SDS降解菌筛选以及生长条件和降解特性探究.docVIP

SDS降解菌筛选以及生长条件和降解特性探究 　　摘 要：目的：从典型污泥中获得对SDS有降解能力的菌株Sp-1。方法：以SDS为唯一碳源，对污泥中的微生物进行筛选、分离，并探究菌株的生长适宜条件和对SDS的降解能力。结果：生长特性探究结果表明，温度低于15℃和高于40℃时，菌株的生长均受到不同程度的抑制，30℃时生长情况达到较好状态；pH小于5.0和大于9.0时，菌株生长较缓慢，而pH为7.0时，生长状态较好；SDS浓度低于0.6g/L和高于1.4g/L时，菌株的生长均受到较大影响，浓度为1.0g/L时，生长速度达到峰值。在菌株的适宜生长条件下降解SDS，发现接菌量为15mL，降解率效果较好，18h，降解率达到峰值71.0%。结论：pH=7.0，温度为30℃，SDS浓度为1.0g/L为该菌的适宜生长条件，对SDS的降解率可达71.0%。 　　关键词：SDS；降解菌；生长条件；降解特性 　　中图分类号：X592 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20161032001 　　表面活性剂具有润湿、乳化、分散、增溶、起泡、润滑等优越性能，享有“工业味精”的美称[1]。随着世界经济的发展，工业及其其他领域对表面活性剂的需求越来越多，其产量大约占世界洗涤剂总量的40%左右[2]。其中阴离子表面活性剂占了很大的份额，如十二烷基硫酸钠（Sodium lauryl sulfate，简称SDS），直链烷基苯磺酸，十二烷基磺酸等。这些表面活性剂通过污水，生活垃圾和工业废渣等途径进入环境，成为环境中具有代表性的一类难处理有机物[3]。表面活性剂通过影响水中溶解氧的含量，对水中植物与动物的生长产生了较大的影响；并且能通过改变土壤对金属的吸附性，而对陆生植物生长造成不利影响 [4]，还能使生物膜蛋白和脂质分离，增加细胞生物膜的通透性[5， 6]，破坏细胞的保护系统。在环境中存在量大，环境危害范围广[7]，表面活性剂的处引起了越来越多的关注。目前对表面活性剂降解的方法主要有：电降解、光降解、超声降解、传统活性污泥降解以及生物降解等方法；而电降解和超声降解，投入成本较高，光降解由于催化剂的使用，导致降解过程大量消耗资源；传统污泥降解法工序多，降解速率低；而在微生物降解方法中，反应条件要求低，降解速度快，操作简单，无二次污染，是目前比较经济有效的处理方式[8]。因此，此次研究通过筛选微生物的方法来处理表面活性剂。 　　1 材料和方法 　　1.1 培养基 　　富集培养基：Na2HPO4?12H2O 0.07g， 酵母膏1.50g， KCl 0.10g， KH2PO4 1.00g，K2HPO4 1.00g， MgSO4?H2O 0.50g， CaCl2?H2O 0.05g， SDS 0.10g， 蒸馏水1000mL， pH 7.0[9]。 　　分离培养基：Na2HPO4?12H2O 0.07g， NH4NO3 6.00g， KCl 0.10g， KH2PO4 1.00g， K2HPO4 1.00g，MgSO4 ?H2O 0.50g， CaCl2?H2O 0.05g， 琼脂20.00g， SDS 0.10g， 蒸馏水1000mL， pH 7.0[9]。 　　发酵培养液：同富集培养基。 　　1.2 降解菌株的富集、分离与纯化 　　从生活污泥中获取菌株样本，接种于浓度为0.1g/L SDS富集培养基中，在28℃，140r/min摇床中培养5d，离心弃去上清液，接种于新鲜培养基（SDS浓度加倍）中，以同样的方法连续重复3次，富集SDS降解菌。将富集得到的菌株经稀释后，接种于分离培养基中，经多次分离与纯化获得单一菌落，命名为Sp-1。 　　1.3 菌株降解特性探究 　　1.3.1 菌株的菌落特性 　　1.3.2 培养温度对菌株生长的影响 　　将Sp-1接种于发酵培养基，在不同温度下，140r/min摇床震荡培养24h，测定其生长量。 　　1.3.3 培养pH对菌株生长的影响 　　将Sp-1接种于pH不同的发酵培养基中，在30℃条件下，140r/min摇床震荡培养24h，测定其生长量。 　　1.3.4 SDS浓度对菌株生长的影响 　　将菌株Sp-1接种于SDS浓度不同的发酵培养基中，在30℃，pH=7.0条件下，140r/min摇床震荡培养24h，测定其生长量。 　　1.4 菌株降解SDS探究 　　1.4.1 接种量对SDS的降解率的影响 　　将Sp-1接种于发酵培养基中，摇床震荡培养24h，然后将不同的菌液量接种于100mLSDS浓度为1.0g/L的发酵培养基中，在30℃、pH=7.0的条件下，140r/min摇床震荡培养24h，测定SDS的降解率。 　　1.4.2 菌株Sp-1对SDS降解规律的探究