胃腺癌组织中p57kip2 limk-1的表达及与肿瘤血管 淋巴管生成的关系-expression of p 57 kip 2 limk - 1 in gastric adenocarcinoma and its relationship with lymphangiogenesis of tumor vessels.docxVIP

胃腺癌组织中p57kip2、LIMK-1的表达及与肿瘤血管、淋巴管生成的关系专业：病理学研究生：王龙导师：于燕妮教授贺晓燕副教授【摘要】目的：研究p57kip2、LIMK-1在胃腺癌组织中的表达，并分析其与胃腺癌相关临床病理指标、肿瘤血管、淋巴管生成的关系；同时研究p57kip2、LIMK-1在胃腺癌浸润转移机制中的作用。方法：应用免疫组化Envision两步法检测40例胃腺癌组织中p57kip2蛋白和LIMK-1蛋白的表达；采用地高辛标记的寡核苷酸探针进行原位杂交以检测p57kip2mRNA、LIMK-1mRNA在胃腺癌组织中的表达，分析p57kip2、LIMK-1的表达水平与临床病理因素及肿瘤转移的关系。结果：（1）胃腺癌组织中p57kip2的表达水平低于切缘正常胃粘膜组织中的表达，差异具有统计学意义(P0.05)；（2）胃腺癌组织中p57kip2的表达与胃腺癌的组织学分级呈负相关(P0.05)，且与临床分期、年龄、肿瘤大小及肿瘤浸润转移无相关性(P0.05)；（3）与正常胃粘膜组织定位于细胞核不同，胃腺癌组织中p57kip2蛋白同时定位于细胞核和细胞浆；（4）胃腺癌组织中，LIMK-1的表达水平高于切缘正常胃粘膜组织中的表达，其差异具有统计学意义(P0.05)；（5）p57kip2、LIMK-1表达水平与胃腺癌组织中微脉管计数LVD、MVD呈正相关(P0.05)。结论：（1）胃腺癌组织中p57kip2的表达水平与胃腺癌的组织学分化程度呈负相关，提示p57kip2可作为预测胃腺癌临床预后的一个指标；（2）胃腺癌组织中p57kip2与LIMK-1在蛋白水平上的表达可能存在相互调节关系；（3）胃腺癌组织中p57kip2、LIMK-1通过参与微脉管的生成进而促进胃腺癌的浸润和转移。【关键词】胃腺癌；癌基因，p57kip2；癌基因，LIMK-1；肿瘤转移；免疫组织化学；原位杂交前言胃腺癌是人体中最常见的恶性肿瘤之一，在世界上属高发之列，尤其在我国，其发病率和病死率在恶性肿瘤中居首位[1]。胃腺癌在临床上呈现转移率高和死亡率高、早期诊断率低、5年生存率低的特点，是当今治疗的难点。胃腺癌细胞的浸润和转移是胃腺癌患者预后及术后生存率低主要因素，涉及许多基因及产物的改变，其中p57kip2基因、LIMK-1基因及产物在Rho-ROCK-LIMK-cofilin通路中的作用机制是目前研究的一个热点，尤其癌细胞运动和癌浸润转移的具体机制尚未查明。寻找相关基因及其产物表达变化和功能加深我们对胃腺癌浸润、转移的调控机制的理解和认识，同时也为胃腺癌的早期诊断和治疗提供理论依据。p57kip2基因是新近发现的CDKIs家族成员之一，为依赖cyclin激酶抑制剂的肿瘤抑制基因，其定位于11P15.5[2]。p57kip2基因在胃腺癌发病及转移中起重要作用的一个基因，其完整性和稳定性对保证细胞正常生长分化及抑制细胞恶化转化等方面具有非常重要的作用。并且p57kip2对与胃腺癌转移相关的Rho-ROCK-LIMK-cofilin通路具有重要的调控作用，进而对胃腺癌的转移中起到调节作用。p57kip2蛋白的异常表达可导致明显的肌动蛋白丝的重组和LIMK-1易位，最终影响细胞骨架动力学成熟[3]。LIMK-1蛋白属于一种丝氨酸/苏氨酸激酶，在机体中广泛存在，可在细胞核与细胞质之间穿梭，在细胞质中其作用主要是通过调节cofilin家族蛋白的活性参与激活细胞骨架的重组，从而对细胞形态、运动、黏附以及迁移产生影响[4]。p57kip2蛋白与肌动蛋白细胞骨架修饰酶LIMK-1这种相互作用增强了LIMK-1活性，其激活独立Rho相关激酶，导致cofilin磷酸化增加并导致肌动蛋白解聚失活。Rho-ROCK-LIMK-cofilin通路是肿瘤主要的转移相关信号通路之一5。p57kip2蛋白对肌动蛋白的调节是通过结合从细胞核转运到细胞质中的LIMK-1蛋白肌动蛋白来实现的，从而造成肌动蛋白纤维的重组，cofilin是与之密切相关的蛋白质，而肌动蛋白解聚因子是与肌动蛋白细胞骨架运动和动力的关键调节相关。cofilin是由LIMK-1蛋白灭活催化磷酸化和SSH的催化下重新去磷酸化[6]。在p57kip2蛋白的中部区域有一重要独特的功能，可以与CDK抑制剂相互作用，与LIMK-1的N端区域的交流调节细胞肌动蛋白的结构形态和功能。因此LIMK-1是连接细胞外信号刺激和改变细胞骨架结构信号传导网络的一个关键成分，也是影响癌细胞转移的重要因子[7]。在Rho-ROCK-LIMK-cofilin通路中，LIMK-1蛋白也是目前唯一可使cofilin发生磷酸化的激酶，而cofilin是唯一已知LIMK-1蛋白下游的效应物，LIMK-1蛋白对cofilin蛋白磷酸化与去磷酸化间的平衡进行微调