嗅三针对ad海马区胆碱能系统代谢的干预效应研究-intervention effect of olfactory three on cholinergic system metabolism in ad hippocampus.docxVIP

摘 要 目的：本研究将通过在保留和切断嗅觉通路情况下，观察 AD 模型大鼠的行为学 能力变化、胆碱能系统神经递质活性、受体含量及其 mRNA 的表达，揭示“嗅三针” 对 AD 大鼠行为学及病理的改变和对海马区中枢胆碱能系统的调节作用.证实嗅觉通 路是“嗅三针”对 AD 海马区胆碱能系统代谢的干预效应研究的主要途径，阐明“嗅 三针”通过嗅觉通路治疗 AD 的分子机制。 方法：选用 60 只 SD 大鼠随机分为 6 组（每组 10 只）：Ⅰ组（对照组）：于颅顶 如 AD 造模方法中钻孔注无菌生理盐水后即缝合皮肤，术后 4 周如嗅神经切断术中颅 顶钻孔后即缝合皮肤，再行常规饲养 4 周后检测相应指标。Ⅱ组（AD 模型组）：于 颅顶如 AD 造模方法中钻孔注 Aβ-淀粉样肽后即缝合皮肤，术后 4 周如嗅神经切断 术中颅顶钻孔后即缝合皮肤，再行常规饲养 4 周后检测相应指标。Ⅲ组（嗅神经切 断组）：于颅顶如 AD 造模方法中钻孔注无菌生理盐水后即缝合皮肤，术后 4 周行嗅 神经切断术，再行常规饲养 4 周后检测相应指标。Ⅳ组（AD 模型+嗅神经切断组）： 于颅顶如 AD 造模方法中钻孔注 Aβ-淀粉样肽后即缝合皮肤，术后 4 周行嗅神经切 断术，再行常规饲养 4 周后检测相应指标。Ⅴ组（AD 模型+嗅三针组）：于颅顶如 AD 造模方法中钻孔注 Aβ-淀粉样肽后即缝合皮肤，术后 4 周如嗅神经切断术中颅顶钻 孔后即缝合皮肤，行“嗅三针”治疗 4 周后检测相应指标。Ⅵ组（AD 模型+嗅神经 切断+嗅三针组）：于颅顶如 AD 造模方法中钻孔注 Aβ-淀粉样肽后即缝合皮肤，术 后 4 周行嗅神经切断术，行“嗅三针”治疗 4 周后检测相应指标。电针方法：迎香 穴向内上方斜刺 0.3cm，印堂穴向鼻根部平刺 0.3cm；电针参数：1mA 疏密波；正极 接印堂穴，负极接一侧迎香穴，疏密波刺激 10 分钟；负极换接另测迎香穴，疏密波 刺激 10 分钟，1 次/日。以上电针处理均在造模成功后第一天进行，5 日为一个疗程， 休息 2 天，共进行 4 个疗程。未行电针治疗组常规饲养至电针疗程结束。 结果：Morris 水迷宫、免疫组化及 RT-PCR 测试：在保留嗅觉通路的情况下，“嗅 三针”治疗后，与Ⅱ组（AD 模型组）相比，Ⅴ组（AD 模型+嗅三针组）水迷宫潜伏期 及游泳总路程皆明显减少，ChAT 的活性明显升高，AchE 的活性明显降低，Ach 的含 量明显增高，胆碱能 M1 受体的含量增高，M1 受体 mRNA 表达也提高，有显著性差异 （P＜0.05）；而在切断嗅觉通路的情况下，Ⅳ组（AD 模型+嗅神经切断组）与Ⅵ组 （AD 模型+嗅神经切断+嗅三针组）比较无显著性差异（P＞0.05），Ⅲ组（嗅神经切 断组）与Ⅳ组（AD 模型+嗅神经切断组）比较有显著性差异（P＜0.05）；提示：“嗅 三针”能够改善模型痴呆大鼠的学习、记忆能力；证明了嗅觉通路是“嗅三针”对 AD 海马区胆碱能系统代谢的干预的主要途径。 结论：通过本实验研究发现，“嗅三针”疗法不仅能够改善 AD 模型大鼠的学习、 记忆能力；而且也证实了嗅觉通路是“嗅三针”对 AD 海马区胆碱能系统代谢的干预 效应研究的主要途径。部分地阐明了“嗅三针”是通过嗅觉通路治疗 AD 的分子机制。 关键词： 嗅三针；胆碱能；嗅觉通路；AD Resear ch on t he i nt er vent i on of “Xiu san zhen” t o t he chol i ner gi c syst emat i c met abol i sm i n AD hi ppocampus Abst r act Obj ect i ve: This research observes the AD（Alzheimer Disease)model rats behaviors change , neurotransmitter activity of cholinergic system ，the content of acceptor and the mRNA expression when the rats’ olfactory pathway retain and cut off,reveals the AD model rats’ variety of ethology and pathology and accommodation for central cholinergic system in hippocampus by “Xiu san zhen”, confirms the olfactory pathway is the main way for intervention