从高脂饮食家兔血脂和血液流变学动态变化探讨中医痰瘀证相关生物学基础.docVIP

从高脂饮食家兔血脂和血液流变学的动态变化探讨中医痰瘀证相关的生物学基础 　　摘要：目的 通过动态观察高脂饲料喂养家兔模型血脂和血液流变学各指标在造模过程中发生的变化及其相互关系，探讨中医“痰”“瘀”证相关的生物学基础。方法 新西兰家兔给予高脂饲料喂养2周、4周、8周后分别用酶法测定血脂，旋转法测定血浆黏度，微孔滤过法测定红细胞变形性，磁珠法测定凝血酶时间(TT)、部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)等血液流变学指标，用Pearson法进行相关性分析。结果 与普通饮食组比较，高脂饮食家兔血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL－C)在2周?迅速增高，4周、8周时?持在与2周相近的水平(P＜0.01)；高密度脂蛋白胆固醇(HDL－C)在2周开始增高，在8周增高更加明显(P＜0.01)；三酰甘油(TG)增高比较缓慢，在8周时明显增多(P＜0.01)。血浆黏度在高脂饮食2周、4周、8周时显著升高(P＜0.05或P＜0.01)；高切、中切、低切变率下红细胞变形指数在2周、4周、8周时均显著降低(P＜0.01)；TT在2周时降低(P＜0.05)，4周、8周时降低更加明显(P＜0.01)；APTT在4周时显著降低。相关性分析显示：TC和LDL－C与血浆黏度呈正相关，与红细胞变形性及TT呈负相关。TG与血浆黏度呈正相关，与红细胞变形性呈负相关。HDL－C　与高切变率下的全血黏度、血浆黏度呈正相关．与红细胞变形性及TT呈负相关。结论 在高脂家兔造模过程中，血脂和血液流变学有相关性变化，这些可能反映了中医“痰浊证”与“血瘀证”相关的生物学基础。 　　关键词：高脂饮食；痰浊证；血瘀证；血脂；血液流变学；家兔 　　中图分类号：R285.5　文献标识码：A　文章编号：1672－1349(2007)10－0946－03 　　 　　高脂血症家兔动物模型以往多用于动脉粥样硬化相关领域的研究，近年来，由于该模型同时存在高血脂和血循环障碍这两种病理机制，也被用于中医痰浊和血瘀证候的研究。中医学认为，证候是对人体运动状态和方式的概括和描述，随时间而动态变化，即其“动态时空”的特征。在以往的报道中，只有关于该模型造模末期家兔血脂、血液流变学变化，尚缺少在造模过程中对家兔血脂和血液流变学变化的动态的观察。研究表明。血液流变学异常是血瘀证的重要生物学表现，血脂异常与中医痰浊也有密切的关系。本实验拟通过观察高脂血症家兔血脂、血液流变学随高脂饲料喂养时间的延长而发生的动态变化及其各指标之间的相关关系，研究痰浊、血瘀证候的动态演化规律的生物学基础。 　　 　　1　材料与方法 　　 　　1．1　材料 　　1．1．1　动物 健康新西兰家兔21只，雌雄不拘，体重(2.0～3.5)k8，由北京开源兔业养殖场提供，许可证编号：Scxk(京)2006～0005，动物于安静环境下单独分笼饲养，室温控制在(23±1)℃的范围内，相对湿度60％，光线自动控制12 h明暗交替变换，给予充足清洁饮水。 　　1．1．2　试剂 总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL－C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL－C)试剂盒，由首都医科大学临床科技中心提供；凝血酶原时间(PT)测定试剂盒，部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒，凝血酶时间(TT)测定试剂盒，由美德太平洋科学集团提供。聚乙烯吡咯烷酮(polyvinglpyrrolidone，PVP)，配制红细胞变形液，Sigma公司产品。 　　1．1．3　仪器 BeckmanCoulterCX4 Pro全自动生化分析仪，美国Beckman公司生产。LBY－N6B全自动清洗血流变仪及微量血浆测试装置，LBY－BX3红细胞变形仪，C2000－2高性能血凝仪，由北京普利生仪器有限公司生产。DL－4000B冷冻离心机，由上海安亭科学仪器厂生产。 　　1．2　方法 　　1．2．1　动物分组及处理 将21只家兔随机分为普通饮食组6只，高脂饲料喂养2周、4周、8周组5只。高脂饮食组每只每天早、晚分别给予高脂饲料30 g，待高脂饲料喂完后加普通饲料及少量青菜喂养。高脂饮食饲料配方为1％胆固醇、15％蛋黄粉、5％猪油、79％普通兔饲料。分组及喂养方法见表1。高脂饮食2周组有1只家兔在第2周时意外死亡。8周后自家兔耳中央动脉取血进行指标检测。 　　 　　1．2．2 血脂检测 家兔空腹取血，待血液自凝后，取血清，用全自动生化分析仪测定血清中TC，TG，HDL-C，LDL-C。 　　1．2．3　血液流变学指标检测 取血后分别加入肝素抗凝试管，3.8％枸橼酸钠抗凝试管。取肝素抗凝血0.8 mL用LBY－N6B全自动清洗血流变仪测定全血黏度；肝素抗凝血离心3000r/min，10 min，取0.2 mL上层液用微