细辛不同配伍对其主要化学成分的影响分析-analysis of the influence of different compatibility of asarum on its main chemical constituents.docxVIP

4 结论 47 5 讨论 48 二、 细辛不同煎煮时间对其挥发油主要成分的影响研究 48 1 仪器与试药 48 1.1 仪器 48 1.2 试剂与试药 48 2 实验方法与结果 49 2.1 细辛不同煎煮时间样品制备 49 2.2 细辛挥发油的提取： 49 3 样品测定 49 4 总结与讨论 50 第二节 细辛不同配伍及煎煮时间对其煎煮液主要成分的影响研究 51 一、 细辛不同配伍对煎煮液中马兜铃酸影响研究 51 1 仪器与试药 51 1.1 仪器 51 1.2 试剂与试药 51 2 高效液相色谱条件 52 3 样品溶液的制备 52 4 结果 53 5 讨论与结论 54 二、 细辛不同煎煮时间对煎煮液中马兜铃酸影响研究 54 1.仪器与试药 54 1.1 仪器 54 1.2 试剂与试药 55 2 高效液相色谱条件 55 3 含量测定方法学考察 55 4 提取方法的考察 56 4.1 样品溶液的制备 56 4.2 细辛及其配伍煎煮液制备 56 5 结果 56 6 讨论与结论 57 总结 59 参考文献 62 综 述 64 攻读学位期间发表的学术论文目录 72 作者声明 73 个人简历 74 PAGE PAGE 10 中 文 摘 要 目 的： 研究建立细辛及其配伍后挥发油中主要成分甲基丁香酚 的 GC-MS 含量测定方法及细辛及其不同配伍后其毒性成分马兜铃酸 的 HPLC-UV 含量测定法。通过建立细辛主要有效成分及有毒成分的 含量测定法并测定其含量，为细辛品质评价提供依据。通过测定细辛 配伍前后及不同煎煮时间主要有效成分及有毒成分的含量变化，探讨 细辛配伍规律及临床药用规律，为细辛药材的合理应用及临床应用的 安全有效运用提供实验基础及依据。 方 法： （1）挥发油提取法参照《中华人民共和国药典》2010 年 版一部附录 XD 挥发油测定法项下规定的方法，提取细辛及其配伍 中药的挥发油。气相色谱分析条件为：HP-5MS 弹性石英毛细管色谱 柱(30 m ×0.25 mm×0.25μm) ；载气 He(≥99.9%)；柱流量（1.0ml/min）； 进样口温度 250℃；分流比 50∶1；气化温度 250 ℃；进样量 1μl； 溶剂延迟 3.0min；程序升温记录：柱温 80℃保持 3min，以 5℃/m in 升 至 120℃保持 3min, 再以 5℃/m in 升至 160 ℃保持 5m in。 质谱条件 :电离方式 E I(70 eV )；离子源温度 230℃；检测器温度 280℃；谱库检索 NIST08；质量扫描范围 50 amu～550 amu；四级杆 150℃。（2）反相高效液相色谱法测定细辛及其配伍煎煮液中马兜铃 酸的含量采用有机溶剂萃取法法制备供试品溶液，其色谱分析条件 为：色谱柱为 Agilent Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 柱(250 mm×4.6 mm,5μm)；流动相为乙腈-0.1%冰乙酸梯度洗脱；流速 1.0mL/min；柱温为 25℃；检测器为紫外检测器；检测波长为 250nm。 结 果： （1）本研究建立了细辛及其配伍后挥发油中主要成分 甲基丁香酚的 GC-MS 含量测定方法及细辛及其不同配伍后其毒性成 分马兜铃酸的 HPLC-UV 含量测定法，实验结果表明，所建立的方法 准确快速，重复性好，可用于准确测定细辛及其不同配伍后甲基丁香 酚和马兜铃酸的含量。（2）本研究结果表明：不同产地细辛挥发油中 的甲基丁香酚含量存在较大差异，其含量在 0.1758g/ml～0.3796g/ml 范围内。细辛经不同配伍后，其有效成分甲基丁香酚均有不同程度变 化，其中细辛配伍甘草后毒效比最低。细辛经过不同煎煮时间对其挥 发油影响表现为，煎煮时间越长挥发油损失越大，其中有毒成分黄樟 醚含量下降明显，有效成分甲基丁香酚损失较少。（3）不同产地细辛 煎煮液中马兜铃酸含量存在较大差异，其含量在 0～2.960μg/ml 范围 内；不同配伍后煎煮液马兜铃酸也有较大变化，其中配伍甘草后马兜 铃酸降低最多。细辛不同煎煮时间对其煎煮液中马兜铃酸影响表现 为，细辛经过长时间煎煮后，马兜铃酸下降，煎煮液中毒性下降。 结 论：本研究建立的用于测定细辛挥发油中甲基丁香酚含量的 GC-MS 法和测定细辛中毒性成分马兜铃酸含量的 HPLC-UV 法具有 较强的针对性和准确性；研究结果为合理评价细辛品质提供了实验方 法和依据。通过研究细辛配伍前后主要有效成分和有毒成分的含量变 化，为细辛药材的合理应用，揭示其配伍规律及临床应用的安全有效 提供了实验