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q蓄配方颗粒HPLC指纹图谱研究 　　摘 要：目的是采用HPLC法建立?q蓄配方颗粒的指纹图谱分析方法。采用HPLC法，以Megres5-C18（Hanbon，250 mm× 4.6 mm，5 μm）为色谱柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱；检测波长为0～15 min，260 nm，15～65 min，350 nm；流速为1.0 mL/min，柱温为30 ℃。结果表明，构建的指纹图谱共有7个共有峰，各批次?q蓄配方颗粒样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均在0.95以上，可用于?q蓄配方颗粒的定性鉴别。结论是，建立的指纹图谱重现性好，可为提高?q蓄配方颗粒的质量控制提供有益的信息。 　　关键词：?q蓄配方颗粒；HPLC法；指纹图谱；特征峰 　　中图分类号：R284.1 文献标识码：A DOI：10.15913/j.cnki.kjycx.2015.15.013 　　文章编号：2095-6835（2015）15-0013-02 　　?q蓄为蓼科植物?q蓄Polygonum aviculare L.的干燥地上部分，具有利尿通淋、杀虫止痒的功效，临床多用于治疗泌尿系统感染、非胰岛素依赖性糖尿病、细菌性痢疾、结石和肾炎等疾病。据文献报道，黄酮类成分是?q蓄抗菌消炎的主要活性成分。?q蓄配方颗粒是由?q蓄饮片加工制成的，具有免煎易服、易储存和使用方便等优点。传统的质量控制指标单一，难以反映?q蓄配方颗粒的真实质量。鉴于此，本文采用HPLC法建立?q蓄配方颗粒的指纹图谱，实现从整体上控制?q蓄配方颗粒质量的目的，为更有效地控制?q蓄配方颗粒质量提供科学的方法。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 仪器 　　Agilent 1260高效液相色谱仪、Agilent-G1311C四元泵、Agilent-G1329B进样器、Agilent-G1315D DAD检测器、CHEMSTATION B.04.02化学工作站和超声波清洗器（无锡超声电子设备公司）。 　　1.1.2 试剂和药材 　　?q蓄配方颗粒是由江阴天江药业有限公司提供的，没食子酸对照品（编号111083-201204）购于中国药品生物检定所，杨梅苷对照品（编号111860-201101）购于中国食品药品检定所，槲皮苷对照品（编号111538-200504）购于中国药品生物检定所，槲皮素对照品（编号100081-200907）购于中国食品药品检定所，山奈素对照品（编号110861-200808）购于中国食品药品检定所。乙腈为色谱纯（上海振兴化工一厂），水为超纯水，其他试剂均为分析纯。 　　1.2 方法 　　1.2.1 对照品溶液的制备 　　精密称取没食子酸对照品适量，加甲醇制成每1 mL含57.6 μg的溶液，即得；精密称取杨梅苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含58.7 μg的溶液，即得；精密称取槲皮苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含123.0 μg的溶液，即得；精密称取槲皮素对照品适量，加甲醇制成每1 mL含65.0 μg的溶液，即得；精密称取山奈素对照品适量，加甲醇制成每1 mL含22.0 μg的溶液，即得。 　　1.2.2 供试品溶液的制备 　　取?q蓄配方颗粒0.5 g置具塞锥形瓶中，精密加入质量分数为60%的乙醇25 mL，称定质量，超声处理（功率200 W， 　　频率40 kHz）30 min，放冷至室温，再称定质量，用质量分数为60%的乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，离心，取续滤液，即得。 　　1.2.3 色谱条件 　　Megres5-C18（Hanbon，250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相以乙腈为流动相A，以质量分数为0.1%的磷酸水溶液为流动相B，按表1进行梯度洗脱。 　　表1 ?q蓄配方颗粒特征图谱梯度洗脱表 　　检测波长为0～15 min，260 nm，15～65 min，350 nm；流速为1.0 mL/min；柱温为30 ℃；进样体积为10 μL。在此色谱条件下，对照品和样品中各色谱峰均获得了较好的分离。 　　2 结果 　　2.1 精密度试验 　　取同一供试品溶液，连续进样5次，以3号峰杨梅苷为参照峰，考察7个共有峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3%.结果表明，仪器的精密度良好。 　　2.2 重复性试验 　　取同一批?q蓄配方颗粒（批号：1207019），按1.2.3项下制备方法平行操作，制备5份供试品溶液，分别进样10 μL分析。结果表明，各主要色谱峰相对保留时间及其相对峰面积的RSD均小于3%.这表明该方法的重复性良好。 　　2.3 稳定性试验 　　取同一供试品溶液，分别在0 h、4 h、8 h、12 h、24 h进样，以3号峰杨梅苷为参照峰，考察7个共