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吊球草化学成分及抑菌活性研究 　　[摘要] 研究吊球草Hyptis rhomboidea的化学成分，并对部分单体化合物进行抑菌活性测定。采用Toyopearl HW-40，Sephadex LH-20，MCI-Gel CHP-20，RP-18，PTLC及硅胶等色谱法对吊球草进行化学成分研究，根据理化性质和波谱技术鉴定化合物的结构，并评价部分单体化合物对8种植物病原菌的抑菌活性。从乙酸乙酯部位中共分离鉴定了11个化合物，分别为咖啡酸乙酯（1）、熊果酸（2）、齐墩果酸（3）、vanillactic acid（4）、迷迭香酸甲酯（5）、山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（6）、山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）、冬青素A（8）、β-香树脂醇（9）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（紫云英苷，10）和胆甾-5-烯-3β，4β-二醇（11）。其中化合物1对核盘菌的抑制活性最强，MIC为16.2 mg?L-1，化合物5对玉米大斑病菌和小核盘菌的抑制活性最强，MIC分别为8.1，16.2 mg?L-1。所有化合物均为首次从该植物中分离得到，化合物1，5具有较强的抗真菌活性。 　　[关键词] 吊球草；化学成分；抑菌活性 　　吊球草Hyptis rhomboidea Mart. et Gal为唇形科山香属植物。本属植物有350～400种，均产自美洲热带至亚热带地区。中国有4种，分别为山香H. suaveolens、穗序山香H. spicigera、吊球草H. rhomboidea、短柄吊球草H. brevipes，均见于我国南部沿海。吊球草在民间用于治疗肝炎，溃疡以及水肿。吊球草的挥发油具有较好的抗菌、抗氧化和细胞毒活性[1]。经查阅国内外文献山香属植物山香挥发油中含β-榄香烯具有独特的抗肿瘤活性[2-3]，短柄吊球草全草中含黄酮、甾族糖苷类、三萜以及5，6-α-吡喃酮衍生物[4]以及挥发油中含大根香叶烯、丁香烯等[5]。国内外尚未见对穗序山香和吊球草化学成分的研究报道。为探索其中具有药效活性的物质基础，为合理开发利用这一植物资源提供依据，本实验对吊球草进行系统的化学成分研究。采用Toyopearl HW-40，Sephadex LH-20，MCI-Gel CHP-20，RP-18，PTLC及硅胶等色谱法对吊球草的化学成分进行分离纯化，根据理化性质和现代波谱解析技术鉴定化合物的结构。共分离鉴定了11个化合物，所有化合物1～11均首次从该植物中分离得到。抑菌活性实验表明，化合物1，4～6，10具有一定的抑菌活性。 　　1 材料 　　WRS-1B型数字熔点测定仪（上海精密科学仪器有限公司，未校正）；Bruker DPX-400核磁共振仪（TMS为内标）；Q-TOF Micro质谱仪（美国Maters公司，HR-ESI-MS）；真空薄膜浓缩装置[6]；旋转蒸发仪（上海亚荣生物技术有限公司）。柱色谱填料Diaion HP-20，MCI-Gel CHP-20（日本三菱公司产品），Sephadex LH-20凝胶Pharmacia Bioteck 产品）。柱色谱硅胶（160～200目）、薄层色谱用硅胶G和GF254均系青岛海洋化工厂产品。 　　吊球草采自海南三亚，由海南大学药用植物学黄世满教授鉴定为唇形科山香属植物全草。标本存于本实验室。烘干后打粉过40目筛，密闭冷藏备用。实验所选菌种：小麦赤霉病菌（Fusarium graminearum，Fg）、大麦赤霉病菌（F. graminearum Schwabe，Fgs）、黑根霉病菌（Rhizopus nigricans，Rn）、玉米大斑病菌（Exserohilum turcicum，Et）、尖孢镰刀菌（F. oxysporum，Fo）、番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea，Bc）、小核盘菌（Sclerotinia minor，Sm）、油菜菌核病菌（S. sclerotiorum，Ssc）8种植物病原真菌由浙江农林大学森林保护实验室提供。 　　2 方法 　　2.1 提取分离 　　取干燥的吊球草粗粉6 kg，用3倍体积分数的75%乙醇冷浸提取3次，每次24 h。抽滤，合并滤液，采用真空薄膜浓缩装置进行减压浓缩至原体积的1/3，用适量活性炭脱色，除去活性炭，再将原液减压浓缩至无醇味，得浓缩后的总浸膏0.5 kg。将总浸膏加入适量水超声分散，依次用石油醚（2.5 L）、乙酸乙酯（2.5 L）、正丁醇（2.5 L）萃取，将所得各部分萃取液进行减压浓缩得到石油醚部位（45 g）、乙酸乙酯部位（110 g）、正丁醇部位（132 g）和水部位（291 g）。将所得乙酸乙酯萃取部位110 g通过硅胶（160～200目）柱