白细胞介素1β、6基因多态性与急性胰腺炎病情程度的相关性研究.pdfVIP

MODS评分结合在一起，对病情评估更全面，研究更具完整性和客观性。 7 材料与方法 1材料 1．1研究对象与分组 1．1．1急性胰腺炎(A_P)组按照中华医学会外科学会胰腺外科学组制定的《急性 研究对象必须都是汉族且无血缘关系，排除标准如下：(1)年龄75岁；(2)白 细胞0．4XlO叽；(3)正在应用免疫抑制剂的患者；(4)有慢性胰腺炎的证据； 急性胰腺炎患者分为轻型急性胰腺炎(MAP)组36例(男性13例，女性23例， 女 女性17例，平均年龄44．63±13．96)。将重症急性胰腺炎患者分为SAPI型(伴 MODS)和SAPII(不伴MODS)。 轻型急性胰腺炎(MAP)定义：具备急性胰腺炎的临床表现和生化改变，而无器 官功能障碍或局部并发症，对液体补充治疗反应良好，APACHE．II评分8， Balthazar CT评分4分。 重症急性胰腺炎(SAP)定义：指急性胰腺炎伴有脏器功能障碍，或出现坏死、 脓肿或假性囊肿等局部并发症者，或两者兼有，其?LPACI-IEII评分t8分，或 Balthazar CT评分／4分。 全身炎症反应综合征(SIRS)定义：(1)体温38．3℃或36℃；(2)心 i i acO232 mmH 率90次／m11；(3)呼吸频率20次／mn或P g； 2X1 0 X1 0 (4)白细胞总数1 9／L，或4 9／L，或杆状核10％；出现 以上两项或两项以上即可诊断。 APACHE．Ⅱ评分包括基础生理参数(体温、平均动脉压、心率、呼吸频率、 血氧饱和度、动脉pH、血钠、血钾、血肌酐、红细胞压积、WE及Glasgow积分等) 年龄因素和既往健康状况积分，积分的高低标志AP的严重程度。 MODS评分系统用6个器官系统的简单生理指标来反映器官功能。这些器官 是肺、肾、肝、心血管、血液学和神经系统，每个器官系统分为5个等级。分别为 0、1、2、3、4分，正常为0分，异常有4个等级，器官系统功能异常的最高评分为 24分。 一6分)两方面所得到的积分，积分越高说明局部病变越重。 1．1．2正常对照组选择门诊健康体检人群的随机个体78例，其中男性t40例， 女性38例，年龄26--65岁，平均年龄(473±13．6)岁。 1．2主要试剂 1．2．1基因组DNA的提取所需试剂及配置： (1)、红细胞裂解液：NH4CI 82．99、NH4HC037．99、0．5MDTA0．3729 的红细胞溶解液，可稀释至1x溶液使用。 (2)、酚／氯仿／异戊醇混合液(25：24：1)：厦门泰京生物有限公司提供 双蒸水中，轻轻摇动，直到蛋白酶K(RNA酶)完全溶解。不要涡旋混合， 加水定容到5ml，然后分装成小份置--20℃冰箱保存。 SDS (4)、10％SDS(100／60十二烷基硫酸钠)： 59加去离子水50rrd，加热 至68℃助溶，加入几滴浓盐酸调节溶液的PH值至7．2，分装备用。 TrisCI EDTA SDS (5)、TES消化液：NaCI 5．949 1．219 9．3059 59 加去离子水至1000ml。 (6)、TEPH8．0：1MIris．Hcl，PH8．0，lrrd，0．5MEDTA0．2ml加 双蒸水至100ml。 1．2．2PCR-RFLP分析所需试剂：