第七章 蛋白质分分离纯化和表征幻灯片.pptVIP

等电pH并不是一个恒定的值，它会因溶液中盐的种类和离子强度的影响而有所不同。 等离子点(isoionic piont): 蛋白质在纯水溶液中的带电状态则没有其他离子干扰，完全由H+的解离和结合来决定，这种条件下的等电点称为等离子点。等离子点是蛋白质的特征性常数。 二、蛋白质的分子大小与分子量的测定 蛋白质的分子量的范围：6×103～1×106 Da。 （二）渗透压法测定相对分子量 （三）沉降分析测定Mr 在强大的离心场中，如果蛋白质溶液的密度大于溶液密度，溶液中的蛋白质会发生沉降。 沉降速度决定于蛋白质的分子量、分子密度、分子形状和溶剂的密度、粘度。 沉降系数（Ｓ20,w）：单位离心场强度时的沉降速度。定义1Ｓ＝10-13秒（斯维得贝格单位）。 Mr = RTS÷D(1－Vρ) （四）凝胶过滤法测定Mr 凝胶过滤（层析）可按照蛋白质分子量大小进行分离的技术，同时可以测定蛋白质分子量。 （五）SDS法测定Mr 聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高分辨率，用它分离、检测蛋白质混合样品，主要是根据各蛋白质各组分的电泳迁移率的不同。这种差异就蛋白质分子本身而言，主要与其所带净电荷以及分子量和形状有关。 当电泳