维生素d受体基因多态性与血铅相关性分析-correlation analysis between vitamin d receptor gene polymorphism and blood lead level.docxVIP

英文缩写 英文缩写 PAGE PAGE 1 英文缩写 英文缩写 英文全称 中文名称 ABI applied biosystems 美国应用生物系统公司 bp Base pair 碱基对 95%CI 95%confidence interval 95%置信区间 ddH2O DNA Two distilled water Deoxyribonucleic acid 双蒸水 脱氧核糖核酸 EDTA Ethylene amine tetraacetic acid 乙二胺四乙酸 HWE Hardy-Weinbery equilibrium 哈迪-温伯格平衡 LD linkage disequilibrium 连锁不平衡 mRNA messenger RNA 信使核糖核酸 OD Optical density 光密度 OR odds ratio 比值比 PBS Phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 PCR polymerase chain reaction 多聚酶链反应 rpm Revolution per minute 每分钟转数 Tris Tris-hydroxymethyl-amionmethane 三羟甲基氨基甲烷 VDR Vitamin D receptor 维生素 D 受体 VDRE Vitamin D response elements 维生素 D 反应元件 SNPs single nucleotide polymorphism 单核苷酸多态性 广州医科大学硕士学位论文 广州医科大学硕士学位论文 维生素 D 受体基因多态性与血铅相关性研究 中文摘要 研究背景 随着分子生物的发展，近年来国内外学者对维生素 D 受体（VDR）基因多 态性展开了广泛的研究。VDR 是介导 1,25-(OH)2D3 发挥生物效应的核内生物大 分子，为类固醇激素，与 1,25-(OH)2D 结合后形成激素-受体复合物，再与视黄醛 x 受体形成二聚体，最后与维生素 D 反应元件（VDRE）结合，对靶基因进行调 控，进而实现其生物学功能，调节体内的钙磷代谢。铅和钙有相似的转运机制和 蛋白质结合位点，铅和钙在体内的代谢途径几乎一致，铅在吸收、转运和沉积于 骨组织中各个环节都与钙竞争结合，钙和铅在机体内相互作用、干扰甚至竞争， 铅中毒的过程是铅干扰了体内钙的动态平衡。众多研究表明 VDR 基因型与血钙 浓度和骨钙的含量相关。因此，理论上推测 VDR 基因多态性可能会影响机体铅 负荷和毒性。铅在自然界中广泛存在，成人在血铅浓度50-60μg/dL 时，可导致 神经系统、血液系统、消化系统、泌尿系统、心血管系统、生殖系统等的损害。 VDR 基因至少有 25 种多态性，其中可能与铅易感性相关的 VDR 基因有 BsmI、 ApaI，但其研究结论非常不一致，有些甚至相矛盾，并且在国内尚未有全面的 VDR 基因多态性与血铅易感性相关研究。基于此，本研究从 VDR 基因多态性出 发，选取 VDR 基因多态性与血铅相关性为研究。 研究目的 探讨 VDR 基因多态性与血铅易感性相关性，分析 VDR 基因型、等位基因型、 组合基因型对铅作业者血铅水平的影响，从分子生物学机制揭示 VDR 基因多态 性与血铅水平的相关性，为进一步研究 VDR 基因多态性在铅、钙竞争中的作用 提供理论依据；丰富 VDR 基因多态性。 研究对象与方法 本研究选取铅作业专项体检中 387 名暴露于相同作业环境的铅作业工人为 研究对象，按照统一标准纳入研究：根据《中华人民共和国国家职业卫生标准》 中《职业性慢性铅中毒诊断标准》（GBZ37-2002），以血铅＜1.9μmol/L 者，为 血铅正常组；血铅≥1.9μmol/L 者，为血铅异常组。铅作业者环境监测根据《工 中文摘要 中文摘要 作场所空气中有害物质监测的采样规范》（GBZl59-2004）和《工作场所空气中 铅及其化合物的测定方法》（GBZ/T 160.10-2004）确定高暴露铅作业环境。通 过分析 GeneBank dbSNP 数据库和 NCBI 联合美国国家人类基因组研究所报道， 及国内外 VDR 基因多态性与铅易感性相关性研究，筛选并选取 VDRBsmI （rs1544410）、Tru9I(rs757343) 、ApaI（rs7975232）三个多态位点为候选 SNP。 血铅测定采用 WS /T20—1996 石墨炉原子吸收光谱测定法；人血 DNA 提取采用 天根公司试剂盒提取 DNA，并使用紫外分光光度计检测 DNA 的纯度；使用 TaqMan 探针法检测 VDR 3 个单核苷酸多态性（SNPs）位点多态性的基因型、 等位基因，使用相配对的软件，进行基因型的计算和构建，并探索其与铅易感性 的关