沙苑子黄酮抗大鼠酒精性肝纤维化作用及其机制分析-anti - alcoholic liver fibrosis effect of flavonoids from semen astragali complanati and its mechanism analysis.docxVIP

沙苑子黄酮抗大鼠酒精性肝纤维化作用及其机制研究中文摘要 沙苑子黄酮抗大鼠酒精性肝纤维化作用及其机制研究 中文摘要 I I PAGE PAGE IV 沙苑子黄酮抗大鼠酒精性肝纤维化作用及其机制研究 中文摘要 目的：研究沙苑子黄酮（FAC）抗酒精性肝纤维化的作用以及其作用机制。 方法：（1）以酒精灌胃的方式建立大鼠酒精性肝纤维化模型，分别给予不同浓度 的 FAC（30 mg/kg、60 mg/kg、120 mg/kg），以扶正化瘀胶囊（FZHY）作为阳性对 照药。通过 HE，Masson 染色观察其病理改变；检测血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷 草转氨酶（AST）、透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅰ型前胶原蛋白（PC-Ⅰ）、 Ⅲ型前胶原蛋白（PC-Ⅲ）、Ⅳ型前胶原蛋白（PC-Ⅳ）、和转化生长因子 β1（TGF-β1） 含量；碱水解法检测肝组织中羟脯氨酸（Hyp）的含量；Western blot 检测肝脏组织中 α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。（2）建立大鼠肝星状细胞（HSCs-T6）活化的 体外模型。对酒精刺激人正常肝细胞（7702）条件培养液、脂多糖（LPS）刺激巨噬 细胞（RAW）条件培养液、TGF-β1、血小板衍生生长因子（PDGF）四种模型进行条 件优化筛选。在所选模型条件下，考察不同浓度 FAC（终浓度 25 μg/mL、50 μg/mL、 100 μg/mL）对活化状态下 HSCs-T6 增殖的影响；对 HA、LN、PC-Ⅲ合成的影响； 对 TGF-β1 细胞因子分泌的影响；对 TGF-β1 信号传导通路中 Smad3、Phospho-Smad3、 Smad7 蛋白分子表达的影响。 结果：（1）在大鼠酒精性肝纤维化模型中，FAC 可显著降低血清中 ALT、AST、 HA、LN、PC-Ⅰ、PC-Ⅲ、PC-Ⅳ、TGF-β1 的含量（P＜0.01），减少肝脏组织中 Hyp 以及 α-SMA 的表达（P＜0.01）。（2）在 7702 条件培养液模型、RAW 条件培养液模 型、TGF-β1 模型、PDGF 模型四种 HSCs-T6 活化的体外模型中，本实验分别选择正 常培养液：7702 条件培养液（9:1、24 h），正常培养液：RAW 条件培养液（9:1、24 h）， 2 ng/ml、48 h，10 ng/ml、48 h 为刺激条件。正常情况下，FAC 对静止状态的 HSCs-T6 的增殖无明显影响，但在四个模型中，FAC 均能显著抑制 HSCs-T6 的增殖（P＜0.01）， 降低上清液中 HA、LN、PC-Ⅲ的表达（P＜0.01），减少细胞因子 TGF-β1 的分泌（P ＜0.05 or P＜0.01）。此外，FAC 还可下调 Smad3 蛋白的磷酸化，上调 Smad7 蛋白的 合成。 中文摘要 沙苑子黄酮抗大鼠酒精性肝纤维化作用及其机制研究 结论：FAC 能减轻大鼠酒精性肝损伤和肝纤维化程度，其机制可能与抑制 HSCs 活化，抑制细胞因子 TGF-β1 等有关。 关键词：沙苑子；黄酮；肝纤维化；大鼠肝星状细胞（HSCs-T6）；TGF-β1； 作 者：张 倩 指导老师：刘春宇 Effect Effect of Flavonoids from Astragalus complanatus on Anti-alcoholic hepatic fibrosis in rats Abstract III III PAGE PAGE IV Effect of Flavonoids from Astragalus complanatus on Anti-alcoholic hepatic fibrosis in rats Abstract Objective：To research the effects of flavonoids of Astragalus complanatus（FAC） on alcoholic hepatic fibrosis and and reveal its pharmacological mechanism. Materials and methods：（1）FAC（30, 60, 120 mg/kg）was treated by gactric gavage once daily in alcoholic hepatic fibrosis rats. Alanine aminotransferase（ALT）and Aspartate aminotransferase（AST）were detected by Reitman-Frankel method; hydroxyproline（Hyp） in hepatic tissues was tested by alkal