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不同培养条件对苹果树腐烂病病菌生长的影响 　　苹果树腐烂病（Valsa mali ）是苹果产区的一种重要枝干病害，辽宁、河北、山东及京津等地危害最为严重。该病主要引起树皮腐烂，轻者枝干残缺，影响产量，重者全株死亡，甚至毁园，对苹果生产造成严重威胁。如何有效防治苹果树腐烂病一直是苹果生产中的重大研究课题，我们研究了不同培养条件对苹果树腐烂病病原菌的影响，旨在为有效防治苹果树腐烂病提供理论依据。?? 　　 　　1 材料和方法?? 　　 　　1.1 试验材料?? 　　供试菌种来源于河北科技师范学院园艺试验站苹果园，主栽品种为富士，每年苹果树腐烂病均有发生，发病株率为70%~85%。从发病枝条上采病变组织后按常规组织分离法在PDA培养基上分离纯化、培养保存??［1］。?? 　　1.2 试验方法?? 　　1.2.1 温度对病原菌生长的影响?? 　　将在平板培养基上培养7天的病原菌打成直径5 mm的菌饼，接种于PDA平板培养基上，分别置于5、10、15、20、25、30、35、40 ℃培养，每处理3皿，3次重复。每隔24小时用“十字”交叉法测量菌落直径。?? 　　1.2.2 pH值对病原菌生长的影响?? 　　用0.1 mol/L NaOH和0.1 mol/L H??3PO??4将PDA培养基的pH值分别调至2、3、4、5、6、7、8、10，然后每皿接种1块直径为5 mm的菌块，每处理3皿，3次重复，25 ℃条件下培养，每隔24小时，用“十字”交叉法测量菌落直径［2］。?? 　　1.2.3 培养基对病原菌生长的影响?? 　　试验设置5种培养基，其中PDA、查彼克(Czapek)培养基、玉米粉培养基按照常规方法配置，①PDA培养基：去皮马铃薯200 g，葡萄糖或蔗糖20 g，琼脂15~20 g，水1 000mL；②查彼克培养基：蔗糖30 g、NaNO??3 2 g、K??2HPO??4 1 g、KCl 0.5 g、MgSO??4#8226;7H??2O 0.25 g、FeSO??4#8226;7H??2O 0.01 g、蒸馏水1 000 mL；③玉米粉培养基：玉米粉30 g、琼脂17 g、水1 000 mL；④苹果果汁培养基：苹果去皮去核40 g、马铃薯去皮40 g分别于500 mL水中煮1小时，过滤后混合，加入20 g琼脂，用水定容至1 000 mL；⑤苹果树皮培养基：苹果树皮40 g、马铃薯去皮40 g分别于500 mL水中煮1小时，过滤后混合，加入20 g琼脂，用水定容至1 000 mL??［3］。按照常规方法接种到培养基上，每皿接1个菌块。其他设置同1.2.2。?? 　　1.2.4 碳和氮源对病菌生长的影响?? 　　（1）碳源 以查彼克培养基加入0.3%的蛋白胨为基础培养基，分别按同比例加入葡萄糖、麦芽糖和淀粉代替蔗糖，以不加糖作对照，按照常规方法将病原菌接种到培养基上，每皿接1个菌块，每处理3次重复，25 ℃条件下培养，每隔24小时用“十字”交叉法测量菌落直径。?? 　　（2）氮源 以查彼克培养基为基础培养基，分别用等量（0.3 g/L）的蛋白胨、甘氨酸和硝酸钾代替硝酸钠，不加氮源为对照，按照常规方法接种到培养基上，每皿接1个菌块。其他设置同1.2.2。?? 　　1.2.5 光照条件对病原菌生长的影响?? 　　将病原菌接种到PDA培养基上，设全光照、全黑暗、12小时明暗交替3个处理。其他设置同1.2.2。?? 　　2 结果与分析?? 　　2.1 不同温度对病原菌生长的影响?? 　　该病原菌在5～40 ℃均能生长，在5 ℃和40 ℃病原菌生长较慢，菌落较稀薄，在25 ℃病原菌菌落生长最好，其次是30 ℃。培养96小时病原菌菌落直径，培养温度25 ℃与30 ℃有极显著差异性， 30 ℃与35 ℃有显著差异性，而20 ℃与35 ℃无显著差异性（表1）。?? 　　 　　2.2 不同pH值对病原菌生长的影响?? 　　病原菌在pH值为4的条件下生长量最好，24小时菌落直径达20.5 mm，96小时菌落直径达59.3 mm，和其它处理相比，pH值为4时菌落大且厚；其次是pH值为5时。培养96 小时，pH值4与pH值5，病原菌生长无显著差异；pH值6与pH值7亦无显著差异性，但是pH值4与5与pH值6、7达极显著水平。病原菌在pH值为8～10没有生长。由此可见，苹果树腐烂病病原菌生长最适pH值为4～5（表2）。?? 　　2.3 不同培养基对病原菌生长的影响?? 　　苹果树腐烂病菌在苹果树皮培养基上生长最好，96 小时菌落直径达71.8 mm。其次是玉米粉培养基，96小时菌落直径达69.5 mm， 　　?? 　　但二者并无显著差异。苹果果汁培养基和PDA培养基亦无显著差异性。苹果树皮、玉米粉培