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离子对层析法应用于鼠肝麸醯胺-嘉南药理大学图书馆
理
離
CNIB-91-02
行91 年1 1 91 年12 31
葉
E-mail: idongyeh@mail.chna.edu.tw
行
年
(L-glutaminase; L-glutamine amidohyrolase; EC 3.5.1.2))
類 參尿 (1) 力
(2) 列 :
L-glutamine H2O L-glutamate NH4+
兩量都利量
a.Nessler’s reagent
b.glutamate dehydrogenase(GDH)( NAD+ )
c.OPA見( )
不易流 靈
度不量 L-Glutamate量
a.
b.glutamate dehydrogenase( NADH)
c.GDH+diaphorase( formazan)
d.glutamate decarboxylase( [14C]CO )
2
e.glucose oxidase (amperometric method)( H O )
2 2
例易
靈 度不利 (Synthetic
substrate)-L-γ-glutamyl p -nitroanilide (4)
p -nitroaniline ( A410) 靈 度不
不
量 茶葉
靈 度 不
了
靈 度
行離不理
( CTMAB)離行
離理離
留
離
1.
-
1.1. 理 利 離 (Dow SBR-P, OH )行
離留 (0.1 %)
1.2. (3510-60 )
1.2.1 4 L + 0.1 M
glutamine 4 L+20 mM hydroxylamine·HCl 2 L+ 9~0 L
1~10 L (6)
1.2.2 20mM (pH 7.6) 300mM mannitol,
10 mM Na-citrate, NH + (0, 0.5, 1 mM) 66mM glutamine
4
1.3. OPA (o-phthaladehyde) OPA 5mg量
精 Borate buffer 2ml-mercaptoethanol 20 l
1.4.
1.4.1 20 L o-phthaladehyde (OPA) 100 L 5
2
1.4.2 濾 10-20 L 行 HPLC
1.5. HPLC (Hitachi Ltd., Japan)
1.5.1 RP-18 4.6×125 mm, Merck column
1.5.2 Mobile phase 10 mM K-PO buffer pH 7.0 10 mM CTMAB +
4
acetonitr
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