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HPLC法测定石蒜中加兰他敏含量方法研究 　　摘要：建立了测定石蒜中加兰他敏含量的高效液相色谱法。以梯度乙腈－０．２%磷酸为流动相，Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ－Ｃ１８（４．６ ｍｍ×１５０ ｍｍ，５ μｍ）为固定相，流速为１ ｍＬ／ｍｉｎ，柱温为２０ ℃，检测波长为２８９ ｎｍ，对加兰他敏进行分析。结果表明，加兰他敏在该色谱条件下与其他组分均能有效分离，符合分析条件。 　　关键词：高效液相色谱；加兰他敏；石蒜；含量 　　中图分类号：Ｏ６５７．７＋２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）16－3389-03 　　 　　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇａｌａｎｔｈａｍｉｎｅ ｉｎ Ｌｙｃｏｒｉｓ ｒａｄｉａｔａ ｂｙ ＨＰＬＣ 　　 　　ＪＩＡＮＧ Ｈａｉ１，２，ＣＡＯ Ｘｉａｏ－ｙｏｎｇ２，ＷＵ Ｓａｎ－ｑｉａｏ１，ＬＩ Ｘｉｎ－ｓｈｅｎｇ１，ＬＩ Ｚｉ－ｘｕａｎ２，ＷＡＮＧ Ｙｕ－ｔｉｎｇ２ 　　（１． Ｓｈａａｎｘｉ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｂｉｏ－ｒｅｓｏｕｒｃｅ， Ｈａｎｚｈｏｎｇ ７２３０００， Ｓｈａａｎｘｉ， Ｃｈｉｎａ； 　　２． Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｓｈａａｎｘｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｈａｎｚｈｏｎｇ ７２３０００， Ｓｈａａｎｘｉ， Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ａｎ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ａｎａｌｙｚｉｎｇ ｇａｌａｎｔhａｍｉｎｅ ｉｎ Ｌｙｃｏｒｉｓ ｒａｄｉａｔａ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ． Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ－Ｃ１８（１５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ μｍ） ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｓｅｐａｒａｔｅ ｔｈｅ ａｎａｌｙｔｅ ｗｉｔｈ ａ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｏｆ Ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ａｎｄ ０．２％ Ｈ３ＰＯ４ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｗｉｔｈ １ ｍＬ／ｍｉｎ ａｔ ２０ ℃， ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ａｔ ２８９ ｎｍ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｇｏｏｄ ｆｏｒ ｓｅｐａｒａｔｉｎｇ ａｎｄ ａｎａｌｙｚｉｎｇ ｇａｌａｎｔａｍｉｎｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ＨＰＬＣ； ｇａｌａｎｔhａｍｉｎｅ； Ｌｙｃｏｒｉｓ ｒａｄｉａｔａ； ｃｏｎｔｅｎｔ 　　 　　石蒜（Ｌｙｃｏｒｉｓ ｒａｄｉａｔａ）别名老鸦蒜，龙爪花，属于石蒜科石蒜属，多年生草本，叶带状，深绿色带白霜粉，分布于长江流域以南各省区，喜生于林缘、河岸阴湿处［１］。该属植物花朵色泽鲜艳，其品种众多，有红花、粉红花、黄花、淡红紫色、百合型、白长筒型等，形态别致，是一种具鳞茎的花卉植物，具有良好的观赏价值。石蒜鳞茎含淀粉，可提取植物胶代阿拉伯胶。全草含石蒜碱、加兰他敏等生物碱，具有镇静、镇痛、解热、降压、抗炎、催吐、抗病毒、抗癌等作用［２］。 　　陕西汉中是石蒜的适生地，在当地作为一种民间药材，已有悠久的使用历史。但另一方面，石蒜的品种繁多，不同种中的有效成分含量不一，如何科学评价石蒜中的有效成分，是开发石蒜药用价值的关键内容之一。石蒜中加兰他敏具有治老年痴呆症的功效，目前其测定方法包括：分光光度法［３］、荧光分光光度法［４］、薄层扫描法及高效液相色谱法等［５－９］。本研究对石蒜中的加兰他敏采用高效液相色谱法测定其含量，分析时间短，操作简单，能够有效测定石蒜中加兰他敏的含量，将为开发石蒜的药用价值提供基础依据。 　　１材料与方法 　　１．１材料 　　石蒜样品２００８年８月采于陕西省西乡县，经８０℃烘干、粉碎，过６０目分样筛，备用。 　　１．２仪器 　　高效液相色谱仪Ａｇｉｌｅｎｔ １１００（美国安捷伦公司）；ＳＫ－１２０Ｅ超声波提取仪（宁波科生仪器有限公司）；ＵＶ－２５５０紫外－可见分光光度计（日本岛津公司）；ＴＴＬ－１０Ａ超纯水器（北京同泰联科技发展公司）；３０２型电热恒温鼓风干燥箱（山东潍纺医药集团股份有限公司医疗器械厂）；ＦＷ１１７型中草药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）；ＡＵＷ２２０Ｄ十万分之一分析天平（日本岛津公司）；ＦＡ２００４Ｎ万分之一电子天平（上海分析仪器）；ＴＤ２４－低速台式离心机（长沙湘仪器有限公司）；Ｇ８０Ｄ２３ＹＳ２－Ｑ６微波炉（格兰仕微波炉电器有限公司）；电热板（北京科伟永兴仪器有限公司）。 　　１．３试剂 　　甲醇、氯仿、磷酸、氨水为分析纯，乙腈为色谱纯；加兰他敏标准品（纯度为９９．８％，ＳＩＧＭＡ公司）。实验用水为纯水仪制备的去离子水。 　　１．４方法