TR注射液长期毒性评价和神经毒性机制研究-预防医学·卫生毒理学专业论文.docx

TR TR 长期毒性和神经毒性机制研究 第二军医大 第二军医大学硕士学位论文 - - - - 摘 要 第一部分 TR 长期毒性研究 目的：观察 TR 注射液连续给药大鼠和 Beagle 犬后对机体产生的毒性反应及其严 重程度、主要毒性靶器官及损害的可逆性，找到无毒性反应剂量，为临床设计人用剂 量和主要观察指标提供参考。方法：健康 SD 大鼠 80 只按体重随机分为 0、25、50、 100 mg/kg 四个剂量组，每组 20 只，雌雄各半，腹腔注射；健康 Beagle 犬 26 只按体 重分为 0、5、15、45 mg/kg 四个剂量组，其中 0、5、15 mg/kg 组每组 6 只动物、45 mg/kg 组 8 只动物，雌雄各半，静脉注射给药。每周周一至周六给药，连续给药 90 天，恢复期为 30 天。在给药后 1 小时内监测动物的一般症状及相关指标如食量、体 重、呼吸、肛温、瞳孔等。大鼠在给药后第 90 天（d90, 停药期）和第 120 天（d120, 恢复期）每组各 1/2 大鼠采血测定各组动物的红细胞计数、血红蛋白定量、红细胞压 积、红细胞平均容积、红细胞平均血红蛋白容量、红细胞平均血红蛋白浓度、血小板 计数、白细胞计数、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细 胞、大未染色细胞、网织红细胞计数、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血 酶时间及血浆纤维蛋白原等血液学指标以及测定血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨 基转移酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、总胆红素、尿素氮、肌酐、总蛋白、白蛋白、 血糖、总胆固醇、甘油三脂、肌酸磷酸激酶，血清钙、磷、血清钾、钠和氯等血液生 化指标。犬在给药前、给药后第 45 天、第 90 天和第 120 天检测心率、P 波电压、P-R 间期、R 波电压、QRS 时间、ST 段、T 波电压和 QT 间期等心电图指标；红细胞计 数、血红蛋白定量、红细胞压积、红细胞平均容积、红细胞平均血红蛋白容量、红细 胞平均血红蛋白浓度、血小板计数、白细胞计数、白细胞分类 、中性粒细胞、淋巴 细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、大未染色细胞、网织红细胞计数、 凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间及血浆纤维蛋白原等血液学指标； 血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、总胆红素、 尿素氮、肌酐、总蛋白、白蛋白、血糖、总胆固醇、甘油三脂、肌酸磷酸激酶，血清 钙、磷、血清钾、钠和氯等血液生化指标；测试尿液葡萄糖、蛋白质、胆红素、尿胆 原、pH、比重、红细胞、酮体、亚硝酸盐和白细胞等尿液指标。在给药后第 90 天和 第 120 天分别对每组各 1/2 的动物剖检，进行组织病理学检查及骨髓细胞计数分类。 结果：1. TR 注射液 25 ~ 100 mg/kg 连续 ip 大鼠 90 天毒性试验：(1)100 mg/kg 剂量时 对雌性大鼠体重增长有轻微影响。(2) 对大鼠血液学指标未见明显影响。(3) 100 mg/kg 剂量时可使雌性大鼠 d90 的肌酐明显升高。(4)对骨髓系统无明显毒性作用。(5)对大 鼠主要脏器的绝对重量和相对重量无明显影响。未观察到药物对心、肝、肾、肺、脑 等实质器官有显著的毒性作用。(6)对给药部位无局部刺激作用。2. TR 注射液 5 ~ 45 mg/kg iv Beagle 犬 90 天毒性试验：(1)剂量达 45 mg/kg 时，给药期间动物四肢僵直、 站立不稳、侧卧、流涎、呕吐（胃内容物）、排便、部分动物嚎叫、角弓反张（2 只）， 逐渐安静，1 h 左右均可恢复。提示 TR 对动物消化系统、神经系统和内分泌系统有 毒副作用，但作用可逆。药物对 Beagle 犬体重、肛温、呼吸和瞳孔无明显影响。(2) 对 ECG 无明显影响。(3)对血液学指标无明显影响。(4)对血液生化指标无明显影响。 (5)对尿液指标无影响。(6)对骨髓系统无明显毒性作用。(7)病理学检查未发现药物对 Beagle 犬有明显毒性损伤的形态学证据，无明显血管和肌肉刺激性。结论：（1）TR 注射液 25 ~ 100 mg/kg 连续 ip 大鼠 90 天，安全剂量为 50 mg/kg，毒性剂量为 100 mg/kg，毒性靶器官为消化系统和泌尿系统(肾脏)，但毒性作用均为功能性的且可逆； （2）TR 注射液 5 ~ 45 mg/kg iv Beagle 犬 90 天，中毒剂量为 15 mg/kg, 严重中毒剂 量为 45 mg/kg, 毒性靶部分为消化系统、神经系统和内分泌系统，但毒性作用均为功 能性的且作用可逆。 关键词：TR, 毒性靶器官，长期毒性，安全剂量，中毒剂量 第二部分 TR 神经毒性机制研究 目的：结合 TR 注射液 90 天 Beagl