一株耐热脂肪酶产生菌XD23酶学性质研究.docVIP

一株耐热脂肪酶产生菌XD-23的酶学性质研究 　　一株耐热脂肪酶产生菌ＸＤ－２３的酶学性质研究 　　 　　李红宁１，２，杨滟菊２ 　　（１．六盘水师范学院生物与地理科学系，贵州 六盘水５５３００４；２．云南师范大学生命科学学院， 昆明６５００９２） 　　 　　摘要：从云南寻甸油污样中获得１株产脂肪酶的菌株ＸＤ－２３，研究了该菌株的酶学性质。结果表明，该菌株所产脂肪酶的最适反应温度为６０℃，最适反应ｐＨ值为６．０，为高温中性酶；酶活力在ｐＨ值４．０～７．０范围内较稳定，有一定的耐酸性；在６５℃保温３０ ｍｉｎ酶活力保留７０％，具有良好的热稳定性。金属离子Ｃａ２＋、Ｃｏ２＋、Ｋ＋对酶活力有促进作用，Ｚｎ２＋、Ｐｂ２＋、Ｍｎ２＋、Ｆｅ３＋、Ａｌ３＋、Ｃｕ２＋对酶活力有抑制作用，ＥＤＴＡ、Ｎａ＋、Ｍｇ２＋对酶活力影响不大；表面活性剂中ＥＤＴＡ对该酶有较小的抑制作用，浓度为０．１、０．５ g/L的ＳＤＳ能明显抑制该酶的活性，浓度为０．５ mL/L的Ｔｗｅｅｎ ８０和浓度为０．１、０．５ mL/L的ＴｒｉｔｏｎＸ－１００对酶活力有促进作用。 　　关键词：脂肪酶；酶活力；酶学性质 　　中图分类号：Ｑ５５６文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）09－1773-03 　　 　　Enzymatic Properties of Lipase-producing Bacteria XD-23 　　 　　ＬＩ Ｈｏｎｇ－ｎｉｎｇ１，２，ＹＡＮＧ Ｙａｎ－ｊｕ２ 　　（１． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｇｅｏｇｒａｐｈｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｌｉｕｐａｎｓｈｕｉ Ｎｏｒｍａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｌｉｕｐａｎｓｈｕｉ ５５３００４， Ｇｕｉｚｈｏｕ， Ｃｈｉｎａ； 　　２．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｙｕｎｎａｎ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｋｕｎｍｉｎｇ ６５００９２， Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ａ ｓｔｒａｉｎ ｏｆ bacteria ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｌｉｐａｓｅ ｗａｓ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｆｒｏｍ ｏｉｌ ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ ｓｏｉｌ ｏｆ Ｘｕｎｄｉａｎ ｉｎ Ｙｕｎｎａｎ and named XD23． Ｔｈｉｓ bacteria ｗａｓ ｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄ ａｓ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ． Ｔｈｅ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ＸＤ－２３ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ． Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎｚｙｍｅ ｗａｓ ６０ ℃ ａｎｄ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ pＨ ｗａｓ ６．０． Ｉｔｓ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ ｓｔａｂｌｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｐＨ４．０～７．０； ａｎｄ ｉｔ ｈａｄ ｓｏｍｅ ａｃｉｄ－ｒｅｓｉｓｔｉｎｇ ｆｅａｔｕｒｅｓ． Ｉｔ ａｌｓｏ ｈａｄ ｇｏｏｄ ｔｈｅｒｍａｌ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ， ７０％ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｒｅｓｅｒｖｅｄ after ｂｅｉｎｇ ｋｅｐｔ ａｔ ６５ ℃ ｆｏｒ ３０ ｍｉｎｕｔｅｓ． Ｃａ２＋， Ｃｏ２＋， Ｋ＋ ｃｏｕｌｄ boost up ｉｔｓ ａｃｔｉｖｉｔｙ， ｗｈｅｒｅａｓ Ｆｅ３＋， Ｐｂ２＋， Ｍｎ２＋， Ｃｕ２＋， Ａｌ３＋， Ｚｎ２＋ wｏｕｌｄ ｒｅｓｔｒａｉｎ ｉｔｓ ａｃｔｉｖｉｔｙ， ｗｈｉｌｅ ＥＤＴＡ， Ｎａ＋， Ｍｇ２＋ ｈａｄ ｌｉｔｔｌｅ ｅｆｆｅｃｔ． ＳＤＳ at ０．１ g/L ａｎｄ ０．５ g/L ｃｏｕｌｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｒｅｓｔｒａｉｎ ｉｔｓ ａｃｔｉｖｉｔｙ， ｗｈｉｌｅ Ｔｗｅｅｎ ８０ at ０．５ mL/L ａｎｄ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００ at ０．１mL/L ａｎｄ ０．５mL/L ｃｏｕｌｄ strengthen ｉｔｓ ａｃｔｉｖｉｔｙ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｌｉｐｏｌｙｔｉｃ ａｃｙｌ ｈｙｄｒｏｌａｓｅ； ｅｎｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ； ｌｉｐａｓｅ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ 　　脂肪酶（Ｌｉｐｏｌｙｔｉｃ ａｃｙｌ ｈｙｄｒｏｌａｓｅ）又称三酰甘油酰基水解酶，广泛存在于植物、动物和微生物中。脂肪酶可在油水界面或水不溶性系统中催化酯交换、酸解、水解、胺解、转酯、醇解、酯化等化学反应［１］，因此被广泛应用于食品、医药、环保、洗涤、制革、造纸、生物化工等行业［２］。近年来应用脂肪酶法催化合成绿色能源生物柴油，已成为一个新的研究热门［３，４］。由于脂肪酶应用潜力巨大，涉及的