HPLC荧光法测定替米沙坦血药浓度方法学考察.docVIP

HPLC荧光法测定替米沙坦血药浓度方法学考察 　　[摘要] 目的：采用HPLC-荧光法测定替米沙坦的血浆药物浓度。方法：采用Agillent Zorbax SB-C18色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为水-乙腈（58∶42，H3PO4调pH为4~5），流速1.0 ml/min，荧光激发波长300 nm，发射波长380 nm。结果：替米沙坦浓度在5~200 ng/ml范围内与峰面积具有良好的线性关系，最低检测限为5 ng/ml。结论：该法准确可靠，适用于替米沙坦的血药浓度测定。 　　[关键词] 替米沙坦；血药浓度；HPLC 　　[中图分类号]R927.2 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）03（b）-028-02 　　 　　Determination of telmisartan in human plasma by HPLC-fluorescence 　　WANG Xiao-hong, SUN Hong-liang, KONG Deng 　　(Department of Basic-medicine Teaching,Weifang Medical College,Weifang 261042,China) 　　[Abstract] Objective:To determine the concentration of telmisartan in human plasma by HPLC-fluorescence method.Methods:Separation was achieved on Agillent Zorbax SB-C18 column（150 mm×4.6 mm,5 μm）.The mobile phase consisted of water-acetonitrile(58∶42, pH4~5),with a flow rate of 1.0 ml/min,and detection with a fluorescence detector set at an excitation wavelength of 300 nm and emission wavelength of 380 nm. Results:A linearity of telmisartan concentration curve was obtained in a range of 5~200 ng/ml.The detection limit was 5 ng/ml.Conclusion:This method is accepted to determine the concentration of telmisartan. 　　[Key words] Telmisartan;Blood-plasma concentration;HPLC 　　 　　替米沙坦(telmisartan)为一种新型非肽类血管紧张素受体阻滞剂，可选择性地难逆转性地阻滞AT受体，而对其他受体，尤其是心血管系统的受体无影响，是一种长效、高效、低毒的新型降压药[1]。由于替米沙坦在人体内的血药浓度很低，近年来对其的测定主要有同位素14C标记法、HPLC-MS法[2]、放射免疫法(RIA)等。本文采用HPLC-荧光法测定替米沙坦的血浆药物浓度，实验中所用的血浆样品为体外配制，旨在用最灵敏、有效、简洁的方法测出最低检测量的药物浓度，为临床替米沙坦血药浓度监测提供借鉴。 　　1 仪器与试药 　　Agilent-1100高效液相色谱仪(配有DAD，美国)；荧光检测(FLD)G1321A；微量进样器(25 μl，Hamilton美国)；微量分析天平(Mettler Toledo AL204瑞士)；KQ3200超声波清洗器(120 W，40 kHz，江苏昆山)。 　　替米沙坦对照品（含量99%以上）；甲醇、乙腈为色谱纯（Fisher，美国）；水为杭州娃哈哈集团纯净水；其他试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1色谱条件 　　Agillent Zorbax SB-C18色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为水-乙腈（58∶42，H3PO4调pH为4~5），流速1.0 ml/min，荧光激发波长300 nm，发射波长380 nm。柱温：室温。在此色谱条件下，理论塔板数（按替米沙坦峰计）应不低于6 000。 　　2.2溶液的配制 　　精密称取替米沙坦对照品4 mg置25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，即得160 μg/ml的替米沙坦贮备液，置4℃冰箱中保存。将贮备液用甲醇逐级稀释，配制浓度分别为0.1，0.2，0.5，1.0，2.0 μg/ml的替米沙坦标准液。