塞来昔布对胃癌细胞株sgc7901vcr多药耐药基因lrp gcs表达影响的分析-effect of celecoxib on expression of multidrug resistance gene lrp gcs in gastric cancer cell line sgc 7901 vcr.docxVIP

英文缩略词Abbrevation英文缩写英文全称中文全称MDRMultidrugResistance多药耐药LRPLungResistanceprotein肺耐药蛋白DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜GCGastriccarcinoma胃癌GCSGlucosylceramidesynthase葡萄糖神经酰胺合成酶MTT3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetra-zoliumromide3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐TopoⅡTopoisomerasⅡ拓扑异构酶ⅡP-gPP-glycoproteinP糖蛋白MRPMultidrugresistanceAssociatedprotein多药耐药相关蛋白ABCPATPbindingcassetteprotein,ATP结合盒蛋白BCRPBreastcancerresistanceprotein乳癌耐药蛋白COX-2Cyclooxygenase2环氧合酶2ELISAEnzyme-linkedmmunosorbentassay酶联免疫吸附测定PBSPhosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液ODOpticaldensity光密度值HEHematoxylineosinstain苏木素伊红染色SPSSStatisticalPackageforSocialScience社会科学统计软件包MGMTO6-methylguanine-DNAMethyltransferaseO6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶PKCProteinkinaseC蛋白激酶CAAArachidonicacid花生四烯酸PGH2ProstaglandinH2前列腺素H2AP-1Activatorprotein-1活化剂蛋白1VEGFVasculargedothelialgrowthFactor血管内皮细胞生长因子HLAHumanleucocyteantigen人白细胞抗原MVDMicrovesseldensity微血管密度MVPMajorvaultprotein穹窿体主要蛋白NPCNuclearporecomplex核孔复合物CDDPcis-Diaminedichloroplatinum顺铂COXIBscyclooxygenase-2Inhibitors选择性环氧合酶2抑制剂NSAIDsNonsteroidalanti-inflammatorydrugs非甾体消炎镇痛药塞来昔布对胃癌细胞株SGC-7901/VCR多药耐药基因LRP、GCS表达影响的研究中文摘要研究背景：化学治疗（Chemotherapy）是胃癌综合治疗的重要手段之一，但肿瘤细胞多药耐药（MultidrugResistance，MDR）限制了化疗药物的作用发挥。研究MDR的发生及影响机制，对指导临床合理化选择化疗药物有重要的意义。MDR的产生机制较为复杂，其中耐药基因的激活与表达增加，被认为是MDR的重要因素。肺耐药蛋白（lungresistanceprotein,LRP）与葡萄糖神经酰胺合成酶（glucosylceramidesynthase,GCS）是二种常见的多药耐药基因，在胃癌细胞株中均有较高表达，被认为是引起胃癌多药耐药的重要基因。有研究表明，环氧合酶2(cyclooxygenase2,COX-2)与LRP、GCS在胃癌组织中均有较高表达，并且COX-2与LRP、GCS在胃癌中的表达呈正相关性，而选择性COX-2抑制剂（cyclooxygenase2inhibitors,COXIBs）可以增加肿瘤对化疗药物的敏感性，其机制目前尚不清楚,可能与下调LRP、GCS等耐药基因的表达有关。本研究就是基于这一出发点而设计。目的：用选择性COX-2抑制剂塞来昔布（Celecoxib）干预胃癌细胞株生长，观察其对胃癌细胞株LRP、GCS二种耐药基因表达的影响，探讨COX-2参与胃癌多药耐药的机制，为临床使用COX-2抑制剂逆转胃癌耐药提供实验理论依据。方法：用选择性COX-2抑制剂塞来昔布干预胃癌细胞株（SGC7901/VCR）培养，同时不加任何干预措施培养SGC7901/VCR细胞株作为对照，采用MTT法检测不同剂量塞来昔布在不同的时间点对胃癌细胞株SGC7901/VCR生长的影响；采用免疫组化及ELISA方法检测塞来昔布在一定剂量范围内某一时间点对SGC7901/VCR细胞的GCS、LRP耐药基因表达的含量，并用方差分析及t检验等统计学方法进行分析，研究塞来昔布对胃癌细胞株耐药基因表达的影响。结果：1）塞来昔布对SGC7901/VCR人胃癌细胞增殖的影响用MTT法分别在24、48、72h测定不同浓度塞来昔布处理的胃癌细胞，12.5μmol/L塞来昔