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不同品种甜高粱茎秆中糖分积累规律的研究 　　摘要：为明确甜高粱茎秆的含糖量积累规律，应用液相色谱法，测定了12个品种的甜高粱茎秆在不同生长时期的总糖、葡萄糖、蔗糖、果糖含量。结果表明：蔗糖含量是影响总糖含量变化的主要因素；茎秆中果糖含量与葡萄糖含量具有显著正相关（R=0.82，P0.01），果糖与蔗糖无显著相关性，葡萄糖与蔗糖呈正相关（R=0.341，P0.05）；在生长最旺盛的拔节期，蔗糖含量是整个生长发育时期中的最低值，成熟期蔗糖含量达到最高峰，说明生长发育前期，蔗糖主要被分解用于甜高粱的快速生长，而生长后期被用来存储积累。 　　关键词：甜高粱；糖代谢；不同时期；糖分积累 　　中图分类号： S514.01文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）01-0077-03 　　收稿日期：2013-06-04 　　基金项目：辽宁省教育厅项目（编号：L2012387）。 　　作者简介：毛鑫（1989―），女，辽宁营口人，硕士研究生，研究方向为甜高粱糖代谢。E-mail：1019578434@。随着经济和社会的高速发展，能源的需求量越来越大，能源短缺和温室气体已经成为各国面临的重大问题，在国内外石油价格不断上涨的情况下，世界各国都在积极探索利用可再生能源[1-3]。甜高粱具有适应性强、抗旱、耐涝、耐盐碱[4]等优点，且生长迅速，糖分积累快[5]，生物学产量高，不仅能够作青贮饲料，还可生产燃料乙醇[6]，因而对于缓解能源危机具有重大意义。高效液相色谱法是在色谱法的基础之上发展起来的[7]，是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检、法检等学科领域中重要的分离分析技术。本研究以不同品种甜高粱作为试材，应用高效液相色谱法测定糖含量，研究甜高粱茎秆不同时期糖的累积规律，以期为选育含糖量高的优良品种奠定一定的基础。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　甜高粱：辽甜1号、辽甜2号、辽甜3号、辽甜4号、辽甜5号、辽甜6号、辽甜7号、辽甜9号、辽甜10号、辽甜12号、9198A3×（111×1022）、矮四A3×（111×1022），由辽宁省农业科学院提供。 　　1.2高效液相色谱法测定总糖、蔗糖、葡萄糖、果糖含量 　　1.2.1总糖的提取在拔节期、抽穗期和成熟期分别取甜高粱茎秆0.5 g，用3 mL蒸馏水溶解于研钵中，将其制成匀浆导入离心管中。再用7 mL蒸馏水冲洗研钵1～2次，转入上述离心管中，在5 000 r/min下离心15 min。取上清液于大试管中，定容至100 mL，用于测定总糖含量。3次重复。 　　1.2.2总糖含量的测定采用蒽酮比色法[8]测定甜高粱中可溶性总糖的含量。 　　1.2.3蔗糖、葡萄糖和果糖的测定在拔节期、抽穗期、成熟期分别取甜高粱茎秆0.5 g，在5 000 r/min下离心15 min，取上清液。利用高效液相色谱法进行分析，色谱柱为Agilent Zorbax NH4 4.6 mm×250 mm（5 μm），色谱条件为：流动相（乙腈 ∶超纯水=70 ∶30），流速为1.0 mL/min，NH4柱，柱温35 ℃，每次进样量为20 μL，安捷伦G1362A示差检测器。3次重复，每次重复保证为一个独立的样品[9]。 　　1.3数据分析 　　利用Excel及SPSS 12.0对试验数据进行统计分析。 　　2结果与分析 　　2.1甜高粱茎秆中总糖含量分析 　　在3个生长时期内，茎秆中可溶性总糖的含量呈上升趋势，拔节期、抽穗期总糖含量变化不显著，而到成熟期时增长得很迅速。辽甜9号的可溶性糖含量最多，辽甜4号含量最少（图1）。 　　2.2甜高粱茎秆中蔗糖含量与总糖含量的相关性 　　在12个品种甜高粱茎秆中，辽甜9号的蔗糖含量最高，并且在整个生长时期中一直呈显著增长，而辽甜4号的蔗糖含量最低，与总糖的变化趋势相近（图2）。对这12种甜高粱茎秆中的蔗糖和总糖进行相关性分析，得出蔗糖与总糖呈极显著正相关（r=0.898，P0.01）（图3）。 　　2.3甜高粱茎秆中果糖含量与总糖含量的相关性 　　在这3个生长期中，抽穗期果糖含量最低，成熟期果糖含量最高（图4）。尽管成熟期茎秆中果糖含量最高，但是拔节期的果糖相对含量却是最高的。这表明在成熟期果糖并不是主要的贮存物质，它可能转化成蔗糖储存在茎秆中。对这12种甜高粱茎秆中的果糖和总糖进行相关性分析得出，果糖与总糖呈极显著正相关（r=0.584，P0.01）（图5）。 　　2.4甜高粱茎秆中葡萄糖含量与总糖含量的相关性