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动物病理标本制作及其在教学中应用 　　摘要：主要介绍了动物病理大体标本和病理组织切片的制作过程，包括取材、处理、固定、保存、透明、浸蜡、包埋及切片染色等，同时介绍了动物病理组织标本在兽医病理学理论教学及实践或实验教学过程中的重要作用，在提高学生的学习兴趣、培养学生的综合应用能力方面具有重要意义。 　　关键词：动物病理标本；实践教学；考试改革；应用 　　中图分类号：G712 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2018）05-0045-02 　　动物病理学是兽医基础学科与临床学科之间的桥梁，其中家禽的疾病变化比较多见，所以家禽病理标本制作及应用至关重要。学生通过观察患病器官、组织的病理切片，认识疾病发生发展的规律，理论联系实际，加深理解和巩固课堂知识，培养学生掌握家禽常见疾病的病理诊断技术，能够准确分析疾病，为疾病的诊治提供基础依据[1]。同时病理标本的制作可以满足多门课程的教学需要，提高学生的学习兴趣，节约教学成本，促进教学及考试改革，加快畜牧兽医专业学科的应用型转变。 　　1 病理大体标本及组织切片制作 　　1.1 取材 　　采取病料越新鲜越好，一般不超过死后24 h。应选择病变部与可疑病变部切取，切取时要由表及里，有浅入深并包括周围正常组织一部分。特殊病料应根据器官的结构特点切取。管状、囊状和皮肤组织应注意垂直切取（横切）。带有薄膜的组织，要防止切时薄膜分离和脱落。 　　切取组织块大小以1.5 cm×1.5 cm×0.3 cm为宜，最厚不宜超过0.5 cm。组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时辨认。切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。 　　1.2 固定和保存 　　固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质、糖、脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。材料取下后应迅速固定。固定液数量应为病理组织块的5～20倍。由于一般把组织块浸入固定液后数小时固定液渗入组织液的深度只达2～3 cm，因此可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。最常用的固定液是10%的福尔马林溶液，使用时，用40%的甲醛饱和水溶液10 mL加水90 mL配成[2]。 　　对具有典型病理变化的组织和器官固定和保存后贴标签，同时制作相应的彩色卡片，并对其做详细的病理变化描述，便于教学及考试中应用。 　　1.3 冲洗 　　固定后的组织块应将固定液洗去。一般均用流水（自来水）冲洗12～24 h，及时冲洗尚有停止固定的作用，防止固定过度，有利于制片染色。 　　冲洗时如不方便用流水冲洗，也可用较大容器盛装水浸洗，每隔一定时间换水一次。整个浸洗时间比流水冲洗应稍长一些。乙醇固定的组织材料不需冲洗。 　　1.4 脱水 　　经过固定的组织，冲洗后要进行脱水。脱水的目的在于将组织内的水分用乙醇或其他溶剂置换出来，为石蜡等其他包埋剂浸入组织创造条件。 　　常用的脱水剂为乙醇。由于乙醇可以任何比例与水结合，对组织穿透力强，又能使组织硬化，因而不能将组织从水中直接移入浓度高的乙醇中，应从低浓度逐渐到高浓度。脱水必须充分，否则给浸蜡造成困难。 　　除用乙醇作脱水剂外，还可以用正丁醇。正丁醇微溶于水，能与各种浓度乙醇混合，也能直接溶解石蜡。故组织经正丁醇脱水后，不须经二甲苯透明。用正丁醇作脱水剂，组织块收缩降低，也不会过硬，故比乙醇优越。 　　1.5 透明 　　透明的目的是将组织内的乙醇用矿物油或植物油置换出来，并溶解石蜡，帮助石蜡浸透组织。由于经过透明剂处理的组织块用肉眼观察呈透明状，故称这一过程为透明。 　　常用的透明剂为二甲苯，因其穿透力较强，因而组织在二甲苯中停留时间不宜过长，一般透明时间在30 min左右即可。 　　1.6 浸蜡 　　浸蜡是指组织经过透明作用以后，放入溶化的石蜡中浸渗，使石蜡浸入组织块中，冷却后才能进行切片。 　　通常?x择熔点在52～56 ℃的石蜡，并视切片时环境的温度而选择。室温高则选用熔点稍高的石蜡，反之则选用熔点较低的石蜡，这样可防止切片时石蜡太软或易碎裂。 　　浸蜡的过程是：二甲苯石蜡混合液（1∶1），1 h；二甲苯石蜡混合液（1∶2），1 h；石蜡（1），1.5 h；石蜡（2），1.5 h。上述过程可在56～58 ℃恒温箱中进行，含二甲苯的混合液可用磨口小瓶盛装。 　　1.7 包埋 　　包埋就是将已浸渗好的组织包埋于浸渗剂中。根据需要，包埋的方法常有石蜡包埋法和火棉胶包埋法。 　　石蜡包埋法：①先将熔化的石蜡倒入包埋框，用加热的镊子将欲包埋的组织块在蜡液内放置好。注意各组织块之间的距离和每个组织块的位置和方向。②迅速第二次往平皿内倾倒蜡液，淹没组织块。待蜡液出现凝固层后，即轻轻放入冷水盆中或冰箱中使其凝固。石蜡完