神经激肽a对大鼠深ⅱ度烧伤创面愈合影响及其机制探讨-effect of neurokinin a on wound healing of deep second degree burn in rats and its mechanism.docxVIP

万方数据 万方数据 神经激肽 A 对大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合的影响及其机 制的探讨 摘要 研究背景 皮肤组织作为人身体上的最大的器官，其对于神经具有非常高的敏感性，皮 肤组织的许多的生理功能如皮肤创面修复，身体体温调节，免疫功能以及代谢功 能，都和神经支配有着很密切的关系。皮肤组织中的神经作为人机体周围神经系 统的一部分，其来源于背根神经节中的神经元。皮肤组织中包括了表皮，真皮， 皮肤附属结构，血管，神经系统以及皮下脂肪层，它们都和神经支配有着很密切 的关系。皮肤组织可以表达分泌多种类型的神经肽，它们既可以有来自其它皮肤 细胞例如血管内皮细胞，成纤维细胞以及角质形成细胞，也可以来自于感觉神经 元，其中，感觉神经元是其最主要的分泌表达方式。通常所说，表皮内的神经包 含了神经激肽 A，P 物质以及 CGRP，而真皮内的神经则包含了神经激肽 A，P 物质，CGRP 以及 VIP。随着对皮肤免疫相关疾病的研究，人们发现神经和神经 肽也都参与了炎症反应—神经源性炎症反应（inflammation-cutaneous neurogenic inflammation）。 当皮肤组织损伤时，如果失去神经支配，皮肤组织创面愈合将会出现明显的 延迟，表明周围神经释放的感觉神经肽与创面愈合有着密切的关系。皮肤组织创 面中的神经肽可以促进细胞组织释放多种类型的细胞因子，从而引起神经生长因 子的分泌，从而可以促进创面皮肤神经纤维的生长。皮肤创面修复愈合时，支配 受损伤组织的周围神经可以通过分泌释放包括神经肽在内的多种介质参与创面 愈合的调控过程，而神经肽在神经系统和受损伤组织间起着非常重要的信号介导 作用。 神经激肽 A（Neurokinin A，NKA），又名为 K 物质（Substance K）或者神 经介质 L（Neuromedin L），作为一种神经速激肽，其广泛分布于机体的中枢神 经系统和周围神经系统中，在创面修复愈合的过程中发挥着非常重要的作用。神 经激肽 A 和 神 经 肽 P 物质 （ SP ） 有 着 共 同 的 前 体 —— 前 速 激 肽 原 （pre-protachykinin，PPT），其由来自编码 P 物质的共同的 TAC1 基因编码生成。 5 神经激肽 A 和 P 物质在机体中枢神经系统中的分布区域内高度重合[1]，而在外周 神经系统中，两者主要分布在对辣椒素比较敏感的感觉神经内[2]。神经激肽 A 不 仅可以参与对创面外周神经的修复，而且还对创面修复愈合中的多种炎性细胞 （中性粒细胞，巨噬细胞以及淋巴细胞等）和多种细胞因子（IL-6，IL-1，TNF- α，TGF-α等）的调控产生作用，同时还对成纤维细胞，血管内皮细胞的迁移， 分化，增殖产生影响，从而对创面修复愈合产生作用。本研究将对神经激肽 A 对创面愈合的影响进行初步探讨。 研究方法 建立大鼠深Ⅱ度烧伤创面模型。随机分为 A，B 两组，每组 36 只。A 组大 鼠创面局部注射神经激肽 A，B 组大鼠创面局部用注射等量磷酸盐缓冲液（PBS） 作为对照，于伤后即刻和伤后 1，3，7，10，14 天不同时相点，测量并计算大鼠 的创面愈合率，并作统计学分析；取不同时相点的创面组织切片作免疫荧光细胞 化学染色和免疫酶细胞化学染色，结合计算机图像分析，比较创面新生血管数， 巨噬细胞数，中性粒细胞数，并作统计学分析；测定创面皮肤组织羟脯氨酸（HYP） 含量，并作统计学分析；对不同时相点的创面组织，作转化生长因子-α（TGF-α）， IL-1，IL-6 和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度测定，并作统计学分析。 研究结果 1. 从伤后 7d 起，A 组各时相点创面愈合率都要明显高于 B 组。在伤后 14d， A 组创面已经基本全部再上皮化，而 B 组大鼠创面的愈合率只达到 85.12±3.14%。 2. 从伤后 7d 起，A 组创面新生血管化程度与 B 组相比，均有明显增加。 3. 从伤后 1d 起，A 组与 B 组大鼠的羟脯氨酸含量均有所下降，而随着大 鼠创面的逐渐修复愈合，创面的羟脯氨酸含量持续上升。A 组在伤后 7d 起各时 相点羟脯氨酸含量均较 B 组明显增加。 4. 从伤后 3d 起，A 组和 B 组大鼠创面内中性粒细胞含量均达到峰值，A 组创面早期炎症细胞（中性粒细胞）浸润量较 B 组相比，有明显增加。在创面 愈合后期，B 组创面内中性粒细胞持续存在。 5. 从伤后 7d 起，A 组和 B 组创面内巨噬细胞含量均达到峰值，A 组创面 6 早期炎症细胞（巨噬细胞）浸润量较 B 组相比，有明显增加。在创面愈合后期， B 组创面内巨噬细胞持续存在。 6. A 组创面 TGF-α，IL-1，IL-6 和 TNF-α 浓度在一开始就比 B 组浓度高， 在第 3 天时达