不同光强和氮源条件下类波氏真眼点藻的生长、油脂积累和尿素代谢规律分析-水生生物学专业论文.docx

暨南大 暨南大学硕士学位论文 暨南大 暨南大学硕士学位论文 PAGE PAGE VI III III 光照强度、氮源种类及浓度都会对类波氏真眼点藻细胞内的脂类组成产生影响， 高光强下该藻细胞内中性脂的积累速度要快于低光强下的积累速度。氮源种类对 该藻中性脂含量的影响并不明显，不同氮源种类下中性脂的差别只有 0.27%～ 5.84%；该藻中性脂含量随着氮源浓度的降低而升高，糖脂及磷脂则相反。 (4) 类波氏真眼点藻细胞内的主要脂肪酸为棕榈酸（ C16:0）、棕榈油酸 （C16:1）、硬脂酸（C18:1）以及二十碳五烯酸（C20:5），高光强及低氮源浓度 可以促进该藻合成 C16:1，而低光照及高氮源浓度可以促进该藻合成 EPA，EPA 在培养的前期积累最多，同时，高光强下硝酸钠组的最高脂肪酸含量（绝对含量） 为 3.6 mmol/L 浓度下的 62.79%，尿素组的最高脂肪酸含量（绝对含量）为 1.8 mmol/L 浓度下的 70.55%，低光强下硝酸钠组的最高脂肪酸含量（绝对含量）为 3.6 mmol/L 浓度下的 60.30%，尿素组的最高脂肪酸含量（绝对含量）为 1.8 mmol/L 浓度下的 54.68%。适宜该藻合成 EPA 的条件为―低光—尿素氮源—9 mmol/L 浓 度—第 6 天‖，这时该藻 EPA 的最大积累量（相对含量）为 26.33%。 (5) 类波氏真眼点藻对尿素的吸收速率和培养基中的尿素浓度的关系符合 Michaelis–Menten 方程(米氏方程)，其最大吸收速率 Vm=8.42 mg/h，半饱和参数 Ks=1464.34，是一个具有很高的 Ks 的饱和动力学模型，同时，该藻在氮饥饿后 对尿素的吸收并不敏感，而是在整个培养过程中都在缓慢吸收，区别于在短时间 内将所有氮源全部吸收而后再缓慢利用的藻类。 (6) 类波氏真眼点藻细胞内的脲酶活性在开始培养后的第 48 h 达到最高峰， 此时的酶活力为 0.116 μmol·mg-1·h-1，而后逐渐下降，其变化幅度在培养的前 72 h 最为明显，后趋于稳定。 (7) 类波氏真眼点藻细胞内脲酶由两条序列进行编码，151 序列编码脲酶基 因 α 大亚基，长度 1018bp，55016 序列编码脲酶基因 β 及 γ 小亚基，长度 562bp； 进化树分析显示类波氏真眼点藻 α 大亚基的编码序列与普林藻门和硅藻门的同 源性高，而 β 及 γ 小亚基的编码序列则与烟曲霉菌的同源性高。该藻的脲酶基因 是诱导表达的，脲酶基因的表达量在加入尿素进行培养后的第 96 h 达到最高峰， 为对照的 3.27 倍。 （8）改进了实验室的一种微藻培养光生物反应器，优化后的反应器可以使 实验的平均工作时间缩短至原来的 50%左右。 关键词：类波氏真眼点藻、光照、氮源浓度、生物量、总脂含量、脂肪酸、尿素 吸收、脲酶 The pattern of growth, lipids accumulation and urea metabolism in Eustigmatos cf. polyphem under the different light and nitrogen regimes Abstract Eustigmatos cf. polyphem is a algae affiliated in Eustigmatophyceae. Eustigmatos cf. polyphem is a algae which isolated from soil before. It can accumulate large amounts of lipid in later stage of culture time.It also can accumulate eicosapentaenoic acid (EPA) and β-carotene which has profound benefits and function in dietetics and therapeutic uses in different stage of culture time.All this can indicate that Eustigmatos cf. polyphem has high Potential to product biodiesel. While, on one hand, this paper studied the effect of light intensity, nitrogen species and nitrogen concentration on the growth,total lipid content,total lipid component