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EDTA―2Na检验方法探讨 　　摘要：下文主要结合笔者多年的工作实践经验，利用水提取食品中EDTA-2Na，加入还原剂使EDTA与铜形成络合物，利用液相色谱仪检测其络合物峰。加入三价铁，使EDTA-Cu络合物分解形成EDTA-Fe络合物，来确证EDTA的存在。该方法定性定量准确，测定过程快速。 　　关键词：材料与方法 EDTA-2Na 结果 　　引言 　　EDTA-2Na GB 2760-2011食品添加剂使用标准定义其功能类别为鳌合剂、防腐剂、抗氧化剂、加工助剂，易溶于水，不溶于乙醚。其主要原理是食品中金属离子的存在会促使某些食品变质，EDTA-2Na能螯合溶液中的金属离子，防止金属引起的变色、变质、变浊和VC的氧化损失，还能提高油脂的抗氧化性（油脂中的微量金属如铁铜等能促进油脂氧化的作用），用于罐头类食品可保持色、香、味，还可用于酱菜、罐头的稳定和凝固剂。 　　但是EDTA对人体有害，其ADI值为0.205mg/kg，国外对EDTA在食品中的残留量有严格的限量规定。日本规定罐头食品中EDTA的残留（以EDTA-2Na计）不得超过250mg/kg，饮料中不得超过35mg/kg。我国GB2760-2011在酱菜和罐头中规定不得超过0.25g/kg。测定不同介质中EDTA的方法有比色法、滴定法和高效液相色谱法、离子色谱法等。滴定法和比色法很难将EDTA络合物和其他络合物区分，测定结果不能令人满意。高效液相色谱法是通过检测EDTA的金属络合物EDTA-Fe或EDTA-Cu对EDTA进行测定，本文通过对EDTA-Cu进行测定，又利用EDTA-Fe络合物的稳定系数高于EDTA-Cu络合物而加入三价铁，使EDTA-Cu络合物分解形成EDTA-Fe络合物，来确证EDTA的存在。 　　1、材料与方法 　　1.1仪器： 　　Agilent1200高效液相色谱仪（配有二极管阵列检测器）；超声波清洗仪FS-1012FPM（常州市富怡达超声波设备有限公司） 　　1.2试剂： 　　四丁基溴化铵、抗坏血酸、甲醇（色谱级）；除另有规定外，试剂均为分析纯，水为去离子水。 　　CuSO4溶液：称1.6g（精确至0.0001g）硫酸铜放入100mL的容量瓶，加去离子水定容，充分摇匀； 　　FeCl3溶液：将1.62g（精确至0.0001g）三氯化铁用去离子水定容至100mL，充分摇匀。标准液的制备Na2EDTA标准储备液（1000μg/mLEDTA）：精确称取称0.1g（精确至0.0001g）Na2EDTA，放入100mL容量瓶，用去离子水定容。标准工作液：配制0.5、10、25、50、100μg/mL浓度的EDTA标准溶液混匀后于室温环境下放置20～24h使用。 　　1.3样品处理方法 　　精确称取5g（精确至0.0001g）试样于50mL具塞试管中，加入20mL水，超声提取10min，充分提取后加抗坏血酸20mg和3mLCuSO4溶液，用水定容。在室温下放置20～24h，用0.45μm滤膜过滤，滤液供液相色谱测定。 　　做确证试验时在上述滤液中加入5mLFeCl3溶液，放置20min，液相色谱测定观察特征峰的位置变化。 　　1.4仪器条件 　　色谱柱：AgilentTC-C18，5μm，150mm×4.6mm；流动相：A―0.03mol/L乙酸钠溶液和0.02mol/L四丁基溴化铵水混合液，用磷酸调节pH=4；B―甲醇；A：B=75：25。 　　流速：1.0mL/min；进样量：20μL；柱温：25℃，检测波长：254nm。 　　2、结果与分析 　　2.1线性关系 　　在本方法所确定的条件下，EDTA在0.5～100μg/mL范围内进行色谱测定，并绘制标准曲线，得色谱峰面积（y）与质量浓度（x，μg/mL）得线性方程为y=10.113x-0.0034，相关系数r=0.99964。试验结果表明，本方法所选添加均在方法的线性范围内。 　　2.2精密度及回收率实验 　　采用样品添加法测定回收率及精密度。在榨菜中分别添加7μg/mL、20μg/mL、40μg/mL三个水平的EDTA，平均回收率分别为：91.6%、95.5%、98.8%（n=6），RSD分别为：2.5%、2.4%、1.6%；在水果罐头中分别同样三个水平的EDTA，平均回收率分别为：93.3%、95.9%、98.7%（n=6）RSD分别为：2.2%、2.8%、2.2%；在饮料中分别添加同样三个水平的EDTA，平均回收率分别为：96.3%、97.1%、97.6%（n=6）RSD分别为：1.3%、1.9%、1.6%，在酱菜中分别添加同样三个水平的EDTA，平均回收率分别为：93.8%、95.5%、97.8%（n=6）RSD分别为：2.5%、2.2%、2.4