壳寡糖季铵盐制备和诱导抗稻瘟病初步研究.docVIP

壳寡糖季铵盐制备和诱导抗稻瘟病初步研究 　　摘要：分别以壳聚糖（ＣＴＳ，Ｍｗ＝１４ ０００）和壳寡糖（ＣＯＳ，Ｍｗ＝２ ０００）与２，３－环氧丙基三甲基氯化铵（ＥＴＣ）反应，合成２－羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖（ＣＴＳ－ＥＴＣ）和２－羟丙基三甲基氯化铵壳寡糖（ＣＯＳ－ＥＴＣ），经ＦＴ－ＩＲ和１Ｈ ＮＭＲ对其结构表征，电导滴定法测得取代度为３０％。在室内水稻稻瘟病的诱导抗病实验中，以浓度为５００ ｍｇ／Ｌ的ＣＯＳ－ＥＴＣ溶液喷洒过的水稻秧苗在１周内对水稻稻瘟病的抗病活性逐渐增强，并达到最高值的７７．２％，明显高于ＣＯＳ和ＣＴＳ－ＥＴＣ。 　　关键词：壳寡糖；季铵盐；水稻稻瘟病；诱导抗病 　　中图分类号：Ｓ４３５．６７２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）05－0942-04 　　 　　Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ Ａｍｍｏｎｉｕｍ Ｃｈｉｔｏｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ Ｔｈｅｉｒ Ｉｎｄｕｃｅｄ 　　Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｇａｉｎｓｔ Ｒｉｃｅ Ｂｌａｓｔ 　　 　　ＺＨＡＮＧ Ｗｅｎ－ｑｉｎｇ，ＦＥＮＧ Ｈｕａ－ｆｅｎｇ，ＺＵＯ Ｐｉｎｇ－ｐｉｎｇ，ＸＩＡ Ｗｅｉ 　　（Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｅａｓｔ Ｃｈｉｎａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００２３７，Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： ＣＴＳ－ＥＴＣ ａｎｄ ＣＯＳ－ＥＴＣ ｗｅｒｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ ｖｉａ ｔｈｅ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｏｆ “ＣＴＳ＋ＥＴＣ” ａｎｄ “ＣＯＳ＋ＥＴＣ”， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ， ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｌｙ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ ｂｙ ＦＴ－ＩＲ ａｎｄ １Ｈ ＮＭＲ． Ｔｈｅ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎ ｗａｓ ３０％ according to ｃｏｎｄｕｃｔｏｍｅｔｒｉｃ ｔｉｔｒａｔｉｏｎ． Tｈｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｒｉｃｅ ｓｅｅｄｌｉｎｇ， ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｓｐｒａｙｅｄ ｂｙ ５００ ｍｇ／Ｌ ＣＯＳ－ＥＴＣ to induce the ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｇａｉｎｓｔ ｒｉｃｅ ｂｌａｓｔ， ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｇｒａｄｕａｌｌｙ ｗｉｔｈｉｎ ａ ｗｅｅｋ ａｎｄ ｒｅａｃｈｅｄ ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｏｆ ７７．２％ which ｗａｓ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ＣＯＳ ｏｒ ＣＴＳ－ＥＴＣ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｃｈｉｔｏｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ； ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ ａｍｍｏｎｉｕｍ ｓａｌｔ； ｒｉｃｅ ｂｌａｓｔ； ｉｎｄｕｃｅｄ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ 　　 　　壳寡糖（Ｃｈｉｔｏ－ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＣＯＳ）是由２～１０个氨基葡萄糖通过β－１，４－糖苷键连接而成的寡聚糖，是自然界中惟一大量存在的碱性多糖――壳聚糖（Ｃｈｉｔｏｓａｎ，ＣＴＳ）的降解产物，具有水溶性好、安全无毒、易吸收等优点。Ａｌｂｅｒｓｈｅｍ等［１］首先提出ＣＯＳ具有调控植物生长发育、繁殖、防病和抗病等功能，并认为ＣＯＳ将成为一类新型的植物生长激素，此后ＣＯＳ的诱导植物抗病性越来越受到人们的关注［２］。同时，ＣＯＳ能促进植物细胞活化、增强植物抗病能力和改善土壤微环境［３］。胡健等［４，５］证实ＣＯＳ对水稻的常见病害――稻瘟病和纹枯病具有一定的诱导抗病效果，但与市场上常见的化学农药的防治效果相差甚远［６］。目前，壳寡糖衍生物作为水稻诱导抗病激活剂的研究国内外鲜有报道。本研究以ＣＯＳ（Ｍｗ＝２ ０００）与２，３－环氧丙基三甲基氯化铵（ＥＴＣ）反应，得壳寡糖衍生物，并初步研究了其对水稻稻瘟病的诱导抗病活性。 　　１材料与方法 　　１．１材料与试剂 　　水稻种子（品种为太湖糯）和水稻稻瘟病病菌（上海市南方农药研究中心提供）；ＣＴＳ［Ｍｗ＝ 　　１４ ０００，脱乙酰度（ＤＤ）＞８５％］和ＣＯＳ（Ｍｗ＝２ ０００，ＤＤ＞８５％）（上海伟康生物制品有限公司提供）；２，３－环氧丙基三甲基氯化铵（２，３－Ｅｐｏｘｙｐｒｏｐｙｌ ｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ，ＥＴＣ）（美国Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司）；其他试剂均为分析纯。 　　１．２仪器与设备 　　ＤＤＳ－３０７Ａ型电导率仪（上海精密科学仪器有限公司）；Ｎｉｃｏｌｅｔ ６７００傅立叶红外光谱仪（美国热电尼高力仪器公司）；ＤＮＰ－９０８２电热恒温恒湿培养箱（上海精宏实验设备有限公司）；ＡＶＡＮＣＥ ５０