达明显高于正常早孕组。结论E-钙连素及β-连环素在胚胎发育早期可能有着重要的作用，二者的高表达可能导致胚胎停止发育。【关键词】胚胎停止发育；绒毛；E-钙连素；β-连环素略缩词表英文缩写英文全文中文全文E-cadE-cadherinE-钙粘素β-catβ-cateninβ-连环素IODIntegratedOpticalDensity积分光密度值前言胚胎停止发育（embryonicarrest）:是临床妊娠中常见的疾病，其最终导致胚胎丢失，是流产前的病理过程，可导致稽留流产和不全流产[1]。导致胚胎发育停止的原因十分复杂，可能与染色体异常，母体内分泌失调、解剖因素、免疫因素、环境因素、感染等因素相关。近年来胚胎停止发育的诱因成为研究的热点。自1829年Lobstein等提出“肿瘤胚胎源性起源”概念以来，多种研究都着力于胚胎植入与肿瘤侵袭转移的相似性，并取得了突破性的进展，其中最引人深思的是Murray[2]的一篇关于胚胎植入与肿瘤侵袭转生物学行为的相似性的报道，该报道从细胞增殖分化、侵袭信号转导通路、血管侵蚀和新生血管形成、细胞凋亡等方面阐述了囊胚滋养细胞与肿瘤细胞生物学行为的相似性，并指出：新生的肿瘤病灶及胚胎成功植入均依赖于丰富的血管网形成，抗血管生成可抑制肿瘤侵袭转移及胎盘作用。滋养细胞发挥类似肿瘤细胞侵袭作用是人类胎盘形成的关键[3]，在滋养细胞发挥侵袭作用过程中，很多因子参与，其中粘附分子倍受关注，这给研究胚胎停止发育机制带来了新的突破点。Cadherins是一类钙离子依赖性的介导细胞粘附和信号转导的跨膜糖蛋白，由五个细胞膜外区、一个跨膜区和一个高度保守的胞内区组成。其胞外区参与细胞间粘附，胞内区通过连接蛋白如β-catenin与细胞骨架蛋白actin相连，参与信号转导。根据组织来源不同，cadherins分为E、P和N三种。其中，E-cadherin主要分布在各种上皮细胞膜上，P类蛋白主要位于上皮细胞膜上，P类蛋白主要位于上皮组织和胎盘的基低膜层，而N类蛋白主要在神经组织、心脏、骨骼肌和角膜组织等表达。E-钙粘蛋白(E-cadherin,E-cad)是一类重要的细胞间粘附分子,在胞内与连环蛋白、P120构成复合体参与细胞多种功能。它主要通过与细胞内Catenin蛋白的相互作用形成钙粘素/Catenin复合物，从而介导细胞间连接，加强细胞粘附。LarueL及RiethmacherD等人基因剔除E-钙粘素的纯合子小鼠在胚胎发育早期不能形成有功能的滋养外层，在胚胎植入过程中胚胎死亡，而基因剔除杂合型和野生型小鼠则发育正常，表明E-钙粘素在胚胎发育和植入过程中可能起重要作用[4，5]。此外，国内最新研究，E-钙粘蛋白参与调控滋养细胞的侵袭能力，其表达水平可能与妊娠结局密切相关[6],我们从这些研究中可以得出E-钙粘蛋白所介导的细胞粘附系统对胚胎发育有至关重要作用。β-catenin是一个相对分子量为92kD的细胞内糖蛋白，其基因在染色体的定位3P21、3P22。作为一种粘附分子被发现的，因近年发现其在Wnt信号转到通路及在某些肿瘤的发生中具有重要作用而受到关注。β-catenin具有双重功能，一方面在胞浆内直接和E-cadherin结合，在细胞膜表面形成E-cadherin/catenin复合体，维持上皮细胞极性和完整性[7]。另一方面，β-catenin参与Wnt信号传导，是Wnt信号调节关键分子，介导Wnt信号从胞膜至胞浆进核的传递，促进基因转录，参与调控细胞增殖和分化，这些基因主要是一些与胚胎发育的基因，如非洲蟾蜍的siamois基因、twin基因对于非洲蟾蜍胚胎背腹轴的形成起重要作用，除此以外，果蝇的ultrabithoras基因，对于脏壁内胚层的分化起重要作用[8，9]。复习相关文献可以归纳出：β-catenin通过参与Wnt信号传导过程可能在胚胎发育中起作极其重要的作用。在此基础上，我们应用免疫组化的方法，检测胚胎停止发育患者及正常早孕患者绒毛滋养细胞中E钙连素（E-cadherin）及β-连环素（β-catenin）的表达，从而探讨E-cadherin