小儿清咽颗粒中青黛的薄层色谱鉴别研究.docVIP

小儿清咽颗粒中青黛的薄层色谱鉴别研究 　　【摘 要】 目的：对小儿清咽颗粒中青黛薄层色谱检验存在的困难进行研究，以期为提升小儿清咽颗粒的法定标准提供依据。方法：按2010年版《中华人民共和国药典》附录中薄层色谱法和卫生部药品标准《中药成方制剂》第六册中小儿清咽冲剂的质量标准，对小儿清咽颗粒中青黛进行薄层色谱研究。结果：采用回流或温浴超声的方法提取能明显改善青黛提取效果，样品在与靛蓝、靛玉红对照品的位置可见清晰的斑点，阴性实验无干扰。结论：改进后的方法简便准确、稳定可靠，增强了小儿清咽颗粒中青黛薄层色谱鉴别的重复性和可鉴别性。 　　【关键词】 小儿清咽颗粒；青黛；薄层色谱 　　【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2015）22-0021-02 　　小儿清咽颗粒是由玄参、蒲公英、牛蒡子（炒）、薄荷、蝉蜕、板蓝根、连翘、牡丹皮、青黛九味药材经煎煮、浓缩、加入蔗糖、糊精等辅料制成的复方颗粒。具有清热解表、解毒利咽的功效，用于小儿外感风热引起的发热头痛、咳嗽音哑、咽喉肿痛。其标准收载于卫生部药品标准《中药成方制剂》第六册（标准号为：WS3-B-1092-92）[1]。小儿清咽颗粒的疗效好、见效快、毒副作用低且口感较好，容易被儿童接受。小儿清咽颗粒的法定质量标准规定要进行青黛的薄层色谱检验，但按照现有法定标准的方法操作[1-2]，不论是按标准工艺将青黛包煎，提取浸膏制粒，还是在提取好的浸膏中直接散入青黛再制粒，薄层色谱检验的结果都是阴性。在市场上购买了多家厂商，多个批次的小儿清咽颗粒进行了实验也都呈现同样的阴性结果。有文献指出，按法定方法难以检出靛蓝，并从药材相互助溶的角度加以探讨[3]。由此可见，法定标准中的青黛鉴别方法存在一定的缺陷，需要改进。 　　在检测小儿清咽颗粒的另一味药材牛蒡子时，其样品液的提取工艺是回流提取，发现提取液可见微弱的蓝色，分析原因可能来自于青黛的靛蓝，以此推测青黛的提取效果受温度的影响比较大。研究通过提高提取温度，有可能解决青黛检测困难的问题，现报道如下。 　　1 仪器与材料 　　1.1 仪器 AG285型电子天平；XMTD-4000型水浴锅；SK3200LH型超声波清洗器；OBS-2000型旋转蒸发仪。 　　1.2 材料 靛蓝（批号：110716-201111，中国食品药品检定研究院）；靛玉红（批号：110717-200204，中国食品药品检定研究院）；自制小儿清咽颗粒1批；阴性样品颗粒（自制）；市售小儿清咽颗粒3批（编号1：批号2014018，重庆太极集团四川南充制药有限公司；编号2：批建省泉州罗裳山制药厂；编号3：批号141008，四川同人泰药业有限公司）。水为纯化水，其余试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 供试品溶液制备 　　2.1.1 方法1 取本品4g，加含2%水合氯醛的三氯甲烷20ml，室温26℃，40kKHz超声波提取30 min，滤过，滤液蒸至近干，残渣加含2%水合氯醛三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液（标准规定方法）。 　　2.1.2 方法2 取取本品4g，加三氯甲烷20ml，40℃温水浴，并40kKHz超声波提取30 min，滤过，滤液蒸至近干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。 　　2.1.3 方法3 取取本品4g，加三氯甲烷20ml，60℃温水浴，并40kKHz超声波提取30 min，滤过，滤液蒸至近干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。 　　2.1.4 方法4 取取本品4g，加三氯甲烷20ml，60℃温水浴回流30 min，滤过，滤液蒸至近干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。 　　2.2 对照品溶液的制备 取靛蓝、靛玉红对照品，分别加三氯甲烷配制为每毫升含1.0mg的溶液，作为对照品溶液。 　　2.3 阴性对照溶液的制备 取阴性样品颗粒4g，其余制法同供试品溶液制备方法3。 　　2.4 展开剂及展开方式 选择法定标准规定的展开剂：甲苯-三氯甲烷-丙酮（5∶4∶1），上行展开。 　　2.5 检视方法的选择 选择法定标准规定的检视方法：取出，晾干，置日光下检视，斑点颜色清晰。 　　2.6 薄层板的选择 硅胶G薄层板（青岛海洋化工厂）；硅胶G薄层板（青岛美高集团有限公司）；硅胶G薄层板（上海默克化工），都可以取得较好的展开效果。实验选择斑点显色最为清晰的上海默克化工技术有限公司生产的硅胶G薄层板。 　　2.7 点样方式与点样量 点样方式为接触点样；点样量为3、5、10、15μl。对照品溶液点样量10μl及供试品溶液点样量为10μl时能明显检出。 　　2.8 温度及相对湿度的影响 按照试验所得薄层色谱条件，考察在20℃、25℃、35℃，相对