VEGFR1阳性造血祖细胞在大肠癌肝转移中的作用-肿瘤学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 VEGFR1 阳性造血祖细胞在大肠癌肝转移中的作用 摘要 研究背景及目的 大肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤，其发病率呈逐年上升的趋 势。远处转移是导致大肠癌患者死亡最主要的原因之一，其中肝脏是 远处转移的主要靶器官，大约 20% ~ 25%的大肠癌患者在原发肿瘤检 出的同时已并发有肝转移；即使是根治术后，亦有 8% ~ 30%的患者 将出现肝转移，8% ~ 10%的患者出现肺转移，因此早期发现和防治 远处转移是提高大肠癌患者生存率的关键因素之一。研究表明，肿瘤 的转移是一个多步骤发生、多因素参与、多环节调控的复杂过程，目 前虽然关于肿瘤转移的研究在逐渐深入，但对肿瘤转移的确切分子机 制仍然不甚清楚，尤其是肿瘤的器官特异性定向转移，即归巢性转移 的机理和调控仍然是研究的热点和难点。 2005 年 Kaplan 等 首 次 报 道 了 VEGFR1 阳 性 造 血 祖 细 胞 （ VEGFR1+ Hematopoietic Progenitor Cell,VEGFR1+ HPC ） 即 VEGFR1+ CD133+ 双阳性细胞簇，在肿瘤的定向转移中起着重要的作 用。研究表明，在肿瘤转移发生前，VEGFR1+ HPC 先于肿瘤细胞到 达预转移部位，改变靶器官的微环境以适应肿瘤细胞的生长，并进一 步通过特定的配体-受体结合引导肿瘤细胞到达靶器官形成转移灶。 本文通过观察 VEGFR1+ HPC 在人大肠癌组织及转移灶中的分布表 达，探讨 VEGFR1+ HPC 与大肠癌转移的关系；进一步，建立大肠癌 细胞移植肝转移动物模型，动态观察在转移发生过程中肿瘤组织、肝 脏、及骨髓中 VEGFR1+ HPC 的含量变化，探讨 VEGFR1+ HPC 在大 肠癌定向肝转移中的作用。 方 法 1. 临床研究：选择四川省肿瘤医院 2006 年 ~ 2011 年收治的大 肠癌并发肝转移行同期或分期切除且保存完整的手术标本 37 例，以 及非肿瘤性肠段切除患者 6 例作为研究对象，应用免疫组织化学染色 检测 VEGFR1、CD133 在大肠癌及转移淋巴结、无转移淋巴结、肝 脏转移灶和非肿瘤性淋巴结中的表达分布情况，以同蜡块的癌旁组织 作为对照。 2. 动物实验：首先采用人结肠癌细胞 HCT-116 肿瘤组织行盲肠 原位瘤块包埋法构建大肠癌原位移植肝转移模型；在该模型的基础 上，分别于瘤块接种前及接种后 2 周、4 周、6 周、8 周处死小鼠， 以 免 疫 组 化 学 染 色 法 检 测 肿 瘤 组 织 及 肝 转 移 灶 ( 或肝组织 ) 中 VEGFR1、CD133 的表达，应用流式细胞术定量检测肝脏、及骨髓中 VEGFR1+ HPC（即 VEGFR1+ CD133+ 双阳性细胞）的含量变化。 结 果 1. 在大肠癌组织、癌旁组织中均可发现 VEGFR1+ HPC 细胞簇， 且大肠癌组织阳性率明显高于癌旁组织(P 0.05)；在肝脏转移组织 中，VEGFR1+ HPC 呈高表达，阳性率也显著高于癌旁组织(P 0.05)； 在 6 例非肿瘤性淋巴结中未见 VEGFR1+ HPC 细胞，而在大肠癌转移 淋巴结、无转移淋巴结中均可发现 VEGFR1+ HPC 阳性细胞簇，主要 位于淋巴结边缘的被膜下、边缘窦附近。转移淋巴结多呈片状的强阳 性或阳性表达，而非转移淋巴结多呈散在的点状、灶状阳性或弱阳性 分布，且转移淋巴结组阳性率高于非转移组 (P 0.05)。 2. HCT-116 人结肠癌细胞瘤块盲肠原位移植后 2 周、4 周、6 周、 8 周处死裸鼠后解剖发现，盲肠部位均有肿瘤形成，直径 1 ~ 3.5 cm 大小不等，缘肠管呈侵润性生长。在种植后 2 周、4 周，未发现有肝、 肺、脾等处转移病灶形成；种植后第 6 周，开始出现肝转移，部分有 还同时伴有肺转移、脾脏转移、或腹腔转移。 3. 动物模型中免疫组化检测显示，在瘤块接种前裸鼠肝脏没有 VEGFR1+ HPC 细胞簇；在接种后 2 周、4 周肝转移灶形成前，肝脏 就可见少量 VEGFR1+ HPC 细胞簇出现，呈点状、灶状分布，主要分 布于汇管区附近；在接种后 6 周、8 周出现肝脏、脾脏、肺脏等处转 移时，VEGFR1+ HPC 细胞较前明显增多，呈片状分布，主要位于转 移灶、癌旁组织、肝脏汇管区等处。 4. 流式细胞术检测显示，在瘤块接种前、接种后 2 周、4 周、6 周、8 周，肝脏、骨髓中 VEGFR1+ HPC 细胞数目均逐次递增，组间 统计有显著差异（P 0.05）。 结 论 1. 在大肠癌原发灶及肝脏转移灶中 VEGFR1+ HPC 表达明显高 于癌旁组织；转移淋巴结及非转移淋巴结中均可见 VEGFR1+ HPC 表 达，但转移淋巴结 VEGF