利玛原甲藻赤潮对水产品质量影响.docVIP

利玛原甲藻赤潮对水产品质量影响 　　为了了解赤潮藻类――利玛原甲藻所具有的腹泻型贝毒（DSP）对周围海水养殖产品产生的危害，以期维护湛江港水产品质量安全和保护中华白海豚生活栖息环境。本研究采用小白鼠生物测定法，以普遍养殖的鱼类、贝类、虾类等3大类7种生物为实验对象，提取DSP毒素进行检测。检测结果表明：在鱼类、贝类、虾类生物体中均未检出DSP毒素，即利玛原甲藻赤潮海水对海水养殖产品不会产生危害。 　　利玛原甲藻（Prorocentrum lima）是一种常见的海洋底栖甲藻，世界性广布种，分布于热带水域直到亚南极水域；附着在河口或沿岸浅海底的海草上以及浅海底沙粒上，也可有偶然性浮游生活。由于利玛原甲藻（Prorocentrum lima）具有不同于浮游甲藻的特殊生态属性，引起了人们广泛关注，成为国际有害藻华研究的一个重要领域。 　　大面积爆发的利玛原甲藻赤潮，引起周边海水养殖户恐慌。据研究显示，利玛原甲藻能产生大田软绵酸（OA）毒素，养殖的鱼、虾、贝等生物摄食后，其毒素在这些生物体内蓄积，产生腹泻性贝毒。为了明确利玛原甲藻携带的毒素对赤潮发生区附近养殖水产品中所造成的影响，以保护中华白海豚的生活栖息环境，指导渔民进行海水养殖。作者应用小白鼠生物测定法，采集养殖或野生的鱼类、贝类、虾类等7种生物，共7份样品进行PSP测定，现将结果报告如下。 　　一、材料和方法 　　1.样品采集。毒素生物：在持续14天的利玛原甲藻赤潮的高密度（密度36.67×105ind/L）区内布设7个站位为采样点（见图1），采集墨吉明对虾（Fenneropenaeus merguiensis）、青斑细棘?y虎鱼（Acentrogobius viridipunctatus）、鲻鱼（Mugil cephalus）、多鳞?^（Sillago sihama）、单齿螺（Monodonta labio）、褶牡蛎（Crassostrea plicatula）、近江牡蛎（Crassostrea rivularis）共7份生物样品。生物采集后，用海水洗净，用保温箱加冰块密封，带回实验室后立即取其消化系统及肌肉组织进行毒性测定。 　　受试小白鼠：参考水产品检测规范SC/T3024-2004对赤潮贝毒的试验方法，选取由湛江卫生学校提供，重量在18～22g之间，纯系健康无孕的雄性小白鼠作为受试小白鼠。 　　2.胃含物的分析鉴定。将采集到7种生物的外壳或表皮去除，用吸管吸水冲洗其软体部分，剖开胃囊，滴入少许清水，通过显微镜用直接计数法鉴别和计算胃含物中的物质。 　　3.生物毒性测试及数据处理。DSP提取液提取：用丙酮对试验品种的消化系统及肌肉组织提取贝类毒素，转移至乙醚中，经减压浓缩蒸干后，以1%吐温-60生理盐水将全部浓缩物在刻度试管中稀释到10mL。此时1mL试液相当于20g去壳贝、虾、鱼肉的重量，以此悬浮液作为DSP提取液原液。 　　生物毒性测试：以试验原液注射小鼠，24h内3只均死亡时，需将试验原液进一步稀释，再注射小鼠。 　　毒力计算：使体重16g～20g的小鼠在24h死亡的毒力为1个小鼠单位（MU）。生物体内DSP毒力的计算，按注射量与毒力的关系表选择24h内死亡两只及两只以上鼠的最小注射量及最大稀释倍数进行计算。 　　对毒力含量的界定：如果注射试验原液后，小鼠没有出现死亡，视为未检出毒力。 　　二、结果 　　1.胃含物的分析、鉴定。胃含物镜检结果表明：以上7种生物的胃含物均存在利玛原甲藻，其中近江牡蛎胃含物中利玛原甲藻含量最高，约98个；多鳞?^胃含物中甲藻含量最少，约27个。胃含物中甲藻含数量由高到低的顺序为：近江牡蛎褶牡蛎单齿螺墨吉明对虾鲻鱼?r虎鱼多鳞?^。 　　2. DSP毒素检测结果。检测结果（见表1）表明：24小时内，在鱼类、虾类、贝类等7种生物体内提取的DSP毒素原液均未引起试验小白鼠死亡，即未检出DSP毒力。多鳞?^、墨吉对虾的DSP毒素提取原液在注射30分钟内，小白鼠有明显的腹部肿胀，活动不活泼，呼吸困难。 　　三、讨论 　　1. 利玛原甲藻在水产品体内的富集规律。以上7种养殖生物胃含物均有利玛原甲藻存在，说明利玛原甲藻赤潮可被水生生物不同程度的摄食。从显微镜观察到的不同生物体内的利玛原甲藻数量的结果看来，可能是由于生物体之间的食性差异所造成的结果，如近江牡蛎是滤食性的，以水体中的浮游生物和有机碎屑为食；多鳞?^则是肉食性的，以多毛类及小型甲壳动物为主要食物。 　　2.利玛原甲藻DSP毒性分析。2005年以来，湛江港内共发生赤潮15宗，覆盖海域总面积约1716平方公里，主要为棕囊藻赤潮和中肋骨条藻赤潮、柔弱菱形藻、日本星杆藻赤潮及利玛原甲藻赤潮，大面积赤潮发生在近岸、近海和河口附近海域，已成为沿海地区重要的环境问题。中