容积CT灌注成像技术联合血Toll样受体4检测在急性脑梗死诊治中应用.docVIP

容积CT灌注成像技术联合血Toll样受体4检测在急性脑梗死诊治中应用 　　DOI：10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2015.04.023 　　基金项目：兰州市科技局立项科研（2012-1-33） 　　作者单位：730000 兰州 甘肃省人民医院急救中心（张世魁、杨蓉佳、曲强、李永胜），放射科（马娅琼），脑血管病中心（柴尔青） 　　容积CT灌注成像（CTPI）技术可有效判断脑组织局部低灌注所引起的微循环障碍的程度，了解急性脑梗死后局部血液动力学的变化[1-2]。Toll样受体（toll-like receptors， TLRs）是最重要的固有免疫受体，是介导机体固有免疫转向获得性免疫的桥梁，其成员Toll样受体4（TLR4）生物学作用广泛，参与多种炎症过程，并可调控获得性免疫反应，在急性脑梗死脑损伤的发病机制中起重要作用[3-4]。TNF-α（tumor necrosis factor-α）是体内炎症系统的核心因子，已有研究表明其在急性脑梗死中的作用[5]。本实验将急性脑梗死患者CTPI的结果与TLR4的表达量及血清TNF-α的浓度进行同步观察，旨在探讨CTPI联合实验室检查在急性脑梗死早期诊治中的应用价值。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选择2012年6月至2014年2月在甘肃省人民医院急救中心住院的急性脑梗死患者67例为研究对象。临床诊断均符合全国第4届脑血管病学术会议制定的标准[6]。这些病例均排除以下几种情况：（1）近2周有感染性疾病;（2）伴发恶性肿瘤;（3）伴有免疫性疾病;（4）伴有血液系统疾病;（5）伴有严重的心、肝、肾疾病及糖尿病;（6）患者及家属不同意加入该研究。入院24h内完成临床神经功能缺损程度评分[7]。 　　1.2 研究方法 　　1.2.1 CTPI检查 对入选患者在发病24 h内先进行普通CT扫描，确定感兴趣层面作为动态扫描平面。采用128层容积CT扫描机，经肘静脉快速注入优维显300，注射速度约为5 mL/s，注射剂量为50 mL。在对比剂注射5 s后进行同层动态CT扫描。扫描参数：80 kV，500 mA，扫描速度1层/s，间隔1 s，层厚5 mm，层间隔5 mm，扫描范围80 mm，在所选择的层面共扫描13.6 s，获得选定平面的272张图像，经AW4.4灌注软件处理获得CT灌注图像，并获得脑血容量（BV）、脑血流量（BF）、平均通过时间（MTT）等参数数值。 　　1.2.2 外周血单个核细胞（PBMC）膜表面中TLR4表达量的检测 入选患者在清晨空腹抽取静脉血5 mL，分别于试管中依次加入APC-anti-CD14抗体10 μL，PE-anti-TLR4抗体10 μL，EDTA抗凝全血100 μL，震荡充分混匀，按常规方法室温、避光孵育30 min;然后加溶血素2 mL溶血，10 min，然后以离心半径10 cm、3 000 r/min离心10 min;以PBS洗涤2次后，再以PBS配成约10lt;supgt;6lt;/supgt;个/mL液，然后用美国BD公司BD FACS Calibur流式细胞仪检测。 　　1.2.3 血清TNF-α检测 入选患者在清晨空腹抽取静脉血3 mL， 立即在4℃条件下以离心半径10 cm、3000 r/min离心10 min，分离血清，-70℃冰箱冻存，采用双抗体夹心ELISA法检测TNF-α水平， 试剂盒为加拿大YES BIOTECH Laboratories LTD的Human TNF-αELISA试剂盒。 　　1.3 统计学方法 　　全部数据采用SPSS 13.0统计软件处理，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用成组t检验，两两相关分析采用Pearson相关分析。以P0.05为差异具有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 24 h内CT平扫结果与CTPI结果对比 　　对入选的67例患者在发病24 h内进行普通CT扫描，有38例显示低密度区，均为责任病灶，29例未见异常，CT平扫对早期急性脑梗死诊断的阳性率为56.72%。CTPI在24 h内有56例发现脑内有灌注异常区，11例灌注正常，CTPI对早期急性脑梗死诊断的阳性率为83.58%。67例患者在发病3d内行头部MRI检查，均证实为急性脑梗死患者。 　　2.2 CTPI检查异常者其病灶侧与健侧的各参数值比较 　　CTPI检查异常者显示病灶中心与健侧脑实质相比，其BF值明显下降（P0.05）。见表1。 　　2.3 CTPI各参数值与TLR4、TNF-α的Pearson相关分析 　　CTPI中BF值与TLR4表达量存在负相关（r=-0.209，P0.05），与TNF-α亦无相关性（r=-0.065，P0.05