地表水中抗生素质谱指纹提取方法研究.docVIP

地表水中抗生素质谱指纹提取方法研究 　　摘 要 从固相萃取柱、 上样样品pH值、 洗脱液、 定容液四方面优化前处理流程，建立了地表水中喹诺酮类、 磺胺类、 四环素类、 大环内酯类、 青霉素类、 头孢菌素类以及氨基糖苷类7类共49?N抗生素的质谱指纹的提取方法。水样采用MAXHLB 串联柱富集净化，在超高效液相色谱串联质谱（UPLCMS /MS）的多反应监测（MRM）模式下进行定性及定量分析。结果表明，各抗生素在0.001～0.5 μg/mL （链霉素为0.01～5 μg/mL）浓度范围内线性关系良好，各目标抗生素的加标回收率为51.7%～94.8%，相对标准偏差为2.2%～9.7%。 以3倍和10倍信噪比确定目标抗生素在两种定容液中的检出限以及定量限分别为0.01～3.23 μg/L和0.05～3.43 μg/L以及0.04～10.8 μg/L和0.17～11.4 μg/L。应用此方法对秦淮河和玄武湖的9个位点进行了抗生素污染筛查。 　　关键词 固相萃取； 超高效液相色谱串联质谱； 抗生素； 地表水 　　1 引 言 　　近年来，抗生素水环境污染事件频发 [1]，引起环保部门以及社会各界的关注与重视，而抗生素全国使用量与排放量清单进一步揭示了我国抗生素的使用及污染现状[2]。目前已在我国多个水系的水体中检测到抗生素的存在[3]，浓度在ng/L～μg/L范围[1]。 　　在实际的地表水抗生素污染监控工作中，样品量巨大，污染对象也具有很大的不明确性，因此开发快速、 操作简便以及涵盖种类更广泛的抗生素质谱指纹提取方法将大大提高环保部门对水环境抗生素污染定位的能力，可及早发现污染、 追溯污染、 防止进一步造成严重的环境危害。所谓指纹，是指能够全面满足污染物证分析溯源需要的特征物质信息体系，该体系既要能够多层面广尺度展现污染源不同特性及其排它差异，又要能够通过灵敏快捷、 客观可靠的现代仪器联用技术测定[4]，而抗生素质谱指纹则是指通过质谱手段去获取的水环境抗生素信息。目前已有许多文献报道通过质谱手段同时检测多种抗生素的方法[5～8]。徐晖等[9]报道了一种检测河流水体中痕量的5类 12 种抗生素残留的固相萃取液相色谱串联质谱（SPELCMS/MS）方法，并应用该方法分析了河水中的抗生素残留； Julia等[10]开发了一种能够长期监测城市污水中医用抗生素的固相萃取液相色谱串联质谱（SPELCMS/MS）快速分析方法，该方法可以检测不同种类共18种抗生素。然而抗生素质谱指纹提取的主要目的是能够简便高效地提取多层面广尺度的抗生素信息，关键在于检测目标物的全面性。但是上述方法涵盖的抗生素种类有限，并且难以同时对一些理化性质差别巨大的不同类别抗生素进行检测，无法满足通过一次提取就能获得抗生素质谱指纹信息的需求。 　　本研究从固相萃取柱的选择、 上样样品pH值、 洗脱液、 定容液四方面对前处理流程的进行优化，建立了同时检测地表水中喹诺酮类（Quinolones， QLs）、 磺胺类（Sulfonamides， SAs）、 四环素类（Tetracyclines， TCs）、 大环内酯类（Macrolides， MLs）、 青霉素类（Penicillins， PENs）、 头孢菌素类（Cephalosporins， CEPs）以及链霉素（Streptomycin， STR）7类共49种抗生素指纹的固相萃取超高效液相色谱串联质谱（SPEUPLCMS/MS）的分析测定方法。应用本方法对秦淮河和玄武湖共9个位点进行抗生素污染筛查，定位地表水抗生素污染严重的异常位点。 　　2 实验部分 　　2.1 仪器与试剂 　　Agilent 1290 Infinity超高效液相色谱仪（美国Agilent 公司），配Agilent ECC18色谱柱（75 mm×2.1 mm， 2.7 μm）； SCIEX QTRAP 4500串联质谱仪（美国AB公司）； AG285电子天平（瑞士Mettler公司）； MG2200氮吹仪（日本EYELA公司）； WH3微型旋涡混合仪（上海楚定分析仪器有限公司）； MilliQ超纯水仪（美国Millipore公司）； 12通道固相萃取装置（美国Supelclean公司）。Waters Oasis WCX固相萃取柱（150 mg，6 mL）、 Waters Oasis HLB固相萃取柱（200 mg，6 mL）、 Waters Oasis MAX固相萃取柱（60 mg，3 mL，30 μm）购于美国Waters公司； CNW BOND SAX（200 mg，6mL，安谱公司）。 　　抗生素（如表1所示）标准品均购于德国Dr.Ehrenstorfer公司。抗生素内标均购自加拿大Toronto Research Chemica