离子对层析法应用于鼠肝麸醯胺-嘉南药理大学图书馆.PDF

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离子对层析法应用于鼠肝麸醯胺-嘉南药理大学图书馆

理 離 CNIB-91-02 行91 年1 1 91 年12 31 葉 E-mail: idongyeh@mail.chna.edu.tw 行 年 (L-glutaminase; L-glutamine amidohyrolase; EC 3.5.1.2)) 類 參尿 (1) 力 (2) 列 : L-glutamine H2O L-glutamate NH4+ 兩量都利量 a.Nessler’s reagent b.glutamate dehydrogenase(GDH)( NAD+ ) c.OPA見( ) 不易流 靈 度不量 L-Glutamate量 a. b.glutamate dehydrogenase( NADH) c.GDH+diaphorase( formazan) d.glutamate decarboxylase( [14C]CO ) 2 e.glucose oxidase (amperometric method)( H O ) 2 2 例易 靈 度不利 (Synthetic substrate)-L-γ-glutamyl p -nitroanilide (4) p -nitroaniline ( A410) 靈 度不 不 量 茶葉 靈 度 不 了 靈 度 行離不理 ( CTMAB)離行 離理離 留 離 1. - 1.1. 理 利 離 (Dow SBR-P, OH )行 離留 (0.1 %) 1.2. (3510-60 ) 1.2.1 4 L + 0.1 M glutamine 4 L+20 mM hydroxylamine·HCl 2 L+ 9~0 L 1~10 L (6) 1.2.2 20mM (pH 7.6) 300mM mannitol, 10 mM Na-citrate, NH + (0, 0.5, 1 mM) 66mM glutamine 4 1.3. OPA (o-phthaladehyde) OPA 5mg量 精 Borate buffer 2ml-mercaptoethanol 20 l 1.4. 1.4.1 20 L o-phthaladehyde (OPA) 100 L 5 2 1.4.2 濾 10-20 L 行 HPLC 1.5. HPLC (Hitachi Ltd., Japan) 1.5.1 RP-18 4.6×125 mm, Merck column 1.5.2 Mobile phase 10 mM K-PO buffer pH 7.0 10 mM CTMAB + 4 acetonitr

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