VEGF及其RNAi对B系淋巴瘤细胞影响的实验研究-病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

目 录 VEGF 及其 R N A i 对 B 系 淋 巴 瘤 细 胞 影 响 的 实 验 研 究 … … … … 1 中文摘要 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 1 A B S T R A C T … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 2 英汉缩略词对照表……………………………………………………………3 前言 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 4 1 材料与方法 ……………………………………………………… 8 2 结果 … … ……… … …… …… … …… … …… …… … …… … ……… 19 3 讨论 ………………………………………………………………… 2 5 4 结论 ………………………………………………………………… 29 参 考 文 献 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 3 0 综述…………………………………………………………………………… 34 攻读学位期间发表的学术论文目录…………………………………………58 致谢……………………………………………………………………………59 PAGE PAGE 1 VEGF 及其 RNAi 对 B 系淋巴瘤细胞影响的实验研究 中 文 摘 要 目的：应用 RNA 干扰(RNAi)技术抑制 B 系恶性淋巴瘤细胞株中血管内皮生 长因子(VEGF)的表达，研究 VEGF 对 B 系恶性淋巴瘤生物学行为的影响。 方法：根据靶基因序列设计的原则，设计三对针对 VEGF 的 siRNA 序列， 经脂质体 Lipofectamine 2000 转染至 B 系恶性淋巴瘤细胞 Namalwa 细胞。 镜下观察转染效率，采用 RT-PCR、Western blot 方法检测转染后 B 系恶性 淋瘤细胞中 VEGF mRNA 和蛋白的表达，用 Transwell 侵袭小室模型、MTT 观察转染后 B 系侵袭性淋巴瘤 Namalwa 细胞恶性生物学行为的变化。结果： 在所设计的三对靶位点 siRNA 序列中只有 siRNA-2 组与阴性对照序列组 siRNA 以及正常组两两相比有统计学意义（p0.01）,明显抑制 Namalwa 细 胞的侵袭能力, 使 VEGF mRNA 及其蛋白的表达明显减少; 而作为阴性对 照序列组 siRNA (siRNA-NC)组以及正常组则没有上述效应。结论：通过 RNAi 技术阻断 VEGF 的表达，可抑制 Namalwa 细胞的生物学行为，降低 Namalwa 细胞的侵袭能力，进一步证实了 VEGF 在 B 系恶性淋巴瘤的发生、 发展过程中起到重要作用。利用 RNA 干扰(RNAi)技术对 B 系恶性淋巴瘤进 行临床肿瘤基因治疗具有参考意义。 关键词：RNA 干扰; Namalwa 细胞; 血管内皮生长因子; 基因治疗 Effect of VEGF gene blocked by RNAi on B cell malignant lymphoma Objective: To explore the effect of RNA interferencemediated vascular endothelial growth factor (VEGF) gene silencing on biological behavior of Namalwa cells. Methods : Three specific siRNAs targeting to VEGF were synthesized and transfected into B cell malignant lymphoma Namalwa cells by lipofectamine2000,according to the principle of target sequence of siRNA.After dssiRNA was transfected into Namalwa cells with Lipofectamine, the proliferative and invasive ability of Namalwa cells was evaluated by transwell migration assay and MTT. The expression of VEGF on mRNA and protein level was analyzed by RT-PCR and Wes