引发条件对干旱胁迫下白花蛇舌草种子萌发及幼苗生长影响.docVIP

引发条件对干旱胁迫下白花蛇舌草种子萌发及幼苗生长影响 　　[摘要] 为了优化白花蛇舌草种子的引发条件，提高白花蛇舌草种子和幼苗的抗旱性，采用均匀设计优化GA3，KNO3，PEG等引发剂的引发浓度和引发时间，引发处理后种子置于15%PEG干旱胁迫下发芽并在1/4 Hoagland培养液中培养30 d。结果表明，366 mg·kg-1 GA3引发1 h显著促进白花蛇舌草种子萌发，提高干旱条件下种子的发芽率、发芽指数、活力指数并促进幼苗的生长；3.0% KNO3引发1 h显著促进白花蛇舌草种子萌发，但对白花蛇舌草幼苗期的抗旱性没有显著影响；PEG对白花蛇舌草种子发芽没有显著的引发效果。适宜浓度的GA3引发处理，可以促进白花蛇舌草种子萌发并增强其幼苗阶段的抗旱性。 　　[关键词] 白花蛇舌草种子；种子引发；干旱；种子发芽；幼苗 　　[收稿日期] 2013-09-18 　　[基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项（2009ZX09308-002，2012Z 　　[通信作者] 郭巧生，Tel：（025E-mail：gqs@njau.edu.cn 　　[作者简介] 朱再标，副教授，硕士生导师，研究方向为药用植物生长和次生代谢调控及其机制，Tel：（025E-mail：zhuzaibiao@njau.edu.cn 　　白花蛇舌草Oldenlandia diffusa （Willd.）Roxb.为茜草科一年生草本植物，以全草入药。药材名白花蛇舌草，其主要功效是清热解毒，活血消肿，止痛抗菌等[1]，内服多用于治疗恶性肿瘤、阑尾炎、肝炎、泌尿系统感染等疾病，外用可治疗毒蛇咬伤、痈肿疔疮等等。近年来白花蛇舌草广泛地被用于治疗临床各种癌症[2-3]。被《中国药典》作为成药原料药收载，每年需求量较大，仅靠野生收购已不能满足供应[4]。目前白花蛇舌草药材的需求量日益增加，栽培面积不断加大[5]。在大田栽培过程中发现出苗期土壤干旱对白花蛇舌草的发芽及苗期生长具有显著的抑制作用，并严重影响其最终产量。因此，亟需开展白花蛇舌草干旱胁迫相关研究，探索增强白花蛇舌草种子和幼苗抗旱性的有效途径。 　　近年来在白花蛇舌草的化学成分分析与测定、药理作用、栽培及繁育方面有较多报道，也进行了种子检验规程[5-6]、种子质量分级标准[7]、种子萌发特性[8]等方面的研究，但关于其种子引发方面的研究鲜见报道。本研究探索适宜的白花蛇舌草种子引发技术，以期提高白花蛇舌草种子在干旱条件下的抗逆性，为白花蛇舌草的高产优质栽培提供依据。 　　1 材料 　　白花蛇舌草种子于2010年10月采集于河南省确山县，经南京农业大学中药材研究所郭巧生教授鉴定，为白花蛇舌草O. diffusa种子。 　　PEG-6000，KNO3均购于广东汕头市西陇化工厂。赤霉素（GA3）购于中国上海惠兴生化试剂有限公司。 　　2 方法 　　2.1 引发处理 　　称取饱满、大小基本一致（千粒重10.45 mg）的白花蛇舌草种子1.500 0 g，蒸馏水反复冲洗后，擦干其表面浮水，在25 ℃下PEG，KNO3，GA3溶液（20 mL，以浸没种子为宜）中引发若干小时。采用U6（62）均匀设计，每个实验均为2因素、6水平，每种引发剂的浓度和引发时间构成1个试验。回干，使种子总重与处理前相同（在回干过程中进行几次称重）。以未处理的种子作为对照。 　　2.2 种子发芽试验 　　种子发芽前处理为流水冲洗2 h。将种子放入铺有沙床（在沙上铺1层滤纸）的培养皿中，在培养箱中进行培养，发芽温度25 ℃，光照时间8 h。每个培养皿100粒种子，6次重复。每日统计发芽情况，称重补水，第15天测定根长，第15天统计发芽率。发芽指数（Gi）=ΣGt/Dt（Gt为在第t天的种子发芽数，Dt为对应的种子发芽天数）。活力指数（Vi）= Gi×S（S为幼芽根长）。 　　2.3 植株形态测定 　　各引发处理的白花蛇舌草种子发芽后，将幼苗从培养皿中取出，根部用蒸馏水洗净，然后用1/4 Hoagland培养液进行培养30 d。测定幼苗根长、株高、根干（鲜）重、茎干（鲜）重。每个处理重复6次。 　　2.4 数据分析 　　采用中国数学会均匀设计分会 “Uniform design 5.0 V”软件进行数据分析，通过逐步回归分析建立非线性回归方程，并对回归方程进行分析[9]。采用SPSS 12.0统计软件对数据进行方差分析，以Duncancs新复级差法比较各处理间的差异性。 　　3 结果与分析 　　3.1 白花蛇舌草种子引发条件的优化 　　3.1.1 不同引发处理的发芽率、发芽指数和活力指数 根据均匀设计试验方案，得到白花蛇舌草种子的发芽率、发芽指数、