通脉醒脑滴丸入血成分分析及透血脑屏障分析-analysis of blood components and blood-brain barrier of tongmai xingnao dripping pills.docxVIP

成都中医药大学硕士学位论文 成都中医药大学硕士学位论文 摘 要 随着社会生活方式的改变以及人口老龄化，心脑血管疾病已是威胁人类健康 的最大疾病之一。中医的整体观和辨证论治、中药及其复方的化学成分复杂性 和作用机制多样性，使中药及其复方在缺血性脑中风的治疗上有独到之处。 通脉醒脑滴丸（简称CD）是以灯盏细辛有效部位、川芎有效部位等研制而 成的治疗缺血性脑中风的创新中药。但是，由于其药效物质基础不清楚，使质量 控制上存在一定的问题。 目的： 本文以吸收、分布、代谢为切入点，阐释通脉醒脑滴丸治疗缺血性脑中风的 药效物质基础。 方法： 1 采用HPLC梯度洗脱法进行了通脉醒脑滴丸入血成分分析，在此基础上以 主要入血成分为指标，进行了通脉醒脑滴丸药物动力学研究，采用DAS2.1.1统计 软件拟合药物动力学参数。 2 采用MTT微量自动比色法，研究了野黄芩苷及川芎有效部位对体外培养 大脑皮层神经细胞存活率的影响。 3 采用脑微血管内皮细胞与星形胶质细胞共培养模拟血脑屏障的方法，进行 了透血脑屏障化学成分研究。 结果： 1 大鼠灌胃给药后，主要入血成分为野黄芩苷，药时曲线呈现二室开放模型， T1/2为2.925±0.706 h，Tmax为4.400±0.548 h，Cmax为0.638±0.260 mg·L-1，AUC(0-18h) 为4.528±2.18 mg·L-1·h，CL/F为3.140±1.910 L·h-1·kg-1，V1/F为1.404±1.306 L·kg -1， MRT(0-18h)为7.187±1.055 h。 2 与空白对照组比较，野黄芩苷仅在较高浓度时能促进细胞体外存活 （P0.01），而川芎有效部位较低浓度时能明显促进细胞存活（P0.01），证明川 芎有效部位及通脉醒脑滴丸中藁本内酯能透过血脑屏障，进入脑组织，起到脑神 课题来源：国家自然科学基金项目 基于钙信号通路调节的中药脑靶向神经保护有效成分筛选方法研究 、四川省科技厅攻关项目 创新中药新药的研究开发－川灯醒脑滴丸治疗缺血性中 风创新药物研究(2006z08-074) 1 PAGE PAGE 2 经保护的作用 3 藁本内酯能透过体外培养血脑屏障模型，野黄芩苷不能透过，并且复方中 藁本内酯的透过率，比单独使用川芎有效部位，藁本内酯透过率提高了近40％， 提示复方配伍应用后，可能促进了血脑屏障开放，提高了藁本内酯的透过率， 结论： 本文通过对通脉醒脑滴丸入血成分分析及透血脑屏障研究，揭示了通脉醒脑 滴丸药物动力学性质，初步阐释了通脉醒脑滴丸治疗缺血性脑中风的药效物质基 础，为制定科学合理的质量控制标准奠定了科学的理论基础。 创新性： 本文采用脑微血管内皮细胞与星形胶质细胞共培养模拟体外培养血脑屏障 的方法，预测通脉醒脑滴丸有效成分能否透过血脑屏障，建立了有效、快速筛选 中药中具有透血脑屏障的化学成分的方法，有助于揭示中药及其复方治疗缺血性 脑中风的药效物质基础及作用机制。 关键词：通脉醒脑滴丸；缺血性脑中风；野黄芩苷；藁本内酯；入血成分； 血脑屏障；药效物质基础 Abstract As society lifestyle changes and population ageing, cardiovascular and cerebrovascular diseases have become one of the biggest threats to human health. Because of the overall concept, determination of treatment based in pathogenesis of TCM, the complexity of the chemistry components of traditional Chinese medicine and compounds and the diversity of mechanisms, the therapy of ischemic stroke has its own character. Tongmai Xingnao dripping pills(CD) consists of scutellarin, Chuanxiong volatile and other constituents, as a innovative Chinese medicine of the treatment of ischemic stroke. However, because of the indistinctness of its effective substances, the quality control has so