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Sox10和Nestin在白癜风皮损内 毛囊中的表达及意义-皮肤病与性病学专业论文
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学位论文作者: 日期: 年 月 日
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学位论文作者: 日期: 年 月 日
摘
摘 要
Sox10 和 Nestin 在白癜风皮损内毛囊中的表达及意义
硕士研究生:赵冰洁 导 师:张江安
郑州大学第一附属医院皮肤性病科 郑 州 450052
摘 要
研究背景与目的
白癜风(vitiligo)是一种常见的、获得性的皮肤黏膜色素障碍性疾病。对 患者的精神心理和社交方面等产生巨大负面影响。其发病机制至今不明。包括 脱色和复色机制两方面。近年来对白癜风的研究绝大多数集中于前者。但对于 和脱色机制同等重要的复色机制研究则少见报道。探明白癜风的复色机制则需 提到其复色模式。
在临床观察中,白癜风的复色模式分为四种:(1)毛囊周围复色模式(点状 型);(2)边缘型;(3)均一型;(4)混合型。毛囊周围复色模式提示复色 的黑素细胞来自毛囊。近年来研究已证实复色的黑素细胞源于毛囊的隆突区。 该部位存在着一个黑素细胞储库。新近研究发现,毛囊隆突内存在神经嵴来源 的多能性干细胞,这种细胞亦称为表皮神经嵴干细胞(Epidermal neural crest stem cells,EPI-NCSCs)。EPI-NCSCs 可表达 Sox10、Nestin、Bmi-1 等多种干 细胞标记,能够进行自我更新,一定条件下可分化成黑素细胞。
基于此,我们提出假说,白癜风患者毛囊周围复色可能是 EPI-NCSCs 活化、 增殖、移行和分化所致。欲证实该假说,需首先证实毛囊隆突区是否存在 EPI-NCSCs,该问题目前国内外文献尚未见报道。既往采用传统的皮损组织切片 定位毛囊隆突和鉴定神经嵴干细胞,但是这需要连续切片,且难以呈现完整毛 囊。为此,以体外分离的单个毛囊为研究对象,采用免疫组化法检测 Sox10 和 Nestin 在白癜风毛囊上的表达,以初步证实白癜风毛囊存在 EPI-NCSCs。
I
材料与方法
1.收集标本 来自于郑州大学第一附属医院整形外科、神经外科等手术中的 头皮组织,皮肤科白癜风患者行手术或病检后的头皮组织。白癜风皮损组织至 少一月内未局部外用药等治疗。
2.分组 将收集的人毛囊分为两组,即无色素障碍性皮肤病的正常毛囊组(对 照组)、白癜风皮损毛囊组(实验组)。
3.方法 采用中性蛋白酶(Dispase II)消化法分离人单个毛囊,对毛囊行 HE 染色,后采用免疫组化检测各组毛囊中 Sox10、Nestin 的表达。
4.统计学分析 采用 SPSS17.0 软件行统计学分析,P 0.05 表示差异有统计 学意义。
结果
1.毛囊的 HE 染色 在显微镜下可观察到毛干、外毛根鞘、内毛根鞘、毛乳头 和毛基质等。与外根鞘延续,向外略为隆起,属于毛囊隆突区,细胞排列紧密, 大小一致,细胞核大而明显,与周围细胞的形态不同。
2.Sox10 及 Nestin 在对照组和实验组均有不同程度阳性表达,Sox10 阳性的 细胞着色于干细胞的细胞核,在毛囊外毛根鞘细胞可见阳性表达;Nestin 阳性 的细胞染色于干细胞的胞浆。
3. Sox10 和 Nestin 白癜风白斑区毛囊组和正常对照组毛囊染色的细胞分布 及数量比较均无差别(P0.05)。
结论
1.白癜风皮损内毛囊中存在 Sox10 和 Nestin 阳性表达细胞,初步证实白癜 风皮损内毛囊中存在神经嵴干细胞。
2.相对于传统的皮损组织切片,体外分离的单个毛囊更易证实毛囊隆突处和 神经嵴干细胞的存在。
关键词 表皮神经嵴干细胞;白癜风;Sox10;Nestin;复色
II
Abstract
Abstract
Expression and significance of Sox10 and Nestin
in hair follicles of vitiligo
Post graduate: Bingjie Zhao Supervisor:
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