妊娠期糖尿病对子代行为的影响及机制的初步分析-preliminary analysis of the influence and mechanism of gestational diabetes mellitus on offspring behavior.docxVIP

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妊娠期糖尿病对子代行为的影响及机制的初步分析-preliminary analysis of the influence and mechanism of gestational diabetes mellitus on offspring behavior

妊娠期糖尿病对子代行为的影响及机制的初步研究中文摘要目的:研究妊娠期糖尿病对子代行为的影响,并初步探讨其可能机制。方法:给予怀孕第三天大鼠尾静脉注射链脲佐菌素(STZ40mg/kg)建立大鼠妊娠期糖尿病(GDM)模型,给药后第3天测孕鼠空腹血糖,血糖大于11.1mmol/L则为造模成功者。一部分孕鼠正常生产,分别测子代2月龄、4月龄及10月龄的行为学指标,收取脑组织前额叶皮层(PFC)分别以WesternBlot法、qPCR法及免疫组织化学检测5-HT1A受体表达量变化;一部分孕鼠在孕21天开腹取胎鼠分别称量其脑重及体重以分析其相应的发育状态、检测发育相关的生物学指标;另一部分孕鼠第18天取胎鼠胎脑皮层培养神经元细胞,分别给25mM、50mM、100mM葡萄糖和50μM、125μM、250μMH2O2处理24小时后检测细胞活力;对原代神经元细胞给50mM葡萄糖、0.5mM维生素C处理,检测ROS产生量。结果:大鼠行为学测试结果显示,黑白箱实验中在10月龄ODM组黑箱所处时间较OCM组变长(P0.05)、穿梭次数减少(P0.05),2月龄和4月龄时黑箱所处时间与穿梭次数在两组之间并无显著差异(P0.05);旷场实验在4月龄和10月龄时ODM组较OCM组中间区域所待时间、运动路程以及10min内在测试箱运动总路程较OCM组减少(P0.05),而2月龄时两组并无显著差异(P0.05);高架十字迷宫实验中4月龄、10月龄时ODM组较OCM组进入开放臂的时间和次数都明显减少(P0.05),2月龄时ODM组较OCM组仅是进入开放臂的次数减少(P0.05)、进入开放臂的时间两组并无显著性差异(P0.05)。对孕21天胎鼠生长状态分析发现:GDM胎鼠体重和脑重都比正常对照组轻(P0.05)而脑重系数并无显著性差异(P0.05);GDM胎鼠发育相关生物因子胰岛素、BDNF表达量都下降(P0.05)。WesternBloting、qPCR及免疫组织化学结果显示在10月龄时ODM组脑前额叶皮层组织5-HT1A受体表达量较OCM组低。原代神经元细胞在50mM葡萄糖刺激后ROS的产生量明显比正常组大,而给与0.5mMVC后此明显改善,在25mM、50mM、100mM葡萄糖处理下,GDM胎鼠神经元死亡较对照组明显(P0.05);及250μMH2O2处理后GDM胎鼠神经元死亡较对I中文摘要妊娠期糖尿病对子代行为的影响及机制的初步研究照组明显(P0.05)而在50μM、125μMH2O2条件下GDM胎鼠神经元死亡与对照组无明显差异(P0.05)。结论:GDM成年子代表现出焦虑样症状,且症状随年龄增长趋于更为明显;这症状可能与GDM造成子代胎脑发育迟缓、5-HT系统失调及神经元对高糖和过氧化氢因素的抗干扰能力差有关。关键词:妊娠期糖尿病;子代;行为;脑作者:姜华凤指导老师:镇学初教授Effectofgestationaldiabetesmellitusonoffspring,snervoussystemAbstractAim:Toinvestigatetheeffectsofgestationaldiabetesmellitusonthefetalcentralnervoussystemandtheneurobehavioralchangesinadultrats.Methods:Experimentaldiabeticmodelratswereproducedbycaudaveininjectionofstreptozocin(40mg/kg)atthethirddayofpregnancy.SamenumberofcontrolpregnantratswereinjectedwithSodiumcitrate-HydrochloricacidBuffer.Offspringsofcontrolmothers(OCM)anddiabeticmothers(ODM)werehousedunderafixedcircadianrhythmwithfreeaccesstofoodandwateruntilvarioustestswereconducted.Threebehavioraltestswereperformedtomonitortheneurologicaldeficitsofratsattheageof2months,4monthsand10months.QuantitativePCR(qPCR)、westernblotingandimmunohistochemicalstainingwereusedtoassess5-HT1Acontentinprefrontalcortex(PFC).Primaryneuronswereobtainedfromth

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