IgA肾病病理与临床指标及转化生长因子β1和Smad7蛋白相关因素分析.docVIP

IgA肾病病理与临床指标及转化生长因子β1和Smad7蛋白相关因素分析 　　[摘要] 目的 对IgA肾病进行病理学分型及其临床指标之间的关系进行探讨和分析，并观察转化生长因子β1和Smad7蛋白的不同表达，旨在对发病机制等因素进行探讨。方法 选取该院收治的100例原发性IgA肾病患者，收集并研究患者临床资料，参照IgA肾病分型对所有患者的肾活检标本进行评分并比较各病理及分型见常见指标的差异。通过使用免疫荧光双套染法并结合激光共聚焦显微镜检测IgA免疫复合物在不同肾病肾小球的沉积量，比较并分析其相关因素。此外，采用化学二步法检测转化生长因子β1和Smad7蛋白的表达，并比较不同表达情况与肾小球沉积量的关系。结果 IgA肾病肾组织除E0/1外，其余临床指标之间差异有统计学意义（P0.05），肾组织IgA沉积量差异有统计学意义（P0.05）；转化生长因子β1和Smad7蛋白表达差异有统计学意义（P0.05）。结论 IgA肾病病理可以反映病变指标；血清浓度高低并不一定能决定IgA肾病是否发作，但沉积的IgA复合物可能过量聚积造成肾小球硬化；转化生长因子β1和Smad7蛋白很可能是过量聚积的重要原因并造成肾小球硬化。 　　[关键词] IgA肾病病理；临床指标；转化生长因β1；Smad7蛋白 　　[中图分类号] R69 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2014）11（b）-0044-03 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　为对IgA肾病进行病理学分型及其临床指标之间的关系进行探讨和分析，选取该院在2010年3月―2014年2月收治的100例原发性IgA肾病患者，其中男58例，女42例，患者平均年龄为（33.4±4.3）岁。并根据IgA肾病牛津分型对患者进行IgA肾病病理诊断。现报道如下。 　　1.2 排除标准 　　①患者患有狼疮肾炎、乙肝相关性肾炎等继发性肾病；②患者患有肾小管间质病变或动脉病变等[1-2]；③患者每例肾穿组织内肾小球数量≥8个，且新月体占55%以下；④临床24 h检测患者尿蛋白定量超过0.5 g/d；⑤临床估计患者eGFR超过30 mL/min（1.73 m2）。 　　1.3 方法 　　收集100例患者临床资料，估算患者肾小球滤过率（eGFR）和平均动脉压（MAP）。对所有患者进行肾病理学检查。 　　1.3.1 光镜 对患者进行穿刺处理以获得患者肾组织，以福尔马林固定并用石蜡进行包埋，将其处理成为厚度大约为4 μm的切片，并对切片分别进行PAS、Msson、HE和PASM染色。肾组织病理指标应当包括球性硬化、新月体、内皮细胞增生、坏死等方面。 　　1.3.2 电镜 使用浓度为2.5%～3%的戊二醛（稀戊二醛溶液：国药准字初固定肾穿组织，之后用1%浓度的锇酸（CAS号20816-12-0）后固定，对其按照常规方式进行制片，将其处理成为1 μm厚度的切片并用醋酸铀-柠檬酸铅（醋酸铀：CAS号541-09-3；柠檬酸铅：CAS号512-26-5）染色。在电镜下观察肾小球基底膜厚度变化及其结构变化，细胞器变化及上皮细胞足突的形态特征等。 　　1.3.3 肾组织病理学观察及分型 在光镜视野下，根据IgA肾病的牛津分型，分别对M0/1、S0/1、E0/1、T0/1/2进行评分并整理组合，见表1。 　　通过使用规定的PAS染色切片对系膜细胞增生进行评分，将符合条件的小球数量记录为X。并将所有小球评分分值相加的总数记为Y。Y/X所得即为系膜细胞增生的评分。 　　1.3.4 免疫荧光检查 选取肾穿新鲜的组织并进行冰冻切片，采用厚度约为2～3 μm的免疫荧光进行染色，并使用FITC分别采用直接免疫荧光染色和简洁荧光法进行标记和检测。在显微镜下对其进行荧光观察。采用化学二步法检测转化生长因子β1和Smad7蛋白的表达，并比较不同表达情况与肾小球沉积量的关系。 　　1.4 统计方法 　　该观察数据统计应用SPSS 17.0软件对数据进行分析，计量资料以均数±标准差（x±s）形式表示，组间应用t检验进行比较。 　　2 结果 　　IgA肾病肾组织除E0/1外，其余临床指标之间均差异有统计学意义（P0.05），见表2。 　　血清IgA浓度组间差异无统计学意义（P0.05），肾组织IgA沉积量差异有统计学意义（P0.05），转化生长因子β1和Smad7蛋白表达组间比较差异有统计学意义（P0.05）。见表3。 　　3 讨论 　　IgAN组织学的病理变化多种多样，在显微镜下，轻则肾小球、肾小管正常；重则肾小球严重病变，形成各类新月体；晚期患者多为肾小球硬化、肾小管萎缩或发生间质纤维化。自从Berger在1968年第一次报道IgAN后，临床上出现过许多种分类、