Raf1蛋白激酶及VEGF在大肠腺癌中表达及临床意义.docVIP

Raf1蛋白激酶及VEGF在大肠腺癌中表达及临床意义 　　摘 要 目的：研究大肠腺癌、大肠腺瘤和癌旁正常组织中Raf-1蛋白激酶和VEGF的表达及其临床意义。方法：收集72例大肠腺癌患者的手术切除标本共112份，其中取自癌组织72份，癌旁正常组织40份，收集40例大肠腺瘤患者的肠镜下切除标本，采用免疫组化法检测其Raf-1蛋白激酶及VEGF的表达。结果：72例大肠腺癌组织中，Raf-1蛋白激酶的阳性表达率为29.17%，VEGF的阳性表达率为41.67%，40例大肠腺瘤组织中，Raf-1蛋白激酶阳性表达率为12.50%，VEGF阳性表达率为22.50%，40例癌旁正常组织中，Raf-1蛋白激酶阳性表达率为2.50%，VEGF阳性表达率为10.00%，大肠腺癌Raf-1蛋白激酶及VEGF的阳性表达率均显著高于大肠腺瘤组织和癌旁正常组织(P0.05)；大肠腺癌中VEGF的表达与患者的年龄、性别、病灶大小、分化程度均无关(P0.05)，但与肿瘤有无淋巴结转移、病灶浸润深度及Dukes分期均密切相关(P0.05)。结论：Raf-1蛋白激酶及VEGF对大肠腺癌的发生、发展具有一定的促进作用，但Raf-1蛋白激酶在判断大肠腺癌浸润转移方面的意义尚不肯定。VEGF 与大肠腺癌的血管生成密切相关，对大肠腺癌的生长和浸润转移具有肯定的促进作用。 　　关键词 Raf-1蛋白激酶 VEGF 大肠腺癌 大肠腺瘤 　　中图分类号：R57 　　文献标识码：B 　　文章编号：1006-1533(2009)02-0073-03 　　 　　大肠癌是胃肠道常见恶性肿瘤，半数以上来自腺瘤癌变，从形态学上可见到细胞增生、腺瘤形成及癌变各阶段相应的染色体改变，现已证实其发生、发展是一个多步骤、多阶段及多基因参与的异质性疾病[1]。本研究采用免疫组化方法，检测并初步分析Raf-1蛋白激酶及VEGF在大肠腺癌、癌旁正常组织、大肠腺瘤中的表达及其临床意义，以探讨Raf-1蛋白激酶及VEGF的表达在大肠腺癌发生、发展中的作用及与大肠腺癌临床病理特征的关系。 　　 　　1 资料与方法 　　 　　1.1 临床资料 　　收集无锡第四人民医院2006年1月1日至12月31日肿瘤外科住院患者行手术治疗的72例大肠腺癌患者的切除标本共112份，其中癌组织72份，非癌肠组织40份(距癌肿边缘5 cm以外取材)，其中男性46例，女性26例，年龄36~70岁。参照1990年世界卫生组织推荐的分化分级标准，低分化腺癌32例，中、高分化腺癌40例；有淋巴结转移29例，无淋巴结转移43例；并根据患者临床资料及病理资料判断术后Dukes分期：A期19例，B期24例，C期24例，D期5例。所有病例术前均未进行放疗及化疗。另收集同期无锡第四人民医院消化内镜室对住院及门诊患者进行肠镜下大肠息肉样病灶高频电切除术所得标本且经病理诊断明确为腺瘤者40例，其中男性24例，女性16例，年龄31~68岁。 　　1.2 免疫组化检测 　　鼠抗人VEGF单克隆抗体工作液(JH121)购自福州迈新生物技术开发有限公司。鼠抗人Raf-1单克隆抗体浓缩液(PS338[DPR/2/2A/3A])购自Lab Vision公司。实验步骤按试剂盒说明书进行。 　　1.3 阳性结果判定 　　免疫组化染色阳性信号呈棕黄或棕褐色。Raf-1蛋白激酶表达按所购试剂说明书要求以人扁桃体组织切片为阳性对照片，显微镜下观察肿瘤细胞胞核出现棕黄色颗粒为阳性，阴性对照用磷酸盐缓冲液替代第一抗体所得组织切片表现为标准。VEGF以细胞膜或胞浆内有棕黄色颗粒为阳性，高倍镜下(400倍)对每张切片随机选择5个视野，计数200个细胞/视野，共计1 000个，阳性细胞率≤10%计为阴性表达，阳性细胞率10%为阳性表达。 　　1.4 统计学处理 　　实验数据应用SPSS 10.0统计软件包进行分析，不同组织间Raf-1蛋白激酶和VEGF表达差异及Raf-1蛋白激酶和VEGF表达与大肠癌临床病理参数间关系采用卡方检验及Fisher精确概率法。P0.05为差异有统计学意义。 　　 　　2 结果 　　 　　2.1 大肠腺癌、大肠腺瘤及癌旁正常组织中的Raf-1蛋白激酶和VEGF表达 　　72例大肠腺癌组织中，Raf-1蛋白激酶阳性表达率为29.17%(21/72)，VEGF阳性表达率为41.67%(30/72)，40例大肠腺瘤组织中，Raf-1蛋白激酶阳性表达率为12.50%(5/40)，VEGF阳性表达率为22.50%(9/40)。40例癌旁正常组织中，Raf-1蛋白激酶阳性表达率为2.50%(1/40)，VEGF阳性表达率为10.00%(4/40)。大肠腺癌与大肠腺瘤、大肠腺癌与癌旁正常组织中的Raf-1蛋白激酶和VEG