蛇葡萄素对人胃癌细胞pi3kaktp53信号传导通路作用机制-mechanism of ampelopsin on pi 3 kak tp 53 signaling pathway in human gastric cancer cells.docxVIP

英文缩略词英文缩写英文全称中文名称AAbsorbance光吸收值A260Absorbanceat260nm260nm波长处吸光值A280Absorbanceat280nm280nm波长处吸光值A375A375人黑色素瘤细胞AnnexinV-FITCAnnexinV-FITCApoptosisDetectionKitAnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒DEPCDiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙脂DMSODimethylSulfoxide二甲基亚砜EBEthidiumbromide溴乙锭IC5050%InhibitingConcentration半数抑制率LOVOLOVO人结肠癌细胞MCF-7MCF-7人乳腺癌细胞MTTMethylThiazolylTetrazolium四甲基噻唑兰mRNAMessageribonucleicacid信使核糖核酸PBSPhosptate-bufferedsaline磷酸盐缓冲液PIPropidiumIodide碘化丙啶ReverseRT-PCRTranscription-polymeraseChainReaction逆转录聚合酶链式反应RPMI-1640RNaseRPMI-1640RNAenzyme培养基RNA酶SKOV3SGC-7901SKOV3SGC-7901人卵巢癌细胞人胃腺癌细胞株TrypsinTrypsin胰蛋白酶TrypanBlueTrypanBlue台盼蓝TBETris-borate/EDTAbufferTris-硼酸缓冲液中文摘要目的：研究蛇葡萄素对人胃癌细胞PI3k/Akt/P53信号传导通路的调控作用。方法：采用MTT法评价蛇葡萄素对人胃癌细胞（SGC-7901）、人黑色素瘤细胞（A375）、人结肠癌细胞(LOVO)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、人卵巢癌细胞(SKOV3)等5种人恶性肿瘤细胞增殖的影响。流式细胞仪检测在蛇葡萄素干预下SGC-7901细胞凋亡水平及周期变化。采用RT-PCR技术测定蛇葡萄素对SGC-7901细胞PI3k/Akt/P53信号传导通路癌基因pI3k、akt、mdm2、bcl-2，抑癌基因bad、p53、p21、baxmRNA表达的影响。结果：MTT法结果表明，蛇葡萄素对SGC-7901、A375、LOVO、MCF-7、SKOV3等5种人恶性肿瘤细胞的增殖均有抑制作用，且呈剂量依赖关系，其中对SGC-7901的增殖抑制作用最强，IC50为37.96μg/ml。流式细胞仪检测结果显示，50μg/ml、75μg/ml浓度的蛇葡萄素作用于SGC-790148h后，可明显促进细胞早期凋亡，与空白对照组比较P0.05~0.01，呈剂量依赖关系；33.3μg/ml、50μg/ml、75μg/ml浓度的蛇葡萄素作用于SGC-7901细胞48h后，G1期细胞数逐渐增多，与空白对照组比较P0.05~0.01。22.2μg/ml、33.3μg/ml、50μg/ml浓度的蛇葡萄素作用于SGC-7901细胞48h后，对癌基因pI3k、akt、mdm2，抑癌基因bad的mRNA表达与空白对照组比较没有统计学意义（P＞0.05）。33.3μg/ml、50μg/ml浓度的蛇葡萄素作用于SGC-790148h后，均可明显上调抑癌基因p53、p21、baxmRNA的表达，与空白对照组比较P0.05~0.01，而22.2μg/ml、33.3μg/ml、50μg/ml浓度时均可显著下调癌基因bcl-2mRNA的表达，与空白对照组比较P0.01。结论：蛇葡萄素对SGC-7901、A375、LOVO、MCF-7、SKOV3等5种人恶性肿瘤细胞的增殖均有明显抑制作用，其中对SGC-7901的增殖抑制作用最强；并能诱导SGC-7901细胞凋亡使细胞周期阻滞在G1期。其抗肿瘤机制与上调PI3k/Akt/P53信号传导通路中的抑癌基因p53、p21、bax和下调癌基因bcl-2mRNA的表达有关。关键词蛇葡萄素；SGC-7901；PI3k/Akt/P53信号通路ResearchoftheregulatingactionofAmpelopsinonPI3k/Akt/P53signalingpathwayofhumangastriccancerAbstractObjective:TostudytheregulatoryeffectsofAmpelopsinonhumangastriccarcinomacellofPI3k/Akt/P53signaltransductionpathways.Methods:MTTassaywasemployedtodeterminetheanti-tumoreffectofampelopsinon5kinds(SGC-7901,A375,LOVO,MC