β 防御素 2在唾液腺肿瘤及炎症组织中的表达及调控-外科学专业论文.docxVIP

硕士研究生学位论文 硕士研究生学位论文 I I 中文摘要 目的 本实验研究人β-防御素-2（human beta-defensin-2，HBD-2）在唾液腺良恶性肿瘤和 炎症组织中的表达特征及其与临床病理学参数之间的关系，并培养ACC-M涎腺肿瘤细胞， 观察检测HBD-2的表达特征，研究可能对其产生调控的基因，初步探讨其在唾液腺肿瘤细 胞生物学中的作用及机制。 方法 RT-qPCR、免疫组化方法检测 HBD-2 mRNA 和蛋白在唾液腺良恶性肿瘤组织、炎 症组织和正常唾液腺组织中的表达，分析免疫组化结果与唾液腺恶性肿瘤临床病理学参数 的关系。前期试验结果显示 mPGES-1 可能与 HBD-2 的表达有关，由于 PGE2 分泌与 mPGES-1 正相关，所以我们选择研究 PGE2 是否为 HBD-2 的调控基因。通过培养人涎腺 癌细胞 ACC-M，用不同浓度的 PGE2 分别处理细胞后 RT-qPCR 方法检测 HBD-2 表达，了 解 PGE2 分泌与 HBD-2 表达的关系。 结果 RT-qPCR结果显示, 与唾液腺正常组织比较，良性肿瘤组HBD-2 mRNA表达量为其 6.468倍，显著高于涎腺正常组织组（p0.05）；恶性肿瘤组为0.334倍，显著低于涎腺正常 组织组（p0.05）；唾液腺炎症组为10.563倍，显著高于唾液腺正常组织组（p0.05）。良 性肿瘤组mPGES-1 mRNA表达量为正常组织的0.896倍，差异无显著性（p 0.05）；恶性 肿瘤组为8.326倍，显著高于涎腺正常组织组（p0.05）；涎腺炎症组为11.581倍，显著高 于涎腺正常组织组（p0.05）。免疫组化结果显示，在唾液腺癌患者中，HBD-2表达与淋 巴转移和TMN分期相关，与患者肿瘤大小、分化程度、年龄、性别等无关。用不同浓度PGE2 处理肿瘤细胞，10 nmol/ml组HBD-2表达量为对照组的1.142倍，差异无显著性（P0.05）； 50 nmol/ml组HBD-2表达量为对照组的2.364倍（P0.05）；100nmol/ml组HBD-2表达量为 对照组的11.917倍（P0.05）；200 nmol/ml组HBD-2表达量为对照组的13.114倍（P0.05）； 1μmol/ml组HBD-2表达量为对照组的0.453倍（P0.05）。 结论 良性肿瘤组中 HBD-2 高表达，mPGES-1 表达无明显差异；恶性肿瘤组中 HBD-2 低 表达，mPGES-1 高表达；炎症组中 HBD-2 和 mPGES-1 均为高表达。HBD-2 的表达与淋 巴转移和 TMN 分期相关，与患者肿瘤大小、分化程度、年龄、性别等临床病理因素无关。 较低浓度（50-200nmol/ml）PGE2 能上调 HBD-2mRNA 表达，高浓度（1μmol/ml）PGE2 抑制 HBD-2mRNA 表达。 关键词 β-防御素-2；涎腺肿瘤；涎腺炎症；mPGES-1；PGE2 II II Abstract Objective: This study was designed to evaluate the expression of HBD-2 and mPGES-1 in human normal salivary gland, salivary gland tumor and inflammation salivary gland tissuses, and determine their relationships and correlations with clinicopathologic parameters of salivary gland cancer, and to study the regulation of HBD-2 expression by PGE2. Methods: The expression of HBD-2 in salivary gland benign tumor, salivary gland cancer, inflammation salivary gland tissuses and normal salivary gland tissuses were detected by RT-qPCR and immunohistochemical staining. Then their relationships and correlations with clinicopathologic parameters of salivary gland cancer were analyzed. The expression of HBD-2 mRNA was evaluated by