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同步换血疗法对高胆红素血症新生儿细胞免疫功能的研究
【摘 要】目的:动态观察高胆红素症新生儿同步换血前中后,T细胞亚群及NK细胞的变化,为高胆红素血症新生儿换疗法提供细胞免疫学基础理论。方法:采用间接荧光法和SP法,检测高胆红素血症新生儿换血前、换血中、换血后3个时段中T细胞亚群及NK细胞的表达水平。结果:高胆红素血症新生儿换血前与换血中、换血后比较,除了换血中CD8外,其它均P<0.01,差异有统计学意义。结论:高胆红素血症新生儿换血治疗后各种免疫细胞的变化,证实了高胆红素血症新生儿换血治疗是迅速的、科学的、临床行之有效的一种治疗方法,为高胆红素血症新生儿早期换血疗法充实了免疫学基础理论。
【关键词】T细胞亚群;NK细胞;高胆红素血症;新生儿;同步
【中图分类号】R722 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2014)03-01103-01
新生儿高胆红素血症是由各种原因引起的新生儿期最常见疾病之一,严格威胁新生儿生命健康,约有50%~75%患儿死于急性期,幸存者约有75%~90%留有听力、视觉、智能发育等严重的神经系统后遗症【1】。换血治疗是高胆红素血症最迅速的方法,目前多采用同步换血治疗(即同时、同步由外周静脉注血,挠动脉或肱动脉抽血)【2、3】。本文笔者自2009年1月至2012年12月间在我院新生儿科诊断为病理性高胆红素血症新生儿70例进行了外周动静脉同步换血疗法,同时在换血治疗的前、中、后3个时段,分别检测血清胆红素变化及血液中免疫细胞水平的变化,皆在探讨换血疗法对高胆红素血症新生儿细胞免疫功能的影响。
1 资料与方法
1.1 一般资料
研究对象为2009年1月至2012年1月间在我院儿科诊断为病理性高胆红素血症的新生儿70例,其中男性50例,女性20例。胎龄(36+5)W,出生体重(2.886+0.709)kg; 早产118例,足月儿62例。黄疸原因:ABO血型不含溶血病40例,G-6-PD缺乏症18例,β-地中海盆血1例,感染性黄疸3例,早产儿8例。20例为高胆红素血症脑病警告期新生儿。所有患儿均行同步控血治疗,住院时间为5-8d,平均7.2d。高胆红素血症新生儿血清均超过342μmol/L,且主要为结合胆红素。
所有病例均符合中华医学会儿科学会新生儿学制定的换血标准【4】:(1)产前诊断基本明确而新生儿出生时,脐带血红蛋白低于120g/L,伴水肿、肝脾肿大,心力衰竭者;(2)血清胆红素超过342μmol/L,且主要为结合胆红素者;(3)凡有早期核黄疸症状者,不论血清胆红素浓度高低,都要考虑换血因为核黄的发生与否,除与血清胆红素有关外,尚需考虑其他因素;(4)早产儿及前一胎病情严重者,尚需适当放宽换血指征。因为早产儿有较多促进核黄疸发生的因素。前一胎有死胎,全身水肿、严重贫血等病史者,此胎也往往也严重。生后数天也可考虑换血。
标本采集:每一位高胆红素血症新生儿在换血前、中、后均抽脂动脉肝素抗凝血2ml,以备检测用。
1.2 方法
①常规检查血清胆红素、直接胆红素、间接胆红素在换血前、换血中、换血后3个时段变化值;②T细胞亚群(CD3、CD4、CD8)的测定采用间接免疫荧光技术,分别检测CD3、CD4、CD8细胞百分率。试剂由美国RD有限公司提供,严格按说明操作;③自然杀伤细胞(NK16、NK57)的测定采用SP法(Biotin-Strdptarin-Peroxdase),试剂由美国RD有限公司提高,严格按照说明操作。
1.3 统计学处理
检验数据均以SPSS10.0统计软件进行统计学分析,数据以均数±标准差表示,组间均数比较采用t检验,P<0.05有统计学意义。
2 结果
2.1 换血前、中后胆红素变化
70例患儿换血前、中后血清总胆红素、间接胆红素显著下降,换血后总胆红素、间接胆红素换出率分别为52.66%、52.25%,直接胆红素换血前、中、后无显著差异,见表1。
2.2 换血前、换血中、换血后3个时段T细胞亚群、NK细胞表达水平变化
70例高胆红素血症新生儿换血前、中、后T细胞亚群、NK细胞比较,P均<0.01游离胆红素对脑细胞有毒性作用,血与脑游离胆红素梯度越高,则进入脑的量越多,胆红素脑病的发生率越高【5】。换血疗法可以换出85%~90%的致敏红细胞及降低循环中60%的胆红素抗体,因此,双倍量换血能迅速有效地防止胆红素脑病的发生【6】本组病人胆红素的换出率为52.66%,与文献报道的50%-60%的胆红素换出率相符合【2.7】。。本组病例中有1例出现胆红素脑病的症状,经换血后胆红素脑病的症状消失,但脑干听觉诱发电位检查异常,提示换血能阻止病情的进一步发展,但对已发生的脑损伤无逆转
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