MGMT在散发性结直肠癌中表达基础探讨.docVIP

MGMT在散发性结直肠癌中表达基础探讨 　　摘要：目的 探讨MGMT蛋白在散发性结直肠癌中的表达，分析其原因，总结临床意义。方法 选取2011年06月~2012年6月我院手术的95例散发性结直肠癌患者，将手术切除标本肠癌组织作为本研究实验组，将95例患者的正常大肠黏膜组织（手术切除标本上距肿瘤大于10cm处黏膜组织)做为对照组，应用免疫组化SP法检测实验组和对照组中MGMT蛋白表达，分析MGMT表达与临床病理资料的关系。结果 实验组MGMT蛋白表达率为43.2%，显著高于对照组的10.5%，经统计学处理，两组数据存在显著差异（P＞0.05）；散发性结直肠癌患者中，MGMT蛋白在低分化组的表达率为30.0%，明显低于高中分化组的46.7%；MGMT蛋白在浸润至浆膜及浆膜外纤维脂肪组(即T3-4)的表达率为50.0%，显著高于浸润黏膜下及肌层组（即T1-2）的38.6%，组间差异均存在统计意义（P0.05）。结论 与正常大肠组织相比，肠癌组织的MGMT蛋白的表达率较高，MGMT表达与肠癌患者分化程度、浸润程度呈明显相关性，大肠组织DNA损伤程度可通过MGMT表达高低反应，监测MGMT蛋白表达对大肠癌的诊治有重要价值。 　　关键词：MGMT；散发性；结直肠癌；表达；基础探讨 　　结直肠癌是世界范围内最为常见的恶性肿瘤之一，2012年全球新增结直肠癌患者136万例，在癌症发病谱中分别占第三位和第二位。中国大陆2012年结直肠癌新增人数超过25万例，分别位居癌症发病谱的第五位和第四位。多项研究发现，DNA损伤是结直肠癌发生的重要原因，MGMT蛋白可修复DNA损伤，其异常表达已被证实在多种肿瘤的发生和发展中起着十分重要的作用，但临床上关于MGMT蛋白在散发性结直肠癌患者中表达的研究较少。本实验主要研究MGMT蛋白在患者结直肠癌组织及正常大肠组织中的表达，分析其表达情况与结直肠癌临床病理特点的关系。现报告如下： 　　1 资料与方法 　　1.1一般资料 收集2011年06月~2012年6月我院外科收治并行根治性切除的结直肠癌患者95例。入选病例均经组织病理学确诊，且未行放化疗，其中男性患者50例，女性患者45例，年龄39~75岁，平均（58.2±2.5）岁，直肠癌45例，结肠癌50例；高中分化癌70例，低分化癌25例；II期33例，III期62例。将95例患者的手术切除标本的肠癌组织作为实验组，95例患者大肠正常黏膜组织（手术切除标本上距肿瘤大于10cm处黏膜组织)做为对照组。 　　1.2方法 　　1.21仪器与试剂准备美国Neomarks公司生产的MGMT鼠单克隆抗体，工作浓度1:200；福州迈新生物技术开发有限公司生产的DAB显色试剂盒、兔多抗及免疫组化SP试刺盒。 　　1.22检验方法从手术切除的肠癌组织及距肿瘤大于10cm标本切缘处黏膜提取标本。各个标本分2份保存，1份经40 g/L甲醛溶液固定、脱蜡水化切片、4μm连续切片；另1份放入我院组织库-80℃冰箱中备用；按试剂盒说明书进行免疫组织化学SP法（链霉素一生物素蛋白一过氧化物酶法）染色，DAB显色，苏木素复染。以PBS代替一抗作为阴性对照，取已知肠癌阳性组织作阳性对照。 　　1.3阳性判断细胞核中出现棕黄色颗粒、细胞浆中出现棕黄色颗粒或两者均出现黄色颗粒可判定为阳性细胞，若阳性细胞数≥10%，可判断为阳性，否则视之为阴性。 　　1.4数据处理应用SPSS11.0进行统计学处理，χ2检验比较组间差异，以[n（%）]表示，Spearman法进行相关分析，P0.05表示差异具有统计学意义。 　　2结果 　　2.1MGMT蛋白在正常大肠组织及肠癌组织中的表达本研究结果显示，MGMT在肠癌组中较正常对照显著升高，实验组MGMT蛋白表达率为43.2%，显著高于对照组的10.5%，经统计学处理，两组数据存在显著差异（P0.05），提示MGMT蛋白在正常大肠组织中的表达率低于肠癌组织中的表达率，见表1。 　　2.2MGMT蛋白表达与散发性结直肠癌病理参数相关性散发性结直肠癌患者中，MGMT蛋白在低分化组的表达率为30.0%，明显低于在高中分化组的46.7%；MGMT蛋白在浸至浆膜下组的表达率为50.0%，显著高于未浸浆膜下组的38.6%，组间差异均存在统计意义（P40岁患者中的表达率为42.0%，在年龄≤40岁患者中为44.4%；MGMT蛋白在结肠癌患者中的表达率为44.0%，在直肠癌患者中为42.2%；MGMT蛋白表达与散发性结直肠癌患者性别、年龄、肿瘤部位、淋巴结转移与否无明显相关性（P0.05）。见表1。 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　3讨论 　　近