HPLC测定蝙蝠蛾拟青霉培养物5种核苷类成分含量.docVIP

HPLC测定蝙蝠蛾拟青霉培养物5种核苷类成分含量 　　[摘要] 建立HPLC同时测定蝙蝠蛾拟青霉培养物中尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺嘌呤和腺苷5种核苷类成分含量的方法。采用Waters SunFire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱;以甲醇-水为流动相，梯度洗脱，柱温30 ℃，检测波长260 nm。 结果尿嘧啶的线性范围为10.00～200.00 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt;（r=0.999 4），尿苷的线性范围为10.10～202.00 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt;（r=0.999 2），鸟苷的线性范围为10.00～200.00 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt;（r=0.999 1），腺嘌呤的线性范围为10.30～206.00 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt;（r=0.999 2），腺苷的线性范围为10.45～209.00 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt;（r=0.999 1）;尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺嘌呤和腺苷的精密度RSD分别为0.032%，0.035%，0.039%，0.049%，0.000 80%;尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺嘌呤和腺苷的平均加样回收率分别为97.34%，99.10%，101.6%，98.61%，100.2%，RSD分别为1.3%，2.1%，0.96%，0.95%，1.3%。该方法灵敏度高、选择性好，线性关系及重复性好，适合于蝙蝠蛾拟青霉培养物及其提取物中核苷类成分的含量分析。 　　[关键词] HPLC;蝙蝠蛾拟青霉;培养物;核苷类成分;含量测定 　　[收稿日期] 2014-12-23 　　[基金项目] 云南省教育厅科学研究基金重大专项（ZD2012009） 　　[通信作者] *马云淑，教授，硕士生导师， E-mail：yunshuma2@126.com 　　[作者简介] 阳丹，硕士研究生， E-mail：475802265@ 　　Determination of 5 nucleosides components in culture of 　　Paecilomyces hepialid by HPLC 　　YANG Dan， MA Yun-shu*， HUANG Ting-ting， CHEN Cheng 　　（Yunnan University of Traditional Chinese Medicine， Kunming 650500， China） 　　[Abstract] The concentration of 5 nucleosides， uracil， uridine， guanidine， adenine and adenosine in culture of Paecilomyces hepialid was determined by the developed method of HPLC. The HPLC method was performed on a Waters SunFire C18 （4.6 mm×250 mm，5 μm） column with methanol-water gradient elution as the mobile phase. The detection wavelength was 260 nm and the colunmn temperature was controlled at 30 ℃. The linear range was 10.00-200.00 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt;（r=0.999 4） for uracil， 10.10-202.00 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt; （r=0.999 2） for uridine， 10.00-200.00 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt; （r=0.999 1） for guanidine， 10.30-206.00 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt; （r=0.999 2） for adenine and 10.45-209.00 mg?Llt;supgt;-1lt;/supgt; （r=0.999 1） for adenosine， respectively. The RSD of precision was 0.032%， 0.035%， 0.039%， 0.049%， 0.000 80%， respectively. The average recoveries of uracil， guanidine， adenine， and adenosine were