第一章 前言 1.1 研究缘起.PDFVIP

第一章 前言 1.1 研究緣起研究緣起 研究緣起研究緣起 都市及農業活動所產生含有 纖維的廢棄物數量相當可觀 ，目 前常用掩埋法和焚化法來處理這些廢棄物 ，而掩埋法伴隨有佔地 面積廣和臭味 等問題 ，焚化法則會大量產生CO2 等溫室氣體 ，且 這些纖維廢棄物中常含較高之水份 ，造成燃燒不完全，易產生一 些有害的氣體如 CO及懸浮微粒等物質 。故近年來有許多的學者 提出 ，可利用厭氧微生物轉化的方法，將這些纖維廢棄物轉變成 生質能源 ，如甲烷或乙醇 等再生能源 ，此種生物轉化方法可以有 效的減少這些固體廢棄物的污染並產生各種不同的生質能 ( Romana and Rajoka, 2000 ) 。 厭氧環境下 纖維素的分解 ，會先被水解菌群產生纖維水解酵 素，水解成醣類 ，再由酸生成菌群進行醱酵作用，產生揮發性脂 肪酸 (Volatile Fatty Acid, VFA ) ，這些揮發性脂肪酸再由甲烷生成 菌群利用 ，形成最終產物甲烷(Irene and Banks, 2005) 。 使用高溫降解纖維主要是由於在醱酵過程中，其核心的溫度 可高逹 45-55℃，甚至更高的溫度 。且在高溫下可提高基質的溶解 度。耐熱性 纖維水解酵素在高溫下熱穩度性高 ，生化反應速率較 中溫酵素快 。另一原因則是在高溫醱酵下致病菌不易生存 ，可減 1 低並抑制有害病菌 ，故使用高溫降解纖維素廢棄物是一種理想的 處理方式 。 為了解纖維素的降解菌群及甲烷生成菌群這兩種族群在生物 反應中 對於彼此的影響 ，必需有效的觀察 掌握菌群之間的變化 。 在過去傳統微生物菌群的研究方 法中 ，主要是利用顯微鏡觀察細 胞形態或是使用培養方 式，但此種方法對於一些複雜的菌相和不 容易被培養出的菌群難以有效的區別或鑑定 。隨著分子生物技術 的發展 ，利用16S rRNA gene做為分類之依據 ，可以改善傳統培 養方式對菌種具有選擇性的缺點 。故本研究擬利用分子生物技術 方式探討菌群的結構 。 目前國際上有許多針對甲烷生成菌的研究 ，這些研究所分離 出的甲烷菌生長的最佳溫度大都處於中溫菌的生長溫度範圍 (20-45℃) ，而嗜熱性(50-98℃甲烷菌) 株相對而言較少 。因此本研 究期望由嗜熱纖維降解產甲烷之菌群中 分離出嗜熱性的甲烷生成 菌，以利未來對嗜熱性甲烷菌 作進一步的研究 。 1.2 研究目的研究目的 研究目的研究目的 微生物分解作用有如一個黑盒子 ，一般要了解這些菌群在分 解過程中所扮演的角色 ，使用一般傳統培養方法，相當耗時且不 一定完整了解這些菌群在不同分解階段的變化，因此本研究使用 2 PCR-DGGE 方法來探討一混合菌群中真細菌與古細菌之族群種 類。此外 ，本研究的菌群來源為嗜熱纖維降解產甲烷批次系統， 目前所知嗜熱性甲烷菌種類並不多見 ，成功分離僅有20 株，故 也以此作更進一步研究 。本研究目的包含： 1. 以變性梯度凝膠電泳(Denature Gradient Gel Electrophoresis, DGGE)分析菌相變化 ，並利用分子生物技術將所得之16S rDNA 核酸片段定序探討菌群親源關係 。 2. 嘗試由嗜熱纖維降解產甲烷批次系統中 ，分離嗜熱性甲烷菌 株並加以鑑定及探討其生長參數 。 3