参麦注射液对急性缺血性脑卒中大鼠脑可塑性影响的研究-中西医结合专业论文.docx

成都中医药大学博士学位论文 成都中医药大学博士学位论文 - - PAGE 3 - 中文摘要 目的 探讨参麦注射液对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑梗死灶周围大脑皮质可塑性的影响 及其作用机制。 方法 取健康 Sprague-Dawley 大鼠 264 只，雌雄各半，随机抽取空白组、假手术组各 6 只大鼠，其余大鼠采用栓线法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，造模成功的大鼠随机 分入模型组、三七皂苷对照组和参麦注射液低、中、高剂量治疗组，每组分 3、7、14 天三个时间段，每组每段 6 只大鼠，观察以下指标：①神经行为学观察：Bederson 评 分、肌力测定、平衡木实验评分；参麦注射液不同剂量与术后不同时间点 Bederson 评 分的回归分析；②HE 染色后光镜下观察病理形态学变化，电镜下观察神经元及突触超 微结构，免疫组化染色观察 GAP-43 蛋白和 SYP 蛋白阳性表达情况，并分别作与 Bederson 评分的相关性分析；③RT-PCR 方法检测 BDNF mRNA 和 Nogo-A mRNA 表达，并分别作与 Bederson 评分的相关性分析。 结果 ①Bederson 评分：造模各组在术后第 1 天，Bederson 评分均高于假手术组，差异 有极显著性（P＜0.01）；术后 3 天，参麦注射液各剂量组评分低于模型组，但尚无统 计学差异（P0.05）；术后 7 天，参麦注射液中、高剂量组与模型组比较有显著差异 (P0.05)；术后 14 天，参麦注射液中剂量组大部分鼠已恢复到假手术组的功能状态， 与模型组及三七组比较均有显著差异(P0.05)。②肌力评定：术后第 3 天，各造模组大 鼠肌力开始恢复，参麦注射液中剂量组评分已高于其余各组，差异有显著性（P＜0.05）， 术后 7 天各用药组肌力较模型组有明显改善（P＜0.05），尤其参麦注射液中剂量组改 善最明显，与模型组比较差异有极显著性（P＜0.01）；术后第 14 天，参麦中、高剂 量组肌力已恢复正常，与模型组比较差异有极显著性（P＜0.01）。③平衡木试验：术 后 7d，参麦注射液中、高剂量组得分明显低于其它实验组，差异有显著性（P＜0.05）； 术后 14d 时，参麦注射液中、高剂量组得分均明显低于模型组（P＜0.01），其中参麦 注射液中剂量组改善最明显，得分低于三七组（P＜0.05）。④多分类 Logistic 回归分 析：经处理得到参麦注射液不同剂量和术后不同时间点 Bederson 评分的线性预测方程， 剂量、恢复时间点回归系数均为正值，且其回归系数经假设检验均有统计学意义 （p0.05，p0.01）。⑤电镜结果：造模后 14 天参麦注射液组脑梗死灶周围大脑皮质 的突触数目大于模型组，差异有显著性（P0.05），其突触后膜致密物厚度大于模型组 （P0.01）和三七组（p＜0.05），与假手术组差异无显著性（p＞0.05）。⑥GAP-43 阳性表达：术后 3 天，参麦注射液各剂量组较模型组均升高，差异有显著性（p0.05）； 术后 7 天时，各组 GAP-43 表达均呈下降趋势，参麦注射液各组与三七组均高于模型组， 差异均有极显著性(PO.01)；术后 14 天，参麦注射液中、高剂量组 GAP-43 表达水平仍 高于模型组(p0.05)，三七组已接近模型组水平（p＞0.05）。⑦SYP 阳性表达情况： 术后 7 天，参麦注射液各剂量组 SYP 表达显著高于模型组(PO.01)；术后 14 天，参麦 各 剂 量 组 SYP 表 达 仍 显 著 高 于 模 型 组 (PO.01) ， 其 中 参 麦 中 剂 量 组 高于三七组 (PO.05)。⑧BDNF mRNA 表达：术后 3 天，参麦注射液组 BDNF mRNA 表达高于模型组， 差异有极显著性（p0.01）；术后 7 天时，各组 BDNF mRNA 表达均呈下降趋势，与模型 组比较参麦注射液组与三七组均处于较高水平(PO.01)；术后 14 天，参麦注射液组 BDNF mRNA 表达水平仍显著高于模型组(p0.01)，三七组已接近模型组水平（p＞0.05）。⑨ Nogo-A mRNA 表达：术后 3 天参麦注射液组 Nogo-A mRNA 表达即低于模型组，差异有 显著性(PO.05)；术后 7 天，参麦注射液组 Nogo-A mRNA 表达仍低于模型组(PO.05)； 术后 14 天，参麦注射液组与三七组及模型组 Nogo-A mRNA 比较均无差异(P＞O.05)。⑩ 等级相关分析：术后 3 天，神经功能恢复与 GAP-43 表达成正相关（p0.01），与 SYP 表 达不相关（p＞0.05），与 BDNF mRNA 表达成正相关（p0.01），与 Nogo-A mRNA 表达成 负相关（p0.01）；