沙利度胺对骨髓增生异常综合征细胞株hif-1α表达的影响-effect of thalidomide on hif - 1α expression in myelodysplastic syndrome cell line.docxVIP

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2018-07-30 发布于上海
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沙利度胺对骨髓增生异常综合征细胞株hif-1α表达的影响-effect of thalidomide on hif - 1α expression in myelodysplastic syndrome cell line

沙利度胺对骨髓增生异常综合征细胞株HIF-1α表达的影响中文摘要目的探讨氯化钴诱导的低氧环境下骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1HIF-1α及VEGF的表达情况，进而探讨其在骨髓增生异常综合征血管新生中的作用。低氧环境下，不同浓度沙利度胺对骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1HIF-1α、VEGF表达情况，探索其在骨髓增生异常综合征治疗中可能机制。方法(1)将处于对数生长期的MUTZ-1细胞分别给予不同浓度氯化钴处理4h、8h、12h、24h，用MTT法检测缺氧对细胞增殖的影响。(2)运用实时荧光定量PCR检测不同浓度氯化钴诱导MUTZ-1细胞缺氧不同时间HIF-1α、VEGF基因表达情况。(3)将处于对数生长期的MUTZ-1细胞给予氯化钴处理诱导缺氧后，予以不同浓度沙利度胺处理24h后，用MTT法检测缺氧状态下，沙利度胺对细胞增殖的影响。(4)运用实时荧光定量PCR检测氯化钴诱导MUTZ-1细胞缺氧环境下，不同浓度沙利度胺作用24h后HIF-1α、VEGF基因表达情况。结果(1)不同浓度氯化钴对MUTZ-1细胞影响不同，50μmmol/L氯化钴对细胞影响最小，随着浓度增加，抑制作用增强，各组之间均有显著的差异(P0.05)。随着作用时间延长，细胞存活率无明显改变。(2)不同浓度氯化钴诱导缺氧下HIF-1α、VEGFmRNA表达均比常氧下表达高，并具有显著差异(P0.05)。同一浓度不同时间HIF-1α、VEGFmRNA表达无明显差异(P0.05)。100μmol/L氯化钴组HIF-1α、VEGFmRNA表达均比50μmol/L氯化钴、150μmol/L氯化钴表达高。(3)缺氧下，沙利度胺可明显抑制细胞增殖，随给药浓度增加，细胞存活率逐渐降低，各组之间均有显著差异（P0.05)。(4)低氧环境下，不同浓度沙利度胺组HIF-1α、VEGFmRNA表达均比对照组表达明显降低，随着浓度增加，表达逐渐降低，各组之间均有显著的差异(P0.05)。结论(1)氯化钴模拟低氧环境下，MUTZ-1细胞生长受到抑制。(2)氯化钴模拟低氧环境下，MUTZ-1细胞HIF-1α、VEGF基因表达上调。(3)低氧环境下，沙利度胺作用后MUTZ-1细胞生长受到抑制。(4)低氧环境下，沙利度胺作用后MUTZ-1细胞HIF-1α、VEGF基因表达下调。关键词骨髓增生异常综合征，氯化钴，沙利度胺，MUTZ-1，HIF-1αEffectsofThalidomideonHIF-1αinMyelodysplasticSyndromeCellLineAbstractObjectiveToexaminetheexpressionchangeofHIF-1αandVEGFingenelevelsinMUTZ-1celllineunderchemicalhypoxiainducedbyCobaltchlorideinvitro，whichexploredtheroleinmyelodysplasticsyndromeangiogenesis．ToinvestigatetheeffectofdifferentconcentrationsofthalidomideontheexpressionchangeofHIF-1αandVEGFingenelevelsinMUTZ-1celllinunderhypoxicenvironment，whichexploreditspossiblemechanisminthetreatmentofmyelodysplasticsyndrome．Methods(1)DifferentconcentrationofCobaltchloridewasintervenedfor4hours、8hours、12hoursand24hours，culturetheMUTZ-1celllineinvitro．ProliferationofMUTZ-1cellsweretestedbyMTTanalysis．(2)AfterculturedinhypoxiaenvironmentinducedbyDifferentconcentrationofCobaltchloridefordifferenttimes，expressionofHIF-1αandVEGFgeneweretestedbyrealtimefluorescencequantitativereversetranscription-polymerasechainreaction．(3)Differentconcentrationofthalidomidewasintervenedfor24hours，culturetheMUTZ-1celllineinvitroforhypoxia．Prolifera