实验性自身免疫性肝炎小鼠脾脏cd4+t细胞上cd137的表达及其意义-expression and significance of cd 137 on cd4 + t cells in spleen of mice with experimental autoimmune hepatitis.docxVIP

中文摘要目的建立自身免疫性肝炎小鼠模型，研究CD137分子在实验性自身免疫性肝炎小鼠脾脏CD4+T细胞上的表达及其意义。方法采用易感动物C57BL/6小鼠，在第1天和第7天分别以新鲜制备的S-100肝抗原0.5ml与等体积的弗氏完全佐剂充分乳化后予腹腔注射，建立自身免疫性肝炎小鼠动物模型。于造模后第4周处死小鼠，取外周血和肝组织，进行血生化检查和常规病理学检查，免疫荧光法检测血清中的抗平滑肌抗体（SMA）、抗核抗体（ANA）。使用流式细胞术检测小鼠脾脏CD4+T细胞上CD137的表达，ELISA实验检测脾脏T淋巴细胞培养上清液中IL-17的浓度。结果第4周后模型组小鼠较对照组外周血血清中ALT、AST、球蛋白水平明显升高[ALT：(80.70±18.74)U/L比(52.60±18.98)U/L；AST：(326.76±68.80)U/L比(244.99±51.56)U/L；球蛋白：(43.06±10.18)g/L比(34.00±6.90)g/L，P均＜0.05]，白蛋白水平较对照组降低[(24.47±3.18)g/L比(28.16±4.83)g/L，P＜0.05]，肝脏病理组织学可见汇管区和肝实质界面的炎症，免疫荧光法可见血清中抗核抗体表达。流式细胞术检测结果显示活化前模型组小鼠CD4+T细胞上CD137的表达明显高于正常对照组[(7.38±2.29)%比(3.41±1.22)%，P＜0.05；]，且经抗CD3单抗刺激后模型组CD137的表达较对照组增高显著[(31.94±10.15)%比(11.02±1.29)%，P＜0.05]。ELISA实验检测结果示模型组T细胞培养上清液中IL-17水平高于对照组[(9.73±1.91)pg/ml比(3.05±2.00)pg/ml，P﹤0.05]，经抗CD3单抗刺激后模型组IL-17水平较对照组显著增高，有明显的统计学差异[(38.60±17.51)pg/ml比(8.81±5.74)pg/ml，P﹤0.05]。结论实验性自身免疫性肝炎小鼠脾脏CD4+T细胞上CD137高表达，且与促炎因子IL-17的产生可能有一定的关联。【关键词】自身免疫性肝炎；CD137；T细胞英文摘要ObjectiveToinvestigatetheexpressionandroleofCD137onCD4+Tcellofspleeninmurineexperimentalautoimmunehepatitis.MethodsToinducetheEAHmodel,thesyngeneicS-100antigenemulsifiedincompleteFreud’sadjuvantwasinjectedintraperitoneallytoC57BL/6atday1andday7.Laboratoryexaminationandhistopathologicexaminationsweredetectedattheforthweek.Autoantibodiesweredetectedwithimmunofluorescence.TheexpressionofCD137inspleenCD4+Tlymphocytesweredetectedbyfiowcytometry.ThelevelofIL-17weredetectedbyELISA.ResultsEAHmodelwasestablishedbyusingsyngeneicS-100antigenandCFAintraperitoneallytwice.ThelevelofALT、ASTandGlobulinwerehigher[ALT：(80.70±18.74)U/Lvs(52.60±18.98)U/L；AST：(326.76±68.80)U/Lvs(244.99±51.56)U/L；Globulin：(43.06±10.18)g/Lvs(34.00±6.90)g/L，P＜0.05],thelevelofAlbuminwerelower[(24.47±3.18)g/Lvs(28.16±4.83)g/L，P＜0.05],thanthatofnormalcontrol.Interfacehepatitiswasthemainhistologicchange.Antinuclearantibodywerefound.TheexpressionofCD137onspleenCD4+Tlymphocytesweresignificantlyhigherthanthatofnormalcontrol[(7.38±2.29)%vs(3.41±1.22)%，P＜].ThereweremoreexpressionofCD137onCD4+Tlymphocytesstimula