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油棕体细胞胚诱导和次生胚增殖研究 　　摘 要 油棕体细胞胚的诱导是油棕体胚发生技术体系中最关键的培养过程，通过建立油棕次生胚增殖培养方法可有效地实现油棕组培苗快速的增殖繁育。本研究通过系统的对油棕体细胞胚发生及次生胚再生途径中若干影响因子的比较研究，建立油棕体细胞胚和次生胚再生体系。结果表明：油棕体细胞胚再生体系在不同基因型的油棕品种内诱导率存在较大差别，其中植物外源激素二氯苯氧乙酸（2，4-D）对油棕胚诱导效果较好；油棕次生胚增殖在不同基因型的油棕品种内差异不显著，木本植物培养基（WPM）在油棕次生胚增殖中培养效果最好。 　　关键词 油棕 ；体胚发生 ；胚状体 ；次生胚 　　中图分类号 S565.9 文献标识码 A Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2016.08.006 　　Abstract Induction of oil palm somatic embryogenesis is the most critical cultural process in oil palm tissue culture. Rapid proliferation of oil palm can be effectively realized through the establishment of oil palm secondary embryogenesis regeneration in tissue culture. Several factors that affecting induction of oil palm somatic embryos and regeneration of secondary embryogenesis were compared systematically to establish a secondary oil palm somatic embryo regeneration system. The results showed that there is great difference in induction rate of somatic embryogenesis between different oil palm genotypes， and the woody plant medium （WPM） is the best basic medium in proliferation of oil palm secondary embryos. 　　Keywords oil palm ； somatic embryogenesis ； embryo ； secondary embryogenesis 　　油棕是世界上重要的热带木本油料作物，通过组培可对获得的优良单株进行快速繁殖，从而大幅度缩短育种、育苗时间。次生胚发生途径是指由原始体胚细胞（originally formed somatic embryos）或者初生胚状体（primary somatic embryos）发育获得体细胞胚的植物再生途径，许多植物在通过体胚发生途径获得离体再生植株过程中，初生体细胞胚的萌发率非常低，远远低于次生胚状体的萌发率。因此通过建立高频的次生胚状体途径获得离体再生植株的研究在单子叶和双子叶植物组织培养技术研究中都有广泛的报道。李洪清等[1]以木薯成熟的胚状体子叶为外植体材料建立次生胚再生体系，每个外植体材料可获得32.5个次生胚状体。孙艳香等[2]以苜蓿无菌苗下胚轴为外植体材料建立次生胚再生体系，筛选获得2个具有较强次生胚发生能力的株系。Giridhar等[3]以咖啡的叶片和茎为外植体材料建立植株再生体系，通过MS培养基添加三十烷醇成功获得高频的咖啡的次生胚。油棕组织培养技术最早由法国科学家Rabechault等[4]于1976年研究获得成功，随后在东南亚地区、南美洲地区的多家研究机构和公司有成功的报道[5]。目前马来西亚、印度尼西亚、哥斯达黎加等国已经开始油棕组培苗的商业化生产[6]。在20世纪80年代中国已有开展油棕组织培养相关的研究。崔元芳等[7]以油棕胚为外植体材料获得愈伤组织并建立植株再生体系。龚峥等[8]以油棕叶片为外植体材料成功获得愈伤组织。邹积鑫等[9]以油棕叶片为外植体材料建立植株再生体系并获得完整植株。虽然目前国内相关的研究已经取得了较大进展，但尚未得到广泛的应用和系统的研究，特别是不同油棕单株的体胚发生效率不一致，影响植株再生频率较低。鉴于此，本研究以前期建立的油棕离体再生体系为基础，对油棕3个品系优株的胚状体诱导及次生胚的增殖开展研究，旨在筛选获得最佳的油棕体胚及次生胚的增殖方法。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料