代谢组学中医证候研究进展.docVIP

代谢组学的中医证候研究进展 　　【摘 要】 整理近5年的代谢组学文献，从实验研究和临床研究2个方面，对代谢组学在中医证候本质研究领域的应用进展进行综述。 　　【关键词】 代谢组学；中医证候；综述 　　doi：10.3969/j.issn.2095-4174.2015.11.017 　　辨证论治是中医药理论体系的核心，是中医认识疾病和治疗疾病的原则。中医证候本质的现代研究始终是中医药现代研究的重点与热点。当前，证候的研究方法主要是文献梳理、临床流行病学调查与证候实质几个方面[1]。这些研究方法多少存在片面性或是带有主观性，不能体现出中医证候的整体性、动态性。代谢组学是对代谢网络的最终代谢产物进行多元化的终端分析，其研究方法与中医证候整体性、动态性思想不谋而合，故能以代谢组学作为出发点和切入点来研究证型，使中医证型的研究走在科学发展的前沿。 　　1 代谢组学概况 　　代谢组学是生物学体系的重要组成部分之一，它是继基因组学、转录组学、蛋白质组学之后发展起来的一门新的学科，是当某一生物或细胞在受疾病或外源性物质干扰的状态下，对所有的内源性低分子量，如氨基酸、脂肪酸、糖类、维生素和脂肪等，特别是分子量 1000的内源性代谢产物，进行定性以及定量分析。 　　目前，根据代谢组学研究对象及目的，对其涵盖了4个层次的研究，即代谢物靶标分析、代谢谱分析、代谢组分析和代谢指纹分析[2]。代谢组学是一项动态的、多参数应答的新型研究技术及方法，通过对生物体系进行刺激或扰动，或随着时间的发展，根据生物体内代谢产物的变化，研究生物体系的代谢路径[3]。代谢组学研究步骤包括样品采集、预处理、数据采集、分析及解释4个部分，要求生物样品稳定性好，血清、血浆、尿液、唾液，甚至关节液等均可作为研究样品[4]。预处理、数据采集主要运用分析化学技术手段，预处理分离技术主要为气相色谱、液相色谱、毛细管电泳，使样品可通过合适的方式进行测定[5]。数据采集分析技术目前较为常用的为磁共振及质谱，两者各有优缺点：磁共振成本低，检验快速，但灵敏度较低；质谱则常与色谱技术联用，及液质联用法，其灵敏度高，既可定性又可定量[6]。 　　代谢组学虽然是近十几年的新兴学科，但是在中医药研究方面得到广泛的应用，且有一定的突破。证候和方剂作为直接关系到疾病诊断与疗效的两大因素，一直是代谢组学在中医药方面研究的热点，证候的模糊性和方剂的复杂性一直是研究的难点。代谢组学将复杂方剂作为一个整体，对“君臣佐使”配伍后的方剂进行药效、毒理及物质鉴定研究，同时更将证候与方剂作为整体，进一步探讨方剂与机体作用后的效应及证候的实质内涵。由此，代谢组学为中医药研究带来新的思路及方法。 　　2 代谢组学应用于中医证候研究的基础 　　中医理论核心是辨证论治，是认识疾病和治疗疾病的原则。证实质的研究是研究中医的关键。中医学认为，证是对机体在疾病发展过程中的某一阶段病因、病理、病机、病位的概括，是对疾病某一阶段的特定病理生理过程的认识，受机体内因和外界环境的影响[7]。从证的本质来看，“证”准确而简练地综合了疾病形成的多方面因素；对于一个疾病来说，证不是固定的、不变的，它是发展的、变化的。因此，对证的研究应该是从整体的角度，以动态的方法，结合多种因素进行的。 　　无论是病理性刺激还是生理性刺激，外界环境的改变还是体内环境的波动，都可引起机体的体液、组织中内源性代谢物发生变化，代谢组学通过对内源性代谢谱的变化进行分析，从整体上体现生物在收到多种刺激后的功能状态及变化[8]。同时由于生物样本采集的微创性和便利性，代谢组学可以对生物体进行多点的观察和评估，因此代谢组学是一项动态并且整体反应机体状态的新技术、新方法。 　　代谢组学与中医证候的相通性体现于整体性和动态性。代谢物的生成和合成涉及人体多个系统，证候亦是多器官、多系统病理状态，受到环境、气候等影响，故二者均是对多因素整体性分析；代谢组学显示代谢物随时间变化，种类、浓度及比例也是变化的，证候亦会随时间变化而发生传变，二者均存在随时间变化而变化的特点，故二者均具有动态性。 　　3 代谢组学研究中医证候学的进展 　　3.1 代谢组学的中医证候动物模型研究进展 基于动物模型易于复制、可重复、便于观察等优点，代谢组学在中医证候动物模型的研究十分广泛、普遍。运用国际公认的造模方式复制证候模型，使用代谢组学方法对动物的尿液或血液进行分析，以寻找证候特异性代谢标志物。在实验室条件下，排除了饮食、环境、生活习惯等因素的影响，使实验数据更加集中更具有代表性。 　　黎莉等[9]采用激惹、噪音以及脉冲电等刺激方式对孕后大鼠进行激惹刺激，模拟了情志不遂的病理生理状态，复制了经前期综合征的肝气逆证的大鼠模型。采用代谢组学方法检测模型组和正常对照组血浆代谢成分的差异