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奥扎格雷钠对肢体缺血再灌注骨骼肌影响 　　【摘要】 目的 探讨奥扎格雷钠对肢体缺血再灌注骨骼肌的保护作用。方法 健康成年家兔20只， 随机分为实验组和对照组， 每组10只。建立兔肢体缺血再灌注损伤动物模型。在即将恢复血流灌注时， 对照组自耳缘静脉注射生理盐水， 实验组奥扎格雷钠注射液。分别在缺血前、缺血后2 h、再灌注后1 h、再灌注后3 h采集术侧股静脉血样。测定血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）的含量。结果 实验组再灌注后LDH、CK明显低于对照组（P0.01）， 骨骼肌组织湿/干重比值低于同期对照组（P0.05）。光镜及电镜下观察实验组骨骼机损伤轻于对照组。结论 奥扎格雷钠能够缓解组织水肿， 保护缺血再灌注骨骼机。 　　【关键词】 奥扎格雷钠；骨骼肌；再灌注损伤 　　临床护理中止血带应用时间过长、血管损伤、骨折和骨骼肌的挤压伤都不可避免的会引起骨骼肌的缺血再灌注损伤。骨骼肌的缺血再灌注损伤轻者会影响患肢骨骼肌的收缩功能， 重者可致肢体功能丧失、截肢甚至导致患者死亡[1， 2]。奥扎格雷钠是一种特异性血栓A2（TXA2）合成酶抑制剂， 能降低TXA2， 促进前列环素I2（PGI2）的生成， 并维持二者间的平衡， 还能选择性地扩张血管， 改善微循环和能量代谢， 抗血小板聚集[3-5]。奥扎格雷钠目前已广泛用于治疗缺血性心脑血管病， 但至今有关奥扎格雷钠对骨骼肌缺血再灌注损伤的防治作用的相关研究鲜有报道。因此， 本研究拟用家兔肢体缺血再灌注损伤模型， 观察奥扎格雷钠对肢体缺血再灌注骨骼肌损伤的防护作用。现报告如下。 　　1 材料与方法 　　1. 1 材料 实验选用健康雄性大耳白兔20只， 体重2.5～3.0 kg （由西安交通大学医学院实验动物中心提供）， 随机分为实验组和对照组， 每组10只。 　　采用改良的孙瑞芝等[6]的方法建立家兔骨骼肌缺血再灌注损伤动物模型。术前12 h禁食， 实验动物用3%戊巴比妥钠耳缘静脉注射（1 ml/kg）， 麻醉后固定于实验台。在左后肢股三角处沿股血管走行切开皮肤， 暴露股血管鞘， 游离股动脉、静脉及神经， 于腹股沟韧带处用微血管夹夹闭股动脉， 在阻断处以下用张力带环扎后肢以阻断侧枝循环。缺血2 h后取下橡皮带和血管夹， 恢复肢体血供。实验组于再灌注开始即刻从耳缘静脉注射奥扎格雷钠注射液（2 mg/kg）， 对照组从耳缘静脉注射等容生理盐水。 　　1. 2 检测项目及方法 　　1. 2. 1 血清LDH、CK的测定 每组动物分别于缺血前、缺血后2 h、再灌注后1 h和再灌注后3 h， 从左侧股静脉取血样2 ml， 离心、全自动生化分析仪（美国贝克曼CX-4型）测定血清中LDH、CK的含量（U/L）[7]。 　　1. 2. 2 骨骼肌组织湿/干重比值的测定 分别于上述各时间点， 取左侧小块胫前肌， 迅速称其湿重， 放置60℃恒温箱60 h， 称其干重， 计算 湿/干重比值。 　　1. 2. 3 形态结构观察 ①石蜡切片制备及光镜观察：每组任选2只动物， 分离胫前肌， 切成2 cm×1 cm×0.5 cm大小的组织块， 置于包埋盒， 然后置于4%多聚甲醛液中固定6 h以上。常规乙醇梯度脱水、透明， 石蜡包埋， 切片， HE染色， 显微镜下观察， 拍照。②电镜观察超微结构：将上述经多聚甲醛固定的胫前肌切成1 mm3大小的组织块， 置于3%戊二醛固定液中， 4℃过夜。0.1 M 磷酸缓冲液浸洗， 1%锇酸4℃后固定， 常规乙醇梯度脱水；Epon812包埋剂浸透、包埋、聚合；超薄切片（LKB-NOVA超薄切片机）， 透射电镜下观察并摄片（H-7500型透射电镜）。 　　1. 3 统计学方法 采用SPSS17.0统计软件进行统计分析。计量资料用均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料用率（%）表示， 采用χ2检验。P0.05表示差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2. 1 血清中LDH、CK变化 　　2. 1. 1 血清LDH变化 与缺血2 h相比， 再灌注1 h后LDH即明显增高（P0.01）；再灌注即刻注射奥扎格雷钠， LDH增高的程度明显降低（P0.01）。见表1。 　　2. 1. 2 血清CK变化 再灌注1 h后LDH与缺血2 h相比明显增高（P0.01）；实验组， CK明显低于同期对照组（1 h P0.05， 3 h P0.01）。见表2。 　　2. 2 骨骼肌组织湿/干重比值 在缺血前和缺血2 h后， 胫前肌湿/干重比值差异无统计学意义（P0.05）；再灌注1 h、3 h后骨骼肌组织湿/干重比值较同组缺血后2 h明显升高（P0.05）；与对照组相比， 实验组的湿/干重比值明显降低（P0.05）。见表2。 　　2. 3 结构的变化